1.对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板可显著提高转入基因的表达水平。如果选择转染前两天铺板,可适当降低铺板密度,以确保转染时细胞的汇合度仍为70~80%。2.对于接触抑制敏感的细胞,可适当降低铺板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情况下,DNA-PEI复合物仍能转染细胞,但是DNA-PEI复合物必须在无蛋白存在的条件下形成。我们推荐使用Opti-MEMITM培养基以达到*转染效率。其他的无蛋白培养基则需测试与线性PEI转染试剂的兼容性。4.对大多数细胞来而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM试剂都能获得较高转染效率。使用者也可尝试每1μgDNA使用1~4μL体积线性PEI转染试剂进行优化。如想申请PEI试用装,请关注我们的公众号:Mine-bio,回复关键词“PEI申请”,即可参加!线性的和分支的PEI转染试剂哪个好?全球PEI转染试剂试用装
抗体药物研发客户提供小众创新产品,包括从Researchgrade到cGMP等级的无动物源培养基质,转染试剂、病毒转导试剂、基因编辑工具等产品和定制服务,支持ATMP(AdvanceTherapyMedicinalProducts)药物研发从R&D到Clinicaltrial以及后期商业化的无缝转化;以及提供药物开发和探索的抗体文库定制和商业授权灵活的CHO工程细胞株以支持抗体药物的商业化生产,以此希望帮助国内科研工作者快速地接触世界范围内的技术,分享研发工具进步带来的技术红利,终为细胞、基因产业以及再生医学行业等乃至整个生命科学行业赋能!更多关于PEI转染试剂相关产品技术问题,欢迎咨询上海曼博生物。如想申请PEI试用装,请关注我们的公众号:Mine-bio,回复关键词“PEI申请”,即可参加!天津PEI转染试剂试用装可用于临床申报用PEI转染试剂时出现沉淀是什么原因?
瞬时转染方法1.接种细胞:转染前,用胶原酶消化细胞并计数(不建议用胰酶)。调整细胞浓度,将细胞铺入细胞培养的器皿,总体积如表1所示,每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。2.准备DNA-PEI复合物:DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用2-5μL线性PEI转染试剂。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管,一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中(注意:请勿颠倒添加顺序)。充分混匀后,室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时,请用圆底聚丙烯管,例如Falcon5mL/14mL离心管。3.转染细胞:直接向每个孔中加入DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时,去除生长培养基,替换成无血清培养基,然后滴DNA-PEI复合物。转染3h后,添加?体积的包含30%血清的生长培养基。4.孵育细胞和分析结果:在CO2培养箱中37℃下孵育细胞至可以分析检测。转染后快7h即可检测到转入基因的表达。请自行确定检测时间。更多关于Polysciences PEI相关内容欢迎咨询上海曼博生物!
产品简介:Polysciences转染试剂系列是基于聚乙烯亚胺(Polyethylenimine,PEI)的产品,因其较高的转染效果,已广泛应用于工业化生产。聚乙烯亚胺是一种具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子,每相隔二个碳原子,即每“第三个原子都是质子化的氨基氮原子,使得聚合物网络在任何pH下都能充当有效的“质子海绵”体(protonsponge)。PEI可用作转染试剂,它可以缩聚DNA分子形成颗粒并转染真核细胞。有实验证明,分子量为25000的线性PEI即Polysciences23966(PEI25K)转染效率表现优良。产品特点:适用于生产mABs、rAbs、bsABs和病毒载体(AVV、LV、BEV);在HEK293、CHO和Sf9细胞系中高度有效;适用于从研发到工业化生产的各个阶段;可预测,可大规模生产;两周内即可生成大量目标蛋白或病毒;高转染效率;大量已发表的文献支持。如想申请PEI试用装,请关注我们的公众号:Mine-bio,回复关键词“PEI申请”,即可参加!如何辨别假的PEI转染试剂。
接种细胞:转染前,用胶原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化细胞并计数(不建议用胰酶)。调整细胞浓度,将细胞铺入细胞培养的器皿,每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。2.准备DNA-PEI复合物:DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用1.5-5μL线性PEI转染试剂(这个需要客户自行摸索配比,每一批转染试剂和每一批DNA比例可能会稍有不同)。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管,一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中(注意:请勿颠倒添加顺序)。充分混匀后,室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时,请用圆底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL离心管。3.转染细胞:直接向每个孔中加入DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时,去除生长培养基,替换成无血清培养基,然后滴DNA-PEI复合物。转染1.5h后,添加½体积的包含30%血清的生长培养基。更多关于Polysciences PEI转染试剂,欢迎咨询曼博生物!想申请PEI试用装,请关注我们的公众号:Mine-bio,回复关键词“PEI申请”,即可参加!有人知道PEI转染试剂的价格么?贴壁细胞PEI转染试剂试用装可进行批次验证
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准备DNA-PEI复合物:DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用2-5μL线性PEI转染试剂。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管,一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中(注意:请勿颠倒添加顺序)。充分混匀后,室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时,请用圆底聚丙烯管,例如Falcon5mL/14mL离心管。转染细胞:直接向每个孔中加入DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时,去除生长培养基,替换成无血清培养基,然后滴DNA-PEI复合物。转染3h后,添加?体积的包含30%血清的生长培养基。更多关于Polysciences PEI相关内容欢迎咨询上海曼博生物!如想申请PEI试用装,请关注我们的公众号:Mine-bio,回复关键词“PEI申请”,即可参加!全球PEI转染试剂试用装