本发明涉及生物医药领域,涉及一种常温下长时间口腔拭子DNA保存和提取方法。背景技术:近年来,采用口腔拭子进行DNA检验有逐渐增多的趋势,由于国内没有专门用于采集口腔脱落细胞的工具,而只是使用普通的医用棉签,而不同的人采集口腔脱落细胞在擦拭次数、力度、检材剪取量及扩增用的模板量上都存在一定差异,导致了口腔拭子的DNA常温下保存效果不大稳定,影响了口腔拭子在DNA常温下保存中的应用。
为规范口腔拭子DNA的采集,提高口腔拭子的DNA保存效率,亟需一种常温下长时间口腔拭子DNA保存和提取方法。
口腔拭子的优点是将产品进行环氧乙烷灭菌。河南样本口腔拭子检测
同样唾液和口腔拭子中核酸提取方法与血液的提取方法相似包括以下4个过程:1.通过裂解液裂解口腔脱落细胞,释放核酸物质。2.通过离心柱或纳米磁珠特异性吸附核酸物质,去除其他杂质。3.通过漂洗液洗掉挂在离心柱或纳米磁珠表面的化学试剂残留和蛋白残留。4.加入洗脱液将核酸从离心柱或纳米磁珠上洗脱下来。传统的提取方法由于核酸提取纯化过程耗时长,成本较高,步骤繁多,增加了基因污染的风险。因此需要一种血液、唾液和口腔拭子样本经过简单处理就可以作为模板进行荧光PCR扩增检测方法,满足科研和医学领域快速检测的要求。技术实现要素:本发明提供了一种快速提取血液和口腔拭子基因组DNA的方法。该发明通过快速简单处理口腔拭子和血液样本,且无需纯化可直接用于荧光PCR扩增的DNA。10分钟内即可得到应用于ARMS-PCR反应体系的模板DNA。同时优化ARMS-PCR荧光体系,在反应液中加入防污染UDG酶以及提高Taq酶稳定性的的BSA,从而实现血液和口腔拭子基因组快速荧光PCR扩增检测。该方法快速简单,成本低廉,检测灵敏,且用该方法提取的基因组与商品化试剂盒提取的基因组的检测结果相近。河南样本口腔拭子检测口腔拭子适用于采集任何年龄段人群的DNA样本。
DNA口腔采样棉签/采样咽拭子棉花头棉签产品:100%质量棉花制成,质感柔滑,经高温处理,清洁卫生,棉花与棉棒紧密结合,棉头不起毛,使用起来更安心,放心且携带方便,放在包包完全不占空间随时随地都可以使用无论何时都以让人保持清爽,舒适的感觉且袋装产品,质美价低,经济超值.一次性采样植绒拭子产品:已通过国家质量监督医疗器械检测中心进行全项目检测,并出具检ZC1011965/96/97合格报告。采样拭子分为咽拭子、口腔拭子、H7N9禽流感***采集拭子,微生物擦拭取样拭子,DNA拭子、宫颈拭子,能供各种实验室检测中心和医院使用。采样植绒拭子比传统缠绕拭子采集样本和释放样本的量高3倍,而且对细胞样本不造成损害,好好的保证细胞样本的存活率,不残留脂肪酸,对试验检测效果不造成影响,更不会对人体造成伤害。CY-96000型鼻腔采样拭子供医疗机构采集患者鼻腔内***的***及DNA样本;CY-93050型口腔采样拭子供医疗机构采集患者口腔内及咽喉***的***及DNA样本;CY-95000型宫颈采样拭子供医疗机构采集妇女阴道内及宫颈***的***样本,适用妇女患者,用来采集子宫颈上皮脱落细胞,用于人**瘤***(HPV)核酸。
