外泌体 超声法

结果表明，PS亲和法可以检测到许多目前为止都无法检测的外泌体蛋白质和RNA。应用Tim4的外泌体强结合能力，可用ELISA或FACS高灵敏度定性检测、定量分析外泌体。以前无法用超速离心法提取的微囊泡，也通过运用PS亲和法实现高纯度提取。本指导书中对该技术进行详细说明，这项技术的有用性今后将受到世界各方评价，有望在外泌体和微囊泡生理功能的分析研究上起重大贡献。外泌体的检测和提取还遇到一个困难即：对各种外泌体的分类。研究人员尚未统一定义以何种方法提取的细胞外囊泡可以称之为外泌体，给实验数据的分析和重复性确认带来困难。近年，随着国际细胞外囊泡协会的成立、世界性研究者研讨会的举办，提案MISEV指南作为国际标准，计划或已经开始进行EV研究的科学家请务必阅读这些方针。外泌体的复杂性，为疾病检测和监测提供了一个多指标的诊断窗口。外泌体 超声法

瘤转移是病症致死的首要原因。长久以来，对瘤转移机理的研究一直聚焦于瘤与机体之间的相互作用。然而在近年来，由于外泌体被发现可以作为包括瘤在内细胞之间信息传递的一种新方式，瘤转移研究领域再度变得火热起来。我所（瘤转移的预警和预防研究所）以谢晓东博士为首的外泌体研究小组一直致力于研究瘤转移与外泌体之间的联系，已取得一系列成果。外泌体是指包含了复杂RNA和蛋白质的小膜泡(30-150nm)，现今，其特指直径在40-100nm的盘状囊泡。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。外泌体的生物学功能外泌体在化疗药物的促转移过程中具有重要的作用。

外泌体（Exosome）介导瘤细胞的增殖过程。瘤细胞通过与自身微环境的信息交流促进瘤细胞的增殖，而外泌体（Exosome）可以充当这种信息载体。当细胞中出现基因突变时，外泌体（Exosome）会通过膜融合把这种突变信息传递至其他的正常细胞，从而导致原病基因的唤醒、抗凋亡基因的表达，使瘤细胞获得增殖特性。瘤细胞来源的外泌体（Exosome）还可以通过直接抑制免疫细胞，促进瘤细胞逃避免疫监视，为瘤细胞在体内生长创造条件。然而，虽然当前外泌体生物学仍然不成熟，但越来越多的兴趣和资金投入必将加速外泌体基础研究进展和临床转化。

Aqil等在进行裸鼠实验时发现，加载至外泌体中的雷公藤红素（Exo-CEL）比普通的CEL有更强的抗种瘤功效，且在小鼠中未发现明显全身性或系统性毒性，由此可以证明，外泌体制剂可以有效增强CEL功效并降低与剂量有关的毒性。到目前为止，外泌体在肺病医治方面的研究主要集中于免疫压制，有效的外泌体药物递送平台的搭建以及外泌体相关的潜在医治靶点的探索。已有的研究表明外泌体在肺病医治领域有着广阔的前景，期待外泌体在肺病医治领域早日得到突破，造福更多的患者。随着外泌体的功能逐渐被发现，近年来，应用这些功能的医治法也在被开发出来。

外泌体是细胞在特定条件下分泌的小囊泡，是细胞间传递信号，相互沟通和影响的重要工具，它可以直接进入受体细胞影响细胞功能。外泌体PK细胞因子：磷脂双层膜结构，可保护内容物，包含多种细胞因子可直接进入受体细胞。外泌体PK干细胞：无免疫排斥，体积小穿透力强，可避免伦理道德争议。年轻的脂肪组织中提取外泌体，在特定条件下扩大培养出具有调控毛发根部的囊干细胞功能的外泌体，包含多种细胞因子的外泌体直接进入毛发根部的囊细胞，恢复毛发根部的囊干细胞的正常功能。干细胞外泌体可以有效活化提高细胞能量加速细胞排毒、淡化色斑。外泌体的生物学功能

外泌体的形成始于细胞内陷，成熟于多囊泡胞内体，终于膜融合。外泌体 超声法

Vlassov等人发表的一篇外泌体的提取方法及组成的专利文献中介绍，通过终浓度为8%的PEG6000与生物体液共孵育14h后，10000xg离心1h，可将直径在30-150nm之间，且包含丰富RNA的外泌体沉淀下来。因此采用终浓度为8%的PEG6000沉淀血清中的外泌体，为了进一步纯化胎盘相关外泌体，将获得的包含外泌体的沉淀用PBS重新悬浮后，加入非线性蔗糖密度梯度层，10000xg超速离心5h，将分层液采用PEG6000进行2次沉淀。经过多次实验反复验证，确定同时表达外泌体标志蛋白分子及胎盘特异性蛋白分子的胎盘来源外泌体所在密度层。外泌体 超声法