什么是缓冲液?缓冲液(Buffersolution)通常是由「弱酸及其共轭碱」或「弱碱及其共轭酸」缓冲对所组成的溶液,能够在加入一定量其他物质时减缓pH的改变。以生物实验中**常用的一种缓冲液PBS为例,是由Na2HPO4、KH2PO4组成的缓冲对,在PH5.8-8.0范围内有较强的缓冲能力。为了保证缓冲液有足够强的缓冲能力,在配制缓冲溶液时,需要做到:为使共轭酸碱对的浓度比接近于1,应根据所需要维持的pH范围选择合适的缓冲对,使其中的弱酸的pKa等于或接近于所要求的pH。例如,生物培养液中需用PH=7.0的缓冲溶液,已知H2PO4-的pKa2=7.21,因此,H2PO4—HPO42-是可以选择的合适的缓冲对。如若配制PH=9.0的缓冲溶液,则可选择NH3·H2O-NH4Cl缓冲对(pKa(NH4+)=9.25)。药用级TRIS-HCl应用。吉林TRIS医院采购
实际应用中各缓冲对组成的缓冲溶液都有比较好的缓冲范围。在实际生产过程中,如果选择的缓冲溶液缓冲范围与预期偏差较大,使用大量强酸/强碱或许可以强行将溶液pH调至预期值,但此时溶液体系的缓冲容量已消耗殆尽,无法起到应有的缓冲保护效果,对制剂产品后续的加工及长期储存稳定性造成影响。因此,要用好缓冲溶液,需对不同的缓冲溶液有具体的了解。以下介绍几种常见的缓冲溶液及用途,为大家深入理解缓冲溶液提供参考。艾伟拓氨丁三醇辽宁辅料TRIS药用采购如果要了解更多tris相关资讯,敬请关注AVT。
前述不同缓冲溶液虽然有相似之处,同时也存在差异,主要体现为以下几点:(1)缓冲溶液应用的酸碱度环境有差异:硼酸盐缓冲溶液和Tris-HCl缓冲溶液较适合在碱性环境中使用,而磷酸盐缓冲溶液和HEPES缓冲溶液则多数情况下适宜运用在pH值为6.8~8.2左右的弱酸性、弱碱性或接近中性的环境中;(2)缓冲溶液组成有差异:硼酸盐缓冲溶液、Tris-HCl缓冲溶液及磷酸盐缓冲溶液一般是由两种物质配置而成,而HEPES缓冲溶液则是由一种物质配制;(3)缓冲溶液发挥缓冲作用的原理有一定差异:硼酸盐缓冲溶液、Tris-HCl缓冲溶液及磷酸盐缓冲溶液靠体系中缓冲对的电离或水解平衡移动来发挥缓冲作用,而HEPES缓冲溶液则是靠体系中平衡转化关系来发挥缓冲作用;(4)缓冲溶液发挥作用的侧重方面不同:如同是在生物药相关方面的应用,磷酸盐缓冲溶液在固体药物释放研究中应用较多。而硼砂缓冲溶液多用于液体药物如滴眼液中。Tris-HCl缓冲较多用于蛋白质、DNA等生物大分子的溶液体系中。而HEPES更侧重应用于脂质体、细胞水平的相关生化实验研究中;
缓冲液的选择为了保证缓冲液有足够强的缓冲能力,在配制缓冲溶液时,需要做到:为使共轭酸碱对的浓度比接近于1,应根据所需要维持的pH范围选择合适的缓冲对,使其中的弱酸的pKa等于或接近于所要求的pH。例如,生物培养液中需用PH=7.0的缓冲溶液,已知H2PO4-的pKa2=7.21,因此,H2PO4—HPO42-是可以选择的合适的缓冲对。如若配制PH=9.0的缓冲溶液,则可选择NH3·H2O-NH4Cl缓冲对(pKa(NH4+)=9.25)。可见弱酸的Ka是选择缓冲溶液的主要依据,表中列出了几种常用的缓冲溶液。注射用TRIS-HCl应用。
HEPES缓冲溶液具有对细胞无毒性、不易穿过生物膜、不参与细胞内生化过程等特点,所以在生化实验中具有***的应用,如可用于开放式细胞生长、细胞的长期观察、RNA或DNA提取试剂盒中。其次,相关研究表明以HEPES溶液做缓冲液有利于多肽在金纳米粒子表面的偶联反应。另外,HEPES缓冲溶液对镁生物降解影响的相关实验表明,HEPES能提高镁的生物降解性以及抑制镁不溶盐层的形成。具体应用方面,如盐酸伊立替康脂质体注射液(Onivyde)。2022年4月15日,施维雅公司(SERVIER)宣布,其胰腺****药物易安达(通用名:盐酸伊立替康脂质体注射液)获得中国国家药品监督管理局(NMPA)正式批准,与5-氟尿嘧啶(5-FU)和亚叶酸(LV)联合用于***接受吉西他滨***后进展的转移性胰腺*患者。伊立替康脂质体注射液作为一款转移性胰腺****药物,早前已在全球多个国家和地区获批。更多信息详见《易安达(盐酸伊立替康脂质体注射液)正式获批!制剂***,发展历程及市场前景深度分析》注射用TRIS-HCl采购。浙江药用TRIS
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①Moderna**核酸疫苗(mRNA-1273,pH7.0-8.0)将SM-102、DSPC、胆固醇以及PEG脂质与溶于pH5.0乙酸盐缓冲液中的mRNA以2.5:1(脂质:mRNA)的比例混合,再将混合物用Tris-HCl(pH=7.5)中和,加入蔗糖作为冷冻保护剂,***将制备得到的溶液进行无菌过滤,-70℃下冷冻保存准备进一步使用。***:②恩利(注射用依那西普,Enbrel)Enbrel是全球***个全人源的肿瘤坏死因子拮抗剂,是全球****的药物之一。辅料:甘露醇,蔗糖,氨丁三醇(Tris)2、HEPES缓冲液的应用HEPES缓冲液对细胞无毒性作用,它是一种氢离子缓冲剂,能较长时间控制恒定的pH范围。使用时浓度为10-50mmol/L,一般培养液内含20mmol/LHEPES即可达到缓冲能力。在体外诊断、DNA/RNA提取、脂质体药物等方面均有应用。①Onivyde®-伊立替康脂质体是一种拓扑异构酶抑制剂,与氟尿嘧啶和甲酰四氢叶酸组合,用于***基于吉西他滨***后疾病进展的胰腺转移性腺*患者,为晚期大肠*的**用药,也可用于术后的辅助化疗;对肺*、乳腺*、胰腺*等也有一定疗效。***:Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液都是生物制剂中常用的缓冲液,如何选择需要结合制剂本身的特性和***优化的需求综合考量。吉林TRIS医院采购