加入20μteinaseK溶液,混匀。加入200μL缓冲液GB,充分颠倒混匀,在56℃放置14min(期间颠倒混合样品数次),溶液应变清亮,若未完全变清亮,延长裂解时间至完全变清亮。加人200μL无水乙醇,充分振荡混匀10s,此时可能会出现絮状沉淀。将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中(吸附柱放入收集管中),12,000rpm离心30s,倒掉废液,将吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入500μLGD(已加入无水乙醇),12,000rpm离心30s,弃废液,将吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入600μLPW(已加入无水乙醇),12,000rpm离心30s,弃废液,将吸附柱CB3放回收集管中。12,000rpm(~13,400×g)离心2min。将吸附柱放置新的,以彻底晾干吸附柱中残余的漂洗液。向吸附柱中悬空滴加50~200μL洗脱缓冲液,室温放置2~5分钟,12,000rpm(~13,400×g)离心2min,将溶液收集到离心管中,测定浓度及纯度后,取3μL,加入到配制好的荧光PCR反应液,于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。用本发明和对照产品对8份样本同时进行荧光PCR扩增。结果如图6,本发明所有反应孔背景信号好、Ct值都在21~25之间,荧光扩增曲线呈典型的S型。口腔细胞采样时要撕开口腔拭子外包装,小心取出口腔拭子(注意:整个取样过程中手不能接触拭子部分)。
深圳市华晨阳科技有限公司暨BIORISEGROUP中国公司,位于深圳高新技术产业开发区,集研发,专业经营销售生命科学仪器设备和试剂耗材。公司秉承欧洲先进、严谨的生命科学技术和理念,结合中国生产和人力资源优势,打造性能价格比高的生命科学仪器设备,已广泛应用于:各级医院、大学及研究所、CDC、检验检疫局、动植物检疫、食品企业及乳品厂等。获得广大用户的一致好评。
主营产品:采样拭子、拭子、鼻拭子、咽拭子、病毒采样管、一次性使用病毒采样管、保存液、细胞保存液等
包装后的拭子应贮存在2℃ ~30℃,相对湿度40%~90%的无腐蚀性气体、通风良好、阴凉干燥、清洁的环境中。湖南可定制口腔拭子厂家直销
口腔拭子外形应该是端正、整洁的、光滑的、色泽要均匀、没有毛刺、没有霉点、伤痕、刮痕、裂缝等缺限的。河南样本口腔拭子检测
中文名称: 口腔拭子DNA样本保存管
英文名称: Swab DNA Storage Tube
产品规格: 200μl×20支
发货周期: 1~3天
产品价格: 询价
本产品采用医疗**的聚氨脂海绵为原材料,具有吸液性强、柔软洁净、发尘量低等优点。采样拭子头可折断,使用方便。采用的物料对微生物无危害,能大量地增加样本的采集、释放量,增强样本送检期间的保存效果。能够常温保存口腔拭子DNA长达12个月,其获得的DNA可用来完成各种基因检测及分析实验,如qPCR、NGS、SNP分析。为运输和存储提供方便,并减低其成本。
使用方法:
1.取样前清洁双手,用清水漱口1-2次,去除口腔中的食物残渣,咽尽口腔中剩余的清水。
2.撕开采样棉签外包装。
3.将棉签伸进口腔内,在内侧颊粘膜处反复擦拭20次以上,至棉头已经被唾液充分浸润(应无食物残渣等异物粘附)。
4.打开样本采集管盖,将采样后的棉签放入样本采集管内,沿手柄上的折痕折断手柄。
5.随即盖上样本采集管,完成样品取样。 河南样本口腔拭子检测
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公司通过中国CFDA,美国FDA,欧盟CE,以及SGS,TUV实地认证,拥有进出口权,本着“质量至上,求实创新,质量服务,合作共赢”产品远销全球,并获得广大客户一致认可。
主营产品:一次性使用病 毒采样管,植绒拭子,口腔拭子,咽拭子,一次性采样拭子,细胞保存液,病 毒保存液,病 毒灭活液,唾液采集器,采样盒,拭子套装.尼龙植绒拭子,聚丙烯拭子