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浙江离体牙存储技术先进

来源: 发布时间:2023年11月06日

    简单可靠的活细胞冷冻保存方法是非常重要的。传统的冷冻方法一般含有血清及10%二甲基亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)。但血清存在安全隐患,且DMSO具有细胞毒性,在干细胞冻存中应尽量减少使用浓度或不使用。Lee等推荐应用磁冷冻法储存hDPSCs,通过实验对比不同的冻存液和冻存条件的效果,发现在无血清培养基中加入**低浓度的DMSO同时处于磁场下进行冷冻时,解冻细胞的贴壁能力、增殖能力和干细胞标志物的表达均得到较好的保存,且具有与新鲜未冻存hDPSCs相同的分化潜能。Mochizuki等使用无DMSO低温保存的无血清培养hDPSCs进行体内外实验,结果表明解冻后的细胞表现出与正常细胞相似的干细胞特性和增殖行为。目前,此类研究结果仍然较少,不过仍然提示无血清培养基可应用于hDPSCs的**温保存,具有重要的临床应用价值。来源:付恒怡,汪成林.人牙髓干细胞无血清培养方法的研究进展[J].国际口腔医学杂志,2022,49。离体牙存储的作用是什么?浙江离体牙存储技术先进

    与多种**的发***展、转移、***和预后密切相关,是某些内皮、平滑肌细胞和血管周围间充质干细胞(mesenchymalstemcell,MSC)的标记物。低血清或无血清培养基扩增的hDSPCs的研究发现,表面CD146表达明显减少。同时,更换使用含有大量血清的培养基可以恢复65%以上的CD146阳性细胞,但不能完全恢复CD146的表达。类似的研究也证实在无血清培养基中培养的小鼠DPSCs存在CD146表达。CD105是一种跨膜糖蛋白,通常被认为是MSC**重要的标记物之一。与常规血清培养相比,研究显示,无血清条件早期培养(2~3代)hDPSCs时CD105的表达减少,而在长时间传代后(6~7代,10~11代)显示出更明显的下调。另有学者进行细胞鉴定时发现,无血清培养基扩增的hDPSCs呈现CD105阳性,但随着传代次数的增加(即使是*3代之后),CD105阳性的hDPSCs的百分率明显降低,而血清培养的细胞则多呈阳性。有趣的是,将无血清培养的hDPSCs换至添加血清的培养基中,可恢复CD105的表达。尽管在无血清培养基中扩增的hDPSCs的CD105表达水平降低,但仍可保持功能性的MSC表型。并且,考虑到人血清是模拟细胞用于移植时体内条件的金标准,CD105的表达很可能在体内移植时暴露在血清中后得以恢复。与此相反。浙江离体牙存储技术先进为什么选择离体牙存储?

    提示:原代培养使用无血清培养基会对细胞生长产生或多或少的不利影响。AbdelMoniem等在干细胞培养过程中只有在传代培养细胞胰蛋白酶失活时使用了**低浓度的FBS,他们建议在之后的研究中尝试采用机械分离或用危害小的蛋白酶(如重组胰蛋白酶)取代胰蛋白酶,以确保细胞不会受到任何血清来源的影响。**近有研究便采用了后者的方法,运用消化酶AccutaseTM建立了一种从分离到培养和分化诱导全过程的无血清培养方法,发现培养的hDPSCs可以和在常规培养条件下一样增殖,提示全程无血清条件培养方法具有一定的可行性。有一些有关基础培养基中添加因子组成和配比的研究,如Hirata等尝试对比4种添加不同因子的无血清培养基,结果发现含1%胰岛素转铁蛋白硒(insulintransferrinselenium,ITS)-Ⅹ和100mg·mL-1胚胎营养因子(embryotrophicfactor,ETF)**适合hDPSCs的培养,具有较高的存活率和增殖率,且干细胞标志物中表达**强。Machado等在有血清和无血清的条件下,在培养基中分别添加不同浓度的葡萄糖和谷氨酰胺,发现在去谷氨酰胺的无血清低糖培养基中培养的细胞具有较好的形态和活力。有研究表明,在培养hDPSCs时应用较多的有几种双无培养基。

