准备DNA-PEI复合物:DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用2-5μL线性PEI转染试剂。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管,一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中(注意:请勿颠倒添加顺序)。充分混匀后,室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时,请用圆底聚丙烯管,例如Falcon5mL/14mL离心管。转染细胞:直接向每个孔中加入DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时,去除生长培养基,替换成无血清培养基,然后滴DNA-PEI复合物。转染3h后,添加?体积的包含30%血清的生长培养基。更多关于Polysciences PEI相关内容欢迎咨询上海曼博生物!如想申请PEI试用装,请关注我们的公众号:Mine-bio,回复关键词“PEI申请”,即可参加!美国Polysciences PEI转染试剂怎么样?贴壁细胞PEI转染试剂试用装试用
稳定转染方法:1.接种细胞:转染前一晚,用胶原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化细胞并计数(不建议用胰酶)。调整细胞浓度,将细胞铺入细胞培养的器皿,每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。2.准备DNA-PEI复合物:DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用1.5-5μL线性PEI转染试剂(这个需要客户自行摸索配比,每一批转染试剂和每一批DNA比例可能会稍有不同)。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管,一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中(注意:请勿颠倒添加顺序)。充分混匀后,室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时,请用圆底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL离心管。更多关于Polysciences PEI相关内容欢迎咨询上海曼博生物!如想申请PEI试用装,请关注我们的公众号:Mine-bio,回复关键词“PEI申请”,即可参加!GMPPEI转染试剂试用装历史悠久用PEI转染试剂时,一般和DNA的比例是多少?
产品简介:Polysciences转染试剂系列是基于聚乙烯亚胺(Polyethylenimine,PEI)的产品,因其较高的转染效果,已广泛应用于工业化生产。聚乙烯亚胺是一种具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子,每相隔二个碳原子,即每“第三个原子都是质子化的氨基氮原子,使得聚合物网络在任何pH下都能充当有效的“质子海绵”体(protonsponge)。PEI可用作转染试剂,它可以缩聚DNA分子形成颗粒并转染真核细胞。有实验证明,分子量为25000的线性PEI即Polysciences23966(PEI25K)转染效率表现优良。产品特点:适用于生产mABs、rAbs、bsABs和病毒载体(AVV、LV、BEV);在HEK293、CHO和Sf9细胞系中高度有效;适用于从研发到工业化生产的各个阶段;可预测,可大规模生产;两周内即可生成大量目标蛋白或病毒;高转染效率;大量已发表的文献支持。如想申请PEI试用装,请关注我们的公众号:Mine-bio,回复关键词“PEI申请”,即可参加!
上海曼博生物医药科技有限公司成立于2019年,依托于集团公司泉心泉意深厚的资源和超过400家国内客户群体,生命科学领域一站式供应链体系,以及高风险生物危险材料进出口平台的优势,曼博生物严格筛选国际创新且经过同行验证过的产品和技术,引入中国市场,开发、孵育和推广,致力于将全球创新产品和前沿技术带入中国,集中在为细胞/基因领域、/免疫,抗体药物研发客户提供小众创新产品,包括从Researchgrade到cGMP等级的无动物源培养基质,转染试剂、病毒转导试剂、基因编辑工具等产品和定制服务,支持ATMP(AdvanceTherapyMedicinalProducts)药物研发从R&D到Clinicaltrial以及后期商业化的无缝转化。更多关于Polysciences PEI相关产品问题,欢迎咨询上海曼博生物!也欢迎关注我们的公众号:Mine-Bio。如想申请PEI试用装,请关注我们的公众号:Mine-bio,回复关键词“PEI申请”,即可参加!中国地区代理Polysciences PEI转染试剂的是谁?
PolysciencesPEI转染试剂优势:高质量的R&D和cGMP等级产品l高转染效率,低细胞毒性;MAXgene符合cGMP标准和ISO13485质量管理体系;经过验证的生产工艺;全合成,无动物源成分;高性价比,适用于从早期研发到临床及商业化生产的各个阶段l严格控制批间稳定性;国内外已有多个项目进入临床阶段l具备残留检测方法。PEI MAX 是一款高度浓缩的粉剂,大量科学家选择PEI MAX ,在内部自行制备低成本高效益的PEI转染试剂。多年以来,经过众多业内人士评审的公开研究和出版文献表明,在HEK293、CHO 和 Sf9系统中可获得很高的转染效率,在重组抗体和病毒载体生产中稳定性高,可靠性强。PEI MAX是一种非GMP等级PEI转染试剂,适用于基础科学研究及药物研发早期阶段。如想申请PEI试用装,请关注我们的公众号:Mine-bio,回复关键词“PEI申请”,即可参加!如何优化PEI转染试剂转染时的比例?贴壁细胞PEI转染试剂试用装试用
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对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板可显著提高转入基因的表达水平。如果选择转染前两天铺板,可适当降低铺板密度,以确保转染时细胞的汇合度仍为70~80%。2.对于接触抑制敏感的细胞,可适当降低铺板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情况下,DNA-PEI复合物仍能转染细胞,但是DNA-PEI复合物必须在无蛋白存在的条件下形成。我们推荐使用Opti-MEMITM培养基以达到*转染效率。其他的无蛋白培养基则需测试与线性PEI转染试剂的兼容性。更多关于PEI转染试剂相关产品技术问题,欢迎咨询上海曼博生物!也欢迎关注我们的公众号:Mine-Bio。如想申请PEI试用装,请关注我们的公众号:Mine-bio,回复关键词“PEI申请”,即可参加!贴壁细胞PEI转染试剂试用装试用