如何提高细胞外囊泡产量?尽管基于外泌体具有巨大潜力,但传统生产方式产量低和放大困难等特点,严重制约了外泌体的临床应用转化。维思克思总结了提高外泌体产量的方法,包括物理和化学刺激、增加钙离子内流、细胞骨架固定、药物刺激以及特定基因的过表达等,可有效提高外泌体表达量。具体有哪些方法可以提高细胞外囊泡产量呢?01培养条件。采用3D培养替代传统2D培养可提高外泌体产量。缺氧可刺激细胞分泌外泌体。此外,适度降低pH值可显著提高外泌体的表达量。02物理刺激。采用物理刺激的方法可明显增加外泌体的产量。常用物理刺激包括:剪切力、周期性张力、声音和电场刺激等。03分子干预。一般来说,细胞处于应激状态下会增加外泌体的分泌。04诱导表达。脂质体通过内吞作用刺激细胞活性,明显增加外泌体分泌量。磁性纳米微粒可刺激细胞的内吞功能,可增加外泌体表达。以上这些策略均为来自特定细胞和特定条件下所得到的结果。想跳过繁琐的优化过程,直接使用上高产又稳定的外泌体培养基吗?维思克思推出的外泌体培养基(WSC0008)和无外泌体血清可满足您的要求!外泌体研究工具原料溯源体系完善,保障产品质量可追溯,降低风险。尿液Exosome定量

外泌体是科学研究的热点,可怎么才能追踪到外泌体在体内的踪迹呢?很多研究者都被这一点给难住了。尽管市面上已经有了许多追踪染料,但这些染料要么就是荧光信号太弱,要么就是背景太高,都存在很多不足。维思克思曾经也深受其害,经过长时间的沉淀与积累,我们终于带来由发明专利“一种pH敏感型探针分子及其应用、一种探针分子的合成方法”转化而来的示踪试剂盒!外泌体标记步骤:1试剂准备。使用时将WisTracker提前从-20℃取出,避光解冻后备用。2标记外泌体。将解冻后的WisTracker添加到外泌体溶液中,室温避光反应30min。3游离探针的去除。推荐用维思克思的WSR0015一步普通离心去除游离探针,得到纯净的荧光标记外泌体。外泌体示踪步骤:1接种细胞。取合适密度的细胞,接种于共聚焦平皿中置于合适条件下培养。2孵育外泌体。细胞计数,当细胞生长到70%时,加入荧光标记的外泌体于细胞培养条件下避光孵育2-4h。3清洗与染色。取出平皿,用PBS清洗3次,加入DAPI溶液,室温避光孵育10min,孵育完成后再用PBS清洗3次。4荧光检测。在激光共聚焦显微镜下观察细胞和外泌体,并拍照记录。工程化Exosome标志物外泌体研究工具主要技术自主研发,持续迭代升级,提升研究价值。

外泌体表征与定量难在什么地方?又该怎么做?我们拜访过很多外泌体研究工作者,其中谈到多的是外泌体难以分离,分离后的外泌体不好定量,定量的外泌体数据是否准确等问题。2.单一表征方法的局限性对外泌体的纯度表征目前采用的是外泌体阴性蛋白标志、颗粒蛋白比。外泌体阴性蛋白标志一般采用WB检测,属于定性检测,与样本处理、抗体、显色、曝光时间等多个因素有关,如果作为纯度表征的指标,显然是不合适的。在蛋白聚集体或其他杂质(糖/脂质/核酸等)聚集体/大颗粒较多时,颗粒蛋白比的数值也可能较大,其作为纯度表征指标也有其局限性。既然上述外泌体定量方法、表征方法具有其局限性,那么如何科学的对外泌体进行定量和表征呢?
相信大家一直都被一个问题困扰,什么样的外泌体才是好的外泌体呢?采购外泌体时,如何判断外泌体质量?现在,我们对外泌体供应商-维思克思的外泌体WSR0014-1进行测评。咱们来看看高质量的外泌体到底长什么样?一、首先对外泌体进行鉴定。首先要证明是外泌体,那如何证明呢?一般从三大基础表征维度进行分析:形态、粒径分布、外泌体标志蛋白。二、确定外泌体颗粒数与纯度。还需另一重要表征维度外泌体的纯度。在做实验时,怎样考察纯度呢?不同来源的外泌体,因获取样本的不一致,每种样本中杂蛋白的含量不尽相同,同时分离方法也不一定相同,这可能导致不一致的实验结果。外泌体纯度表征可以用颗粒数/蛋白、颗粒数/RNA、蛋白/脂质、脂质/RNA等多个维度来评估外泌体纯度,避免mian单一方法的局限性。备注:脂质浓度用维思克思WSR0028-2测量;RNA浓度用维思克思WSR0039测量。三、评估外泌体的安全性。如果用来做细胞或动物实验,外泌体中含有影响细胞或动物的成分,实验的结果将会令人非常诅丧。这次测评将外泌体的安全性指标进行的评估,包括内外源病毒、细菌、支原体的检测,结果显示安全性指标全部合格。外泌体研究工具标准化质量检测,每批次严格质控,保障实验可靠性。

