外泌体RNA研究的正确打开方式外泌体中有许多货物,包含蛋白质、脂质、糖、代谢物和核酸等,从论文发表数量统计来看,外泌体发挥功能的分子机制研究中RNA占比是比较高的。然而外泌体与组织或细胞RNA相比,在提取和质控上差异较大,不能延用目前主流的产品和技术;同时,外泌体RNA质量控制等也缺乏统一的标准化方案,这些因素将阻碍外泌体RNA的研究。外泌体与细胞RNA相比,有一些差异:1.有来自供体细胞或周围环境RNA的污染;2.外泌体RNA非常微量;3.外泌体RNA中小RNA含量比较高;4.常规的RNA质控方法不适用。综上,对外泌体RNA研究人员,需要选择种高特异、高回收的外泌体分离或RNA提取方法,配合严谨的外泌体RNA质控方法,才能呈现出良好的、准确的、严谨的研究数据和科学结论。针对以上问题,维思克思推荐使用外泌体RNA提取试剂盒(WSR0004-3)、氯仿替代物(WZ13)、外泌体RNA质控试剂盒(WSR0013-1)、外泌体RNA定量试剂盒(WSR0039)。外泌体研究工具标准化质量检测,每批次严格质控,保障实验可靠性。地黄外泌体标准品

外泌体的保存是否重要?在外泌体研究中,储存稳定性是一直困扰广大科研工作者的难题。目前外泌体一般在PBS中,置于-80℃分装冻存,但随着冻存时间和冻融次数的增加,将会严重影响外泌体的活性、完整性、货物含量等。针对上述难点,维思克思开发出外泌体的冻存保存液,直接混入外泌体样本中,置于-20℃、-80℃冻存,可明显改善储存样品的短期和长期稳定性。产品特点:操作简便,可直接混入外泌体样本中,无需过多操作。保护效果好,使用后外泌体生物活性稳定,多次冻融后外泌体颗粒数、表面标志物蛋白均无明显差异。适用样本范围广,可适用于所有外泌体样本(包括植物、动物、微生物、人来源外泌体)。产品信息:WisExoExosomeProtector(WSR0020)脐带间充质Exosome代谢组外泌体研究工具小剂量包装设计,适合少量多次实验,减少试剂浪费。

你分离的血清/血浆外泌体真的干净吗?对于血清和血浆等复杂样本,分离外泌体是十分棘手的。主要原因是血液样本的成分比较复杂,很容易造成细胞外囊泡的污染。脂蛋白颗粒就是常见细胞外囊泡难以分离的污染物之一。外泌体与脂蛋白的体积、密度十分相近,以至于很多传统的方法都不能把他们完全分离。1.密度梯度超速离心高密度脂蛋白的密度与细胞外囊泡密度相近,所以它是密度梯度离心主要的污染脂蛋白。低密度脂蛋白虽密度低于EV,但离心的方法还不足以完全将二者分开。因此使用密度梯度超速离心的方式可能无法完全排除脂蛋白污染的可能性。2.分子排阻法(SEC)SEC是根据粒径大小进行外泌体分离。脂蛋白与外泌体尺寸相近,尤其是极低密度脂蛋白与乳糜微粒。因此,也无法通过分子排阻法将脂蛋白与细胞外囊泡完全分离。3.超速离心法在粒径和密度相差不大的情况下,颗粒的沉降速度也相差不大。尤其是脂蛋白颗粒数远超于外泌体时,被称为金标准的超离法也稍显不足了。基于此,维思克思推荐选择磁珠法(WSR0002-2),是基于自主研发的均相液体磁珠,可特异性捕获外泌体而不吸附杂质,实现高纯度外泌体分离。
大体积外泌体样本量分离方法总结大体积外泌体样本在浓缩后根据不同应用,需衔接不同的外泌体分离方法。维思克思总结出现在常用、简便、效果比较好的三种方法。SEC重力柱是基于分子排阻色谱原理,根据被分离组分分子大小差异进行外泌体的分离。具有操作简便、高纯度和高回收率等优点,特别适用于大体积样本中的外泌体分离。分离的外泌体可用于WB分析、NTA或纳米流式粒径分析、电镜检测、组学研究、细胞和动物功能研究等。(WSR0003)SEC离心柱是离心柱式的外泌体分离产品,离心柱中装填的介质能无差别的吸附杂质而不结合外泌体,实现超快速、高收率的外泌体分离。分离的外泌体可用于WB分析、NTA或纳米流式粒径分析、电镜检测、组学研究、细胞和动物功能研究等。(WSP0016)磁珠法外泌体分离试剂盒基于自主研发的均相液体磁珠,能特异性捕获外泌体,实现高纯度、高回收率外泌体分离。具有操作简便、高纯度和高回收率等优点,特别适用于血浆、血清等复杂样本中的外泌体分离。分离的外泌体可用于WB分析、NTA或纳米流式粒径分析、电镜检测、组学研究、细胞和动物功能研究等。(WSR0002-2)外泌体研究工具稳定批次生产,确保实验重复性,降低结果波动风险。

外泌体研究常见问题解答11.外泌体是什么?通常,外泌体被定义为约1.13-1.19g/mL的囊泡(基于密度梯度离心),预期尺寸为30–150nm(基于电镜分析)。由活细胞分泌到细胞外环境的膜性小囊泡,是细胞间信息传递的重要载体,参与细胞间相互作用。几乎所有类型的细胞,都可以产生并释放外泌体。根据不同生物来源分类,外泌体分为动物细胞外泌体、植物外泌体、微生物外泌体。动物细胞来源的外泌体也可以通过其表面蛋白标记物来定义和鉴定,这些标记物包括:四跨肽(CD63、CD81、CD9)和其他类似ALIX、TSG101等标记物。目前没有合适的工具,也没有足够的知识来对外泌体做出明确而简单的定义,将其与其他微/纳米囊泡区分开。外泌体研究工具梯度规格选择,满足不同实验规模,成本可控性强。天山雪莲Exosome鉴定
外泌体研究工具高效生产周期,快速响应订单,满足紧急实验需求。地黄外泌体标准品
外泌体研究常见问题解答134.当我的Westerns似乎不起作用时,我该怎么办?这有几个典型的原因:(1)添加的样本量不足。外泌体可能含有相当少量的蛋白质货物。对于初始实验,我们建议添加尽可能多的样本。(2)抗体不是比较好的。我们建议测试2-3家制造商的抗体(如抗CD63或其他外泌体标记物),仔细检查推荐的浓度。此外,它们比较好是新鲜使用,并且需要妥善储存。(3)根据外泌体表面标记,某些凝胶条件可能对靶抗体更为优化(例如还原/非还原和变性/非变性)。我们建议与制造商和外泌体社区核实您所针对的特异性标记物和您所使用的特异性抗体的推荐条件。(4)一般Westerns技术。Western可能很棘手,我们建议使用阳性对照进行初步测试,以确保整个工作流程正常运行。任何蛋白质或抗体都可以使用,只要它们满足您需要的条件(例如变性与非变性)。此外,在挑选蛋白质时,尽量避开样本中浓度非常高或非常低的蛋白质,以防止印迹过载或完全没有信号。地黄外泌体标准品
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