病理实验外包,病理染色荧光原位杂交技术详细介绍1、原理FISH(fluorescenceinsituhybridization)技术是一种重要的非放射性原位杂交技术。它的基本原理是:如果被检测的染色体或DNA纤维切片上的靶DNA与所用的核酸探针是同源互补的,二者经变性-退火-复性,即可形成靶DNA与核酸探针的杂交体。将核酸探针的某一种核苷酸标记上报告分子如生物素、地高辛,可利用该报告分子与荧光素标记的特异亲和素之间的**化学反应,经荧光检测体系在镜下对待测DNA进行定性、定量或相对定位分析。2、实验流程FISH样本的制备→探针的制备→探针标记→杂交→(染色体显带)→荧光显微镜检测→结果分析。3、特点原位杂交的探针按标记分子类型分为放射性标记和非放射性标记。用同位素标记的放射性探针优势在于对制备样品的要求不高,可以通过延长曝光时间加强信号强度,故较灵敏。缺点是探针不稳定、自显影时间长、放射线的散射使得空间分辨率不高、及同位素操作较繁琐等。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。南京英瀚斯 -病理实验外包-提供高效检测分析服务。湖南真实病理实验外包实验室
病理实验外包,病理染色常见染色介绍番红-固绿(骨)染色:番红O-固绿染色可直观反映关节软骨、软骨下的骨组织结构,软骨呈红色,成骨呈绿色,对比鲜明,区分清晰,在关节软骨及软骨下骨的形态学研究中备受青睐。嗜碱性的软骨组织与碱性染料番红O结合呈现红色,嗜酸性的骨组织和酸性染料固绿结合而呈绿色或蓝色。本质上,番红O与蛋白聚糖中的多聚阴离子物质(硫酸软骨素和硫酸角质素)成正向比例结合(离子浓度),不与胶原结合,可间接反应基质中蛋白聚糖的含量与分布。正常的软骨基质分布均匀一致,当软骨受到损伤时,创伤刺激可使软骨基质中糖蛋白立即释放活化,使基质成分发生变化,导致番红O淡染,甚至失染。固绿可与结构疏松的胶原纤维牢固结合,不宜褪色。简要流程:石蜡切片/细胞爬片/冷冻切片→脱蜡至水→固绿染色→番红O染色→脱水、透明、封片(中性树胶)→番红O-固绿染**(成骨呈绿色,软骨呈红色)。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。湖南真实病理实验外包实验室病理实验外包检测需要注意哪些方面。
病理实验外包,病理染色常见染色介绍透射电镜检测:通过电子束穿透细胞和组织,从而可以观察细胞内的超微结构。其放大倍数更大,真空要求也更高。透射电子显微镜可以看到在光学显微镜下无法看清的小于0.2nm的亚显微结构或超微结构。电子显微镜技术的应用是建立在光学显微镜的基础之上的,光学显微镜的分辨率为0.2μm,透射电子显微镜的分辨率为0.2nm,也就是说透射电子显微镜在光学显微镜的基础上放大了1000倍。透射电镜的电子束通过样品后由物镜成像于中间镜上,再通过中间镜和投影镜逐级放大,成像于荧光屏或照相干版上,分辨细微物质结构;能在看到表面的图像的同时也看到内层物质。用于******电镜检查的标本必须制成50~100nm的超薄切片。常用的切片方法有:超薄切片法、冷冻超薄切片法、冷冻蚀刻法、冷冻断裂法等。对于液体样品,通常是挂预处理过的铜网上进行观察。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。
病理实验外包,病理染色常见染色介绍油红O染色:油红O脂肪染色法是指在日常病理诊断和科研工作中为了显示组织内的脂肪常采用油红O进行染色的方法,油红O为脂溶性染料,在脂肪内能高度溶解,可特异性的使组织内甘油三酯等中性脂肪着色。肝细胞内的脂肪滴呈红色,细胞核呈蓝色1.标本人或动物的肝组织等,甲醛—钙液固定,冰冻切片,厚10μm。2.改良的油红O染色液油红O0.5g,50%乙醇100ml。将油红O溶于乙醇内,且不断搅拌至完全溶解即可。配制好的染液置磨口瓶内保存备用。3.染色步骤①切片干燥后入50%乙醇稍洗;②油红O乙醇染液作用8min;③50%乙醇分化,自来水终止分化;④苏木素复染核,自来水返蓝,甘油明胶封片。病理实验外包检测、细胞实验外包,靠谱专业的实验外包平台。
病理实验外包,病理染色黑色素染色1.Masson-Fontana黑色素银浸染色法黑色:黑色素及嗜银细胞颗粒红色:胶原纤维浅黄色:背景2.Lillie亚铁染色法暗绿色:黑色素浅绿或不着色:背景黄色:肌纤维和背景含铁血黄素染色Perlsblue(普鲁士蓝)反应显示三价铁蓝色:含铁血黄素浅红色:其他组织胆色素染色三氯醋酸染色法绿色:胆色素红色和黄色:其他南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。内皮祖细胞分离培养其他原代细胞分离培养transwell细胞共培养细胞接触式共培养病理实验外包检测那些事儿,南京英瀚斯生物。福建靠谱的病理实验外包哪家好
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病理实验外包,冰冻切片取样实验步骤:一、取材应尽可能快地采取新鲜的材料,防止组织发生死后变化。二、速冻1.将组织块平放于软塑瓶盖或特制小盒内(直径约2cm)。2.如组织块小可适量加OCT包埋剂浸没组织,然后将特制小盒缓缓平放入盛有液氮的小杯内。3.当盒底部接触液氮时即开始气化沸腾,此时小盒保持原位切勿浸入液氮中,大约10~20s组织即迅速冰结成块。4在制成冻块后,即可置入恒冷箱切片机冰冻切片。5.若需要保存,应快速以铝箔或塑料薄膜封包,立即置入-80℃冰箱贮存备用。三、固定1.样品托上涂一层OCT包埋胶,将速冻组织置于其上,4℃冰箱预冷5~10min让OCT胶浸透组织。2.取下组织置于锡箔或者玻片上,样品托速冻。3.组织置于样品托上,其上再添一层OCT胶,以完全覆盖为宜,速冻架(PE)上30min。湖南真实病理实验外包实验室
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