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咨询疾病动物模型建模原理

来源: 发布时间:2022年07月04日

该模型能够帮助我们研究pirb基因在免疫系统和神经系统的功能以及下游的调节机制。本发明的另一目的在于提供上述小鼠动物模型的构建方法。本发明所采用的第一种技术方案是:pirb基因敲入的小鼠动物模型,包括确定pirb基因的待敲入的特异性靶位点grna1和grna2,将pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的内含子1内,所述grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如。本发明所采用的第二种技术方案为:pirb基因敲入的小鼠动物模型的构建方法,将步骤3中性成熟的阳性f0小鼠分别与野生型鼠交配繁一代,获得f1代杂合子小鼠,通过pcr、测序和southern杂交确定动物基因型;将步骤4获得的f1代杂合子小鼠近交获得f2代纯合子小鼠。上海东寰在动物建模方面已经有了多年的技术经验。咨询疾病动物模型建模原理

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实验期间每天进行阴道涂片,观测动情周期变化。进一步地,检测水平是指:检测雌(e2)、促卵泡生长素(fsh)和促黄体生成素(lh)的水平。进一步地,检测对比卵巢重量是指:比较各组大鼠双侧卵巢脏器系数。进一步地,阴道涂片是指:采用阴道脱落细胞涂片法,使用染色剂为亚甲基蓝。本发明利用顺铂成功地建立了大鼠卵巢早衰模型,为基础研究建立稳定的卵巢早衰动物模型奠定了良好的基础。本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义。提及的术语和短语如有与公知含义不一致的,以本发明所表述的含义为准。附图说明图1:e2水平检测结果示意图。图2:fsh水平检测结果示意图。图3:lh水平检测结果示意图。图4:大鼠体重检测结果示意图。图5:大鼠卵巢重量统计示意图。咨询疾病动物模型建模原理上海东寰为您提供完善的裸鼠动物疾病模型。

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新华社上海4月9日电(记者张建松)利用先进的基因编辑技术,我国科学家在***神经性疾病的基础研究方面,取得重要进展。***在小鼠模型上,成功恢复长久性视力损伤小鼠的视力,同时还基本消除了帕金森模型小鼠的疾病症状。在科技部、国家自然科学基金委、中国科学院、上海市的相关项目资助下,由中国科学院脑科学与智能技术***创新中心(神经科学研究所)、上海脑科学与类脑研究中心、神经科学国家重点实验室杨辉研究组完成的这项研究,通过基因编辑技术,成功诱导胶质细胞“变身”为神经元。这为阿尔兹海默症、帕金森症、青光眼等众多神经退行性疾病的***,探索了一个新的途径。国际**学术期刊《细胞》8日在线发表了相关研究论文。人类的神经系统包含成百上千种不同类型的神经元。在成熟的神经系统中,神经元一般不会再生,一旦死亡,就是长久性的。而神经元的死亡,则会导致不同的神经退行性疾病。在常见的神经性疾病中,视神经节细胞死亡导致的长久性失明和多巴胺神经元死亡导致的帕金森症尤为特殊,它们都是由于特殊类型的神经元死亡所导致的。如何在成体中让视神经节细胞和多巴胺神经元获得再生?研究人员对小鼠模型的胶质细胞进行了基因编辑。

实验期间每天进行阴道涂片,观测动情周期变化。进一步地,检测***水平是指:检测雌***(e2)、促卵泡生长素(fsh)和促黄体生成素(lh)的水平。进一步地,检测对比卵巢重量是指:比较各组大鼠双侧卵巢脏器系数。进一步地,阴道涂片是指:采用阴道脱落细胞涂片法,使用染色剂为亚甲基蓝。本发明利用顺铂成功地建立了大鼠卵巢早衰模型,为基础研究建立稳定的卵巢早衰动物模型奠定了良好的基础。本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义。提及的术语和短语如有与公知含义不一致的,以本发明所表述的含义为准。附图说明图1:e2水平检测结果示意图。图2:fsh水平检测结果示意图。图3:lh水平检测结果示意图。图4:大鼠体重检测结果示意图。图5:大鼠卵巢重量统计示意图。图6:动情周期检测(光镜下10倍)示意图,其中,a、b、c、d依次为:动情前期,动情期,动情后期,动情间期。图7:he染色观察不同方法造模对卵泡形态的影响(光镜下10倍)示意图,其中,a、b、c、d依次为:空白组,2mg组,4mg组,6mg组。具体实施方式下面结合实施例对本发明作进一步的说明。然而,本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解,在不背离本发明的精神和范围的前提下~疾病动物模型建模价格。

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步骤3、pmsg处理c57bl/6雌性小鼠(6周龄,平均体重20g),46h后注射hcg,与雄性小鼠合笼交配,次日取受精卵进行显微注射,将步骤1的grna1、grna2、cas9蛋白以及线性化后的打靶载体一起注射到受精卵中,取注射后存活的受精卵移植到假孕母鼠体内,产出小鼠,即f0代小鼠。上述步骤中grna1、grna2的浓度均为2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射浓度为30~100ng/μl,cas9蛋白购自newenglandbiolabs,货号为m0386m。步骤4、提取f0代小鼠尾部dna,pcr扩增产物测序,鉴定是否为嵌合体。本发明用于f0代小鼠pirb基因pcr鉴定的特异性引物如下:pcrprimers1(℃):5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’。primers1对应的扩增产物大小为,primers2对应的扩增产物为。用于f0代小鼠测序的引物如下:sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer。动物模型的意义和优越性!咨询疾病动物模型建模原理

明确研究疾病的独特资源确定小鼠疾病模型的初步选择。咨询疾病动物模型建模原理

另外pirb在髓细胞和b细胞的表达随细胞分化增加。在免疫系统,pirb作为主要组织相容性复合物1(classimajorhistocompatibilitycomplex,mhc1)的受体,参与免疫调节,包括中性粒细胞和巨噬细胞整合素通路、细胞毒性t淋巴细胞、b淋巴细胞和体液—细胞免疫应答等。pirb的前两个细胞外免疫球蛋白结构域(d1-d2)介导mhci和pirb的结合。在系统(centralnervoussystem,cns),pirb在许多脑区包括皮层、海马、小脑和嗅球都有表达,但在成年脊髓不表达。在细胞层面,pirb不仅表达于神经元,也表达于星形胶质细胞。在许多病理条件下,如脑外伤、中风和cns,pirb的mrna和蛋白表达水平增加。咨询疾病动物模型建模原理

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