培养基是生物制品领域中常用的物质,在细菌和细胞培养中十分必要,但是现有技术中有些培养基的某种组份容易分解,造成保存时间短等问题,导致培养基的使用成本十分高。其中,在动物培养基中,谷氨酰胺是一种必要的组份,但是在常温下,很短的时间内,约7-10日中培养基中的谷氨酰胺成份就可降解90%以上,这给其商品化带来很大的困难。这样的培养基在现有技术中很多,都具有上述的缺陷,例如,中国CN1087778C公开了一种杂交瘤细胞的无血清培养基,其中包含有谷氨酰胺成份,但是这种培养基的保存时间十分有限,很难达到商业使用的目的。微生物只有在营养物质浓度及其比例合适时才能良好生长。触摸屏培养基制备器价格
培养基的配制:分装:一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。三角瓶:若作静置培养,则100ml培养基/250ml的三角瓶,很多不能超过150ml培养基/250ml的三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15~20ml培养基/250ml的三角瓶,保证通气良好。试管分装:液体培养基一般装4~5ml,约试管的1/4高度;固体斜面培养基一般装3~4ml,约试管的1/5高度。包扎:分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。灭菌:按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。摆斜面:灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放,使其凝固成为一个斜面,约占试管长度的1/2。贮存:培养基在30℃下放置,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。内蒙古培养基制备器报价制备培养基的操作要点:体培养基营养成分分布均匀。
培养基的过滤澄清:液体培养基必须较全澄清,琼脂培养基也应透明无明显沉淀,因此,须要采用过滤或其它澄清方法以达到此项要求。一般液体培养基可用滤纸过滤法,滤纸应拆叠成折扇成漏斗形,以避免因液压不均匀而引起滤纸破裂。琼脂培养基可用清洁的白色薄绒布趁热过滤。亦可用中间夹有薄层吸水棉的双层纱布过滤。新制肉、肝、血和土豆等浸液时、则须先用绒布将碎渣滤去,再用滤纸反复过滤。如过滤法不能达到澄清要求、则须用蛋清澄清法。即将冷却至55-60℃的培养基放入大的三角烧瓶内,装入量不得超过烧瓶容量的1/2,每1000ml培养基加入1-2个鸡蛋的蛋白.强力振摇3-5分钟,置高压蒸汽灭菌器中、121℃加热20分钟、取出趁热以绒布过滤即可。
平板的制备和储存:倾注融化的培养基到平皿中,使之在平皿中形成厚度至少为3mm(直径90mm的平皿,通常要加入18mL〜20mL琼脂培养基)。将平皿盖好皿盖后放到水平平面使琼脂冷却凝固。如果平板需储存,或者培养时间超过48h或培养温度高于40℃,则需要倾注更多的培养基。凝固后的培养基应立即使用或存放于暗处和(或)5±3℃冰箱的密封袋中,以防止培养基成分的改变。在平板底部或侧边做好标记,标记的内容包括名称、制备日期和(或)有效期。也可使用适宜的培养基编码系统进行标记。将倒好的平板放在密封的袋子中冷藏保存可延长储存期限。为了避免冷凝水的产生,平板应冷却后再装入袋中。储存前不要对培养基表面进行干燥处理。对于采用表面接种形式培养的固体培养基,应先对琼脂表面进行干燥:揭开平皿盖,将平板倒扣于烘箱或培养箱中(温度设为25~50℃);或放在有对流的无菌净化台中,直到培养基表面的水滴消失为止。注意不要过度干燥。商品化的平板琼脂培养基应按照厂商提供的说明使用。选择性培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。
天然培养基是指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基,如血浆、血清、、鸡胚浸出液等。组织培养技术建立早期,体外培养细胞都是利用天然培养基。但是由于天然培养基制作过程复杂、批间差异大,因此逐渐为合成培养基所替代。较广使用的天然培养基是血清,另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是必不可少。血清种类:目用于组织培养的血清主要是牛血清,培养某些特殊细胞也用人血清、马血清等。选择用牛血清培养细胞的原因:来源充足、制备技术成熟、经过长时间的应用考验人们对其有比较深入的理解。牛血清对绝大多数哺乳动物细胞都是适合的,但并不排除在培养某种细胞时使用其他动物血清更合适。牛血清是细胞培养中用量很大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,具有极为重要的功能。在配制用于观察和定量测定微生物生长状况的合成培养基时,常需在培养基中加入少量螯合剂。琼脂灭菌 培养基制备器报价
培养基制备器通过分装口可以定量添加无菌添加剂。触摸屏培养基制备器价格
配置培养基注意问题:1、根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基。2、注意各种营养物质的浓度及合适配比,保持合适渗透压。3、将培养基的pH控制在适宜的范围之内,以利于不同类型微生物的生长繁殖或代谢产物的积累。4、要注意各种原料的配比,每种培养基的配比合适的配比,可以按照老师的要求去做。5、如需要加热的时候注意时间的把握。培养基,是指供给微生物、植物或动物生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。触摸屏培养基制备器价格