    目前已开发出完全不含血清、无蛋白或蛋白含量极低的培养基,即“双无培养基”,具有以下优势:1)内容物明确,增加了实验的科学性和可靠性;2)成分比例一致,增加了实验的重复性;3)无蛋白成分,有利于纯化和下游加工;4)从根本上消除了血清源性或蛋白源性污染。无血清培养hDPSCs的方法主要可以分为2类:1)血清条件下进行初代培养,后更换至无血清培养基中;2)全程无血清条件培养。普遍认为,在运送组织样本以及在原代培养分离干细胞时,FBS的使用是必需的,尤其是在原代培养或者细胞生长状况不良时,常常会先使用有血清的培养液进行培养,待细胞生长旺盛以后,再换成无血清培养液。同时,也有研究表明,无血清培养的DPSCs对外源性细胞毒性刺激如H2O2和紫外光更敏感,这表明不含FBS的培养液培养的细胞可能易受外源性细胞毒性的影响。因此,在大多数有关无血清培养DPSCs的实验中,研究者们仍然选择第一种方法,即先用含FBS培养基培养一段时间,再更换到无血清培养基中。然而,Mochizuki等认为,在传统的含血清培养基中培养原代细胞即使只有一次也会引起安全问题;因此,他们在整个hDPSCs的培养过程中均未使用血清,结果发现细胞黏附力降低,形态变薄。哪家的离体牙存储性价比高?

植骨材料有哪些?目前骨移植材料主要有自体骨、同种异体骨、异种骨(无机牛骨粉)、可降解珊瑚羟基磷灰石骨粉植入等,然而每一种材料都有其缺点:自体骨无免疫原性,但来源少,并且要以供骨区新损伤为代价;而异体骨材料移植可能带来异体排斥或者传染性疾病的风险;无机牛骨粉促进成骨细胞生长和新骨生成效率较差;羟基磷灰石骨粉由于其极低的表面积而表现出极低的生物降解率。植牙牙补骨,骨粉还是自体的好。废牙变宝物,存牙就找图斯邦柯。使用离体牙存储需要什么条件?浙江离体牙存储技术先进

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    植牙误区:很多人还不知道种植牙到底“种”在哪,怎么“种”。门诊中发现,不少牙病病人都对种植牙有认识上的误区。误区一只要能通过***而保住的真牙就应该坚持***,而不是动不动就拔掉,万不得已才考虑拔牙。误区二“桩冠牙”,属牙齿修复的范畴,而种植牙是属于牙齿种植范畴。“桩冠牙”是在原有的牙根上打桩,再套上烤瓷牙,因此做“桩冠牙”的前提是牙根状况好。当牙根状况不好须拔除后,就需要“种”牙,因此种植牙是在没有牙根的基础上进行的,需要做人工牙根。误区三虽然人在掉牙后,会有部分牙槽骨被吸收,但仍有剩余的牙槽骨或颌骨可以“打钛钉”,种植牙就在这些剩余的牙槽骨或颌骨上“打钛钉”作为人工牙根。此外,纯钛与骨头组织有很好的生物相容性,骨细胞会与钛结合,在钛钉表面生长,牢固地结合在一起。误区四种植牙的使用年限,如今观察至少能达10年以上,这还与每个人的使用习惯和保护方法有关。一般来说,植入后的纯钛人工牙根一般很稳固不需更换,但如果种植牙的牙冠保护不好则可能需要更换。例如,有的人“种”牙后用种植牙啃骨头,可能会使种植牙的牙冠崩裂或损坏,这时就需要更换崩损的牙冠。误区五“种”牙,就必须“种”满每个脱牙的地方。 浙江离体牙存储技术先进