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湖北超微量超微量分光光度计紫外检测

来源: 发布时间:2023年10月07日

Micro Drop蛋白质检测功能:
Protein Bradford检测方式:
Bradford是常用的蛋白定量检测的方法。它通常用于浓度比较低的蛋白的浓度检测。与其他比色法一样,Bradford法检测蛋白浓度时必须构建一个标准曲线。
Bradford法是根据蛋白质在酸性溶液中,能够使考马斯亮蓝结合,使得染料的比较大吸收峰值变更为595nm来检测蛋白浓度。检测蛋白-染料复合物在595nm处的吸光值,并在750nm处做基线校正,计算得出蛋白的浓度。
常规检测使用试剂/蛋白样品的体积比为50:1,检测浓度范围为0.10mg/ml到8.0mg/ml(BSA),比较好线性浓度范围在0.01-1mg/ml。当使用基座检测时,推荐使用4μl样品和200μl Bradford试剂。
微量检测使用试剂/样品的体积比为1:1,可以检测蛋白浓度范围从15ug/ml至125ug/ml。要准备足够的样品来做基座检测,建议使用10μl样品和10μlBCA试剂(使用PCR管)。 
按照试剂盒生产厂家的说明来准备标准品和和构建标准曲线。确保在所有检测过程中,每个样品的处理时间及环境温度一致。
使用Micro Drop可以很方便的检测核酸的浓度和质量。湖北超微量超微量分光光度计紫外检测

宝予德超微量分光光度计使用时注意小贴士:
(1)测量前将样品中度混匀(可采用震荡器或用手指弹震管底)
(2)移液器吸头插入液面下吸取样品,可避免吸入气泡;TIP头贴着下光纤表面打出样品,且只按到移液器***挡尽头,第二挡不要按,可以避免吹出气泡到样品中。
(3)每次测量完毕后,用蒸馏水清洁上下光纤端面,这样可以更好地保证下一次测量的准确性(主要针对超高浓度样品,一般样品无此要求)。
(4)每次做空白检测前一定要先用水清洁上下光纤表面,可保证空白检测准确。
(5)每次测量的核酸样品量建议为1-2微升,蛋白样品建议2微升。 过少可能无法形成水柱,过多可能溢出。
(6)加样后尽快测量,以防蒸发浓缩以及灰尘落入,已加样品不能多次检测,如需重测需重新滴加同一样品。
(7)仪器避免阳光直射,避免强风吹拂,以避免蒸发。
(8)连续测量一段时间后擦净样品,用水清洁上下光纤表面,然后用水或缓冲液进行重新空白后再检测。
(9)清洁光纤端面(上样基座)时必须用洁净质软的实验室用纸(擦镜纸等)进行轻轻擦拭。
山东超微量超微量分光光度计价格优惠使用分光棱镜或者光栅产生光谱,并利用其中特定的某个或某段光谱线强度来进行分析的仪器叫做分光光度计。

超微量分光光度计检测蛋白A280:
蛋白和核酸不一样,具有很强的多样性。Protein A280功能应用于检测那些含有Trp、Tyr残基或者含有Cys-Cys二硫键的纯蛋白,这些蛋白在280nm吸光度明显。Protein A280功能不需要构建标准曲线,而是检测吸光度后,直接计算蛋白浓度。
Protein A280显示紫外吸收光谱,检测280nm处的吸光度后计算浓度(mg/ml)。和核酸检测一样,Protein A280记录显示的是10mm光程下的数据。
上海宝予德科学仪器有限公司欢迎大家来电咨询!

Micro Drop超微量分光光度计产品应用:
1.紫外检测:常规紫外光波长下检测样品吸光值;
2.核酸检测:可检测dsDNA、ssDNA、RNA等不同类型核酸的浓度及其在260nm、280nm处的吸光值;
3.探针检测:检测荧光标记探针的吸光值,可用于去除未能标记探针的样品;
4.蛋白检测:检测普通纯化后蛋白的浓度和280nm处的吸光值,BCA、 Bradford、Lowry、Pierce 660nm 蛋白定量分析;
5.菌液/悬浮细胞浓度检测:可检测菌液OD600值及监测悬浮细胞生长情况;
6.动力学检测:用于酶活力和生长曲线等动力学实验的测定;
7.全波长扫描:185-910nm全波长扫描,显示吸收曲线。
A230是碳水化合物较高吸收峰的吸收波长。

朗伯一比尔(Lambert - Beer)定律是分光光度法定量分析依据的基本原理。当一束单色光(指路由一种颜色的光)通过一均匀的溶液时,一部分被吸收,一部分透过。
朗伯比尔定律:A = abc
其意义为:当一束单色光通过一均匀溶液时,溶液对单色光的吸光度与溶液浓度和液层厚度的乘积成正比。
A =abc 中,吸光系数a,表征吸光物质的 灵敏度。a值越大,灵敏度越高。如果浓度的单位为物质的量浓度(单位为:mol/L),则吸光系数a可以写成ε ,ε称为摩尔吸光系数。
由上式可知,当溶液层厚度b和吸光系数a固定时,吸光度A与溶液的浓度成线性关系。在定量分析时,首先需要测定溶液对不同波长光的吸收情况(吸收光谱),从中确定比较大吸收波长 ,然后以此波长 的光为光源(单色光),进行吸光度A的测定,这是朗伯比尔定律用于定量分析的首要条件。
每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸,事先要选择对应消光因子。江西高重复性超微量分光光度计探针检测

分光光度法是在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性或定量分析。湖北超微量超微量分光光度计紫外检测

超微量分光光度计不仅涵盖了可见光分光光度计的功能而且也可以进行紫外分光光度计的应用:(二)UV-VIS常规可见-紫外检测:全波长超微量分光光度计可以像普通的紫外-可见分光光度计一样行使功能。如BIO-DL MicroDrop可以显示从185到910nm的光波下样品的吸光值。**多可以同时指定检测40个波长下的吸光值并把数据显示在报告中。(三)蛋白质的直接定量(UV法):这种方法是在280nm波长,直接测试蛋白。蛋白质测定过程非常简单,先测试空白液,然后直接测试蛋白质。蛋白质直接定量方法,适合测试较纯净、成分相对单一的蛋白质。紫外直接定量法相对于比色法来说,速度快,操作简单;但是容易受到平行物质的干扰,如DNA的干扰;另外敏感度低,要求蛋白的浓度较高。湖北超微量超微量分光光度计紫外检测

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