常用培养基的制备及注意事项一、实验目的了解培养基的配制原理;掌握配制培养基的一般方法和步骤;了解常见灭菌、清毒基本原理及方法;掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法。二、实验原理培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素和水。根据微生物的种类和实验目的不同,培养基也有不同的种类和配制方法。牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用较普遍和较普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的较基本的营养物质,所以可供微生物生长繁殖之用。干热天菌、高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。培养基制备器使用注射器将添加剂加入,确保了添加剂的无菌添加。湖北培养基制备器安装调试
培养基的验收:购买的培养基到货后,应有专人做好培养基接受和培养基验收工作,应仔细核对生产企业提供的关于培养基资料、培养基名称、规格数量、外观特征、批号、保质期是否符合要求。每批培养基到货物后都应对培养基的质量进行检测,满足检测方法规定的要求后方可投入使用。培养基是液体、半固体或固体形式的,含天然或合成成分,用于保证微生物繁殖或保持其活力的物质。保存是否得当、配制使用是否正确等都直接影响到检测结果的准确性。天津培养基制备器哪家好培养基制备器启停、正反、全速,调速、状态记忆(掉电记忆)等功能。
配制培养基的原则:灭菌处理:为了避免杂菌污染,获得微生物纯培养物,培养基必须及时严格灭菌。通常采用高压蒸汽灭菌。一般培养基用0.IMPa(121℃)维持15~30min即可彻底灭菌。长时间的高温灭菌会使某些不耐热的物质破坏,如使糖类物质形成氨基糖、焦糖。因此,含糖培养基常用0.05MPa(110℃)灭菌20~30min某些对糖类要求更高的培养基,可先将糖过滤除菌或间歇灭菌,再与其他已灭菌的成分混合。长时间高温灭菌也会使磷酸盐、碳酸盐与钙、镁铁等阳离子形成难溶性化合物而产生沉淀。为了防止这类沉淀发生,可将这些物质分别灭菌,冷却后再混合;也可在培养基中加入少量整合剂(0.01%乙二胺四乙酸,即EDTA)使金属离子形成可溶性络合物,防止沉淀的产生。高压蒸汽灭菌一般使培养基pH降低,应在配制培养基时加以调节。
全自动培养基制备器十分灵活——随时可以让你快速的灭菌制备高质量的培养基。这可以好大限度的减少用于储藏成品培养皿的空间,消除对培养皿储存的管理,保证高质量的培养基均一性。它能够迅速而温和的灭菌培养基并精确监控和控制灭菌过程中的时间、温度、压力等参数,从而保证其所有灭菌的产品都拥有同样的,其直观的图形界面及可编程功能能使每个人都能方便的操作这台仪器。培养基制备程序:Sampleprep可以快速的准备好灭菌,放入灭菌锅,“水套系统”里加入夹层水(灭菌锅与灭菌锅腔体之间的夹套水用于有效的热传导),加入培养基原料,准备启动灭菌程序。培养基可以直接在Sampleprep内悬浮溶解。强力磁力搅拌确保培养基在内腔里混合的均匀性,并防止凝结。培养基可以在灭菌前用WATERBATH(水浴)模式预先溶解。同时,直观的图形化界面使没有经过专门培训的人员也能方便的操作。用户可以自定义设置多达50个灭菌程序,比如灭菌温度、时间、分装温度等。它们可以被储存起来并随时调用。培养基制备器是供微生物、植物、动物组织和细菌生长和维持生长用的人工配置的养料。
含琼脂的培养基有时在平板上不凝固或凝固不好问题:在此种情况下,建议对于需要高压灭菌的培养基,倒入平板前先摇一摇。主要是琼脂培养基的分子量比较大,在冷却过程中容易沉淀到底,造成琼脂不能均匀分布。对于无需高压灭菌的培养基,不能直接煮沸溶解后倒入平板、需要重复三至五次煮沸溶解过程,因一次无法保证琼脂完全溶解。微生物培养基成分中含有染料或指示剂;不同批次的粉状培养基含水量不同。一般要求≤6。含水量越高,颜色越深;研磨时间越长,颜色越深等三个原因。培养基配好后不宜久置,很好现配现用。湖北培养基制备器安装调试
培养基制备器真彩色液晶屏显示,触摸屏加按键操作。湖北培养基制备器安装调试
孢子培养基:孢子培养基是供菌种繁殖孢子的一种常用固体培养基,对这种培养基的要求是能使菌体迅速生长,产生较多较好的孢子,并要求这种培养基不易引起菌种发生变异。所以对孢子培养基的基本配制要求是:靠前,营养不要太丰富(特别是有机氮源),否则不易产孢子。如灰色链霉在葡萄糖-硝酸盐-其它盐类的培养基上都能很好地生长和产孢子,但若加入0.5%酵母膏或酪蛋白后,就只长菌丝而不长孢子。第二,所用无机盐的浓度要适量,不然也会影响孢子量和孢子颜色。第三,要注意孢子培养基的pH和湿度。生产上常用的孢子培养基有:麸皮培养基、小米培养基、大米培养基、玉米碎屑培养基和用葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏和食盐等配制成的琼脂斜面培养基。大米和小米常用作霉菌孢子培养基,因为它们含氮量少,疏松、表面积大,所以是较好孢子培养基。大米培养基的水分需控制在21%-50%,而曲房空气湿度需控制在90%-靠前。湖北培养基制备器安装调试