分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光线透过测试的样品后，部分光线被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。
单色光辐射穿过被测物质溶液时，被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度（光路长度）成正比，其关系如下式：
A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc
式中 :A 为吸光度；
I0为入射的单色光强度；
I 为透射的单色光强度；
T 为物质的透射率；
k 为摩尔吸收系数；
L 为被分析物质的光程，即比色皿的边长；
c 为物质的浓度；
物质对光的选择性吸收波长，以及相应的吸收系数是该物质的物理常数。当已知某纯物质在一定条件下的吸收系数后可用同样条件将该供试品配成溶液，测定其吸收度,即可由上式计算出供试品中该物质的含量。在可见光区，除某些物质对光有吸收外，很多物质本身并没有吸收但可在一定条件下加入显色试剂或经过处理使其显色后再测定,故又称比色分析。由于显色时影响呈色深浅的因素较多，且常使用单色光纯度较差的仪器，故测定时应用标准品或对照品同时操作。
A320nm 或A340nm——是基线校准波长，为检测溶液样品的浊度和其他干扰因子。河北超微量分光光度计
分光光度法是在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性或定量分析。常用的波长范围为：(1)200～380nm的紫外光区，(2)380～780nm的可见光区，(3)2.5～25μm（按波数计为4000cm<-1>～400cm<-1>）的红外光区。所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计（或比色计）、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度，所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定，定期进行校正检定。甘肃国产超微量分光光度计价格优惠物质对光的选择性吸收波长，以及相应的吸收系数是该物质的物理常数。
Micro Drop比色皿检测基本操作：
1. 准备好两个比色皿，一个加入空白检测液，一个加入样品，保证加入的液体量足够，能盖过光束，光束（2mm宽）位置在比色皿底部以上8.5mm的位置，请按照比色皿生产厂家的建议加入液体。
2. 抬起样品臂，把比色皿插入到仪器中，插入比色皿时要注意透光面，与仪器上面的光路指向的方向相对应。
3. 在做比色皿检测时样品臂必须放下来。
4. 在Micro Drop软件上的“选项”框中选择“使用比色皿”， 插入比色皿，勾选基线校正，设置相应参数进行空白检测及检测。
5. 当检测完成后，移出比色皿，倒出样品，清洗干净比色皿。
超微量分光光度计不仅涵盖了可见光分光光度计的功能而且也可以进行紫外分光光度计的应用：
（二）UV-VIS常规可见-紫外检测：
全波长超微量分光光度计可以像普通的紫外-可见分光光度计一样行使功能。如BIO-DL MicroDrop可以显示从185到910nm的光波下样品的吸光值。**多可以同时指定检测40个波长下的吸光值并把数据显示在报告中。
（三）蛋白质的直接定量(UV法)：
这种方法是在280nm波长，直接测试蛋白。蛋白质测定过程非常简单，先测试空白液，然后直接测试蛋白质。蛋白质直接定量方法，适合测试较纯净、成分相对单一的蛋白质。紫外直接定量法相对于比色法来说，速度快，操作简单；但是容易受到平行物质的干扰，如DNA的干扰；另外敏感度低，要求蛋白的浓度较高。
双光束分光光度计 以两束光一束通过样品、另一束通过参考溶液的方式来分析样品的分光光度计。
超微量分光光度计的应用：
（一）核酸的定量：
核酸的定量是超微量分光光度计使用频率比较高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链DNA、双链DNA，以及RNA。核酸的比较高吸收峰的吸收波长260nm。每种核酸的分子构成不一，因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应消光因子。如：1OD的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA，37μg/ml的ssDNA，40μg/ml的RNA，30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算，从而得出相应的样品浓度。除了核酸浓度，分光光度计显示几个非常重要的比值表示样品的纯度，如A260/A280的比值，用于评估样品的纯度，因为蛋白的吸收峰是280nm。纯净的样品，比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8或者2.0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。A230表示样品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等，较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0。
消光系数是被测溶液对光的吸收大小值。福建高灵敏度超微量分光光度计菌液检测
荧光分光光度计有两个单色器，而一般紫外可见分光光度计只有一个单色器。河北超微量分光光度计
朗伯一比尔（Lambert - Beer）定律是分光光度法定量分析依据的基本原理。当一束单色光（指路由一种颜色的光）通过一均匀的溶液时，一部分被吸收，一部分透过。
朗伯比尔定律：A = abc
其意义为：当一束单色光通过一均匀溶液时，溶液对单色光的吸光度与溶液浓度和液层厚度的乘积成正比。
A =abc 中，吸光系数a，表征吸光物质的 灵敏度。a值越大，灵敏度越高。如果浓度的单位为物质的量浓度（单位为：mol/L），则吸光系数a可以写成ε ，ε称为摩尔吸光系数。
由上式可知，当溶液层厚度b和吸光系数a固定时，吸光度A与溶液的浓度成线性关系。在定量分析时，首先需要测定溶液对不同波长光的吸收情况（吸收光谱），从中确定比较大吸收波长 ，然后以此波长 的光为光源（单色光），进行吸光度A的测定，这是朗伯比尔定律用于定量分析的首要条件。
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