EVs研究中,通常EVs来源,纯化方法,定量技术,给药对象等这些因素都会导致给药剂量的差异。因此建立一个完善给药剂量系统就显得尤为重要。确定EVs有效剂量建议分为两个方向,一个是长期层面;一个是短期层面。长期上需要众多EVs从业者,制定有效的、适用于不同来源、不同生产工艺、不同纯化方法的EVs量化或表征方法,这个层面无法短期内实现。在短期内,比较好购买商品化EVs,或者自己确定固定来源和生产工艺、定量方法的EVs,然后做细胞或动物的量效实验时,做梯度稀释的量效实验,以确定比较好的给药剂量,此方法可以。为尽快解决问题,达到预期实验效果,只能从短期层面考虑。维思克思在外泌体行业深耕近十年,总结出EVs剂量的方案:选用维思克思MSC/HEK293/NK/植物外泌体标准品可缩短时间,提高实验效率。外泌体标准品的来源、生产工艺、纯化方法等都为固定的,外泌体标准品需试验确定一次剂量即可,后续实验都可使用统一剂量。该种方法更为简便易得且节约时间。除商业化外泌体以外,同时还配套了外泌体研究相关产品,包括但不仅限于细胞培养基、外泌体分离、提取试剂盒、外泌体示踪试剂盒等产品。外泌体研究工具全流程质量管控,从生产到售后,保障实验可靠性。脐带间充质Exosome靶向
外泌体研究工具适配多种检测设备,无需专门的仪器,降低设备投入。尿液Exosome定量
你真的知道如何正确收集和保存EVs吗?样本的收集和保存是导致实验结果不确定性的一个重要来源。维思克思长期研究以及不断试错得出的“EVs样本收集和保存”经验,分享给各位外泌体研究者。血液。血液采集优先隔夜空腹。血浆通常是EVs的优先来源,因为在制备血清时凝块形成期间会释放额外的EVs。目前,血清的主要应用是研究miRNA。要制备血浆,血液需要抗凝。细胞培养上清分离EVs。污染EVs和可检测到的非EV组分的主要来源是培养基中的血清。如果细胞不能在无血清培养基中生长,获取的EVs将不再纯净,后续研究结果也将不准确。建议超速离心从血清中去除EVs或购买不含EV血清(WSC0020);培养中监测细胞活率,确保大于90%,否则会释放凋亡小体和细胞碎片等其他囊泡,影响实验。WSR0020-3采用独特配方,可减少EVs的损耗;在动物实验中,无蛋白配方可明显降低毒性反应。冻存保护剂选型若需要进行冻干处理,选择WSR0020-3(冻干兼容);若用于动物注射实验,选择WSR0020-3(无蛋白配方,低内);若-80℃短期保存,选择WSR0020(经典款,性价比推荐)。尿液Exosome定量
维思克思生物科技(武汉)有限公司是一家有着雄厚实力背景、信誉可靠、励精图治、展望未来、有梦想有目标,有组织有体系的公司,坚持于带领员工在未来的道路上大放光明,携手共画蓝图,在湖北省等地区的机械及行业设备行业中积累了大批忠诚的客户粉丝源,也收获了良好的用户口碑,为公司的发展奠定的良好的行业基础,也希望未来公司能成为*****,努力为行业领域的发展奉献出自己的一份力量,我们相信精益求精的工作态度和不断的完善创新理念以及自强不息,斗志昂扬的的企业精神将**维思克思生物科技供应和您一起携手步入辉煌,共创佳绩,一直以来,公司贯彻执行科学管理、创新发展、诚实守信的方针,员工精诚努力,协同奋取,以品质、服务来赢得市场,我们一直在路上!