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天津兔原代肝细胞分离

来源: 发布时间:2024年05月09日

原代肝细胞也可以用于Organ-on-a-chip的构建。Organ-on-a-chip是一项创新性的科技成果,它在载玻片大小的芯片上构建了一个完整的生理组织微系统,其中包含有原代肝细胞、肝非实质细胞、生物流体和机械力所需微环境的关键要素。这个微型肝脏模型可以在体外模拟人体肝脏的主要结构功能特征和复杂的组织间联系,为药物药效评价、药物安全性评价、化妆品安全性评价、食品安全性评价、环境保护评价等提供了一种全新的方法和手段。 这个微型肝脏模型的研发,是在对传统的肝脏模型进行改进和创新的基础上实现的。传统的肝脏模型通常是基于动物实验或体外细胞培养的方法,但这些方法存在着很多的局限性和缺陷。例如,动物实验不仅存在着伦理和道德问题,而且还存在着种属差异、生理反应差异等问题;而体外细胞培养则存在着细胞失活、细胞分化等问题。因此,Organ-on-a-chip的出现,填补了这些传统方法的空白,为科学研究和工业应用提供了更加可靠和有效的手段。立沃生物的原代肝细胞可以提供样品细胞冻存服务,以保证客户试验周期内细胞的需求。天津兔原代肝细胞分离

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原代肝细胞的细胞形态有许多独特的形态特征。原代肝细胞是指从新鲜肝脏组织中分离出来的一种细胞类型,呈多边形或多角形形状,大小约为20-30微米。原代肝细胞具有明显的细胞核和细胞质,核小而高亮,细胞核呈圆形或椭圆形,也有双核情况存在。原代肝细胞的细胞质内含有丰富的细胞器和细胞骨架,浓稠且颜色较深。此外,原代肝细胞表面具有许多微绒毛和微细突起,这些结构有助于细胞之间的黏附和交流。同时,原代肝细胞具有高度的代谢活性和生物合成能力,能够合成和分泌多种生物活性物质,如蛋白质、hormone、细胞因子等。这些独特的形态特征使得原代肝细胞成为研究肝脏生理和病理过程的重要模型细胞。广东树鼩原代肝细胞贴壁原代肝细胞是从新鲜的肝脏组织中分离出来的细胞。

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    原代肝细胞的分离方法有很多种,以下是其中四种常见的方法:1.胶原酶消化法:胶原酶是一种使用广的细胞分离酶,可以消化肝细胞外基质中的胶原蛋白,从而使肝细胞分离出来。该方法通常使用胶原酶消化肝脏组织,然后通过离心和过滤等步骤分离肝细胞。2.机械分离法:机械分离法是一种通过物理方法分离肝细胞的方法。该方法通常使用搅拌器、滤网或离心等设备将肝脏组织中的肝细胞分离出来。3.酶消化结合机械分离法:这种方法是将胶原酶消化和机械分离相结合的方法。该方法通常先使用胶原酶消化肝脏组织,然后通过机械分离的方法将肝细胞分离出来。4.密度梯度离心法:密度梯度离心法是一种通过离心的方法分离肝细胞的方法。该方法通常使用密度梯度介质(如Percoll或Ficoll)将肝细胞分离出来。以上是几种常见的原代肝细胞分离方法,不同的方法适用于不同的实验需求和研究目的。在选择分离方法时,需要考虑肝脏组织的来源、肝细胞的数量和质量、实验目的等因素。

原代肝细胞培养中去除endotoxin是十分重要的。原代肝细胞培养是一种常用的实验方法,但在培养过程中,细胞可能会受到endotoxin的污染,这会影响实验结果的准确性。 endotoxin是一种由细菌产生的有毒物质,可以引起炎症反应和细胞损伤。在原代肝细胞培养中,endotoxin可能来自于培养基、细胞培养器具或细胞本身。因此,需要采取一些措施来去除endotoxin。 一种常用的方法是使用endotoxin去除剂,例如聚阳离子树脂(Polyclonal Cationic Resin,PCR)或聚乙烯醇(Polyvinyl Alcohol,PVA)。这些去除剂可以吸附endotoxin,从而减少其对细胞的影响。使用endotoxin去除剂的方法比较简单,只需要将其加入培养基中,然后将细胞培养在其中即可。 可以使用endotoxin检测试剂盒来检测培养基中的endotoxin含量。如果检测结果显示endotoxin含量较高,可以考虑更换培养基或使用endotoxin去除剂。 除了使用去除剂和检测试剂盒外,还可以采取一些预防措施来减少endotoxin的污染。例如,使用无菌技术操作、定期更换培养器具和培养基、避免过度搅拌和振荡等。 去除endotoxin是原代肝细胞培养中必须注意的问题。采取适当的措施可以减少endotoxin的污染,保证实验结果的准确性。立沃生物原代肝细胞提供动物源肝细胞供体数定制服务,满足客户在不同实验用途和不同实验场景下的需求。

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贴壁培养的原代肝细胞是酶诱导研究的重要模型,也是药物代谢实验的重要模型。这种模型可以通过倍数变化方法来评估药物是否为酶的诱导剂。具体来说,研究人员可以使用已知的阳性和阴性对照药物来校准体外系统,然后将研究药物与细胞共孵育,测定孵育后CYP酶的mRNA表达水平倍数变化,以评估药物是否为酶的诱导剂。这种方法可以帮助研究人员更好地了解药物相互作用的机制,从而更好地指导临床用药。酶诱导是一种药物相互作用的现象,指某些化合物能够提高肝脏药物代谢酶的活性,从而导致合用的药物代谢速率加快,使得原药的血药浓度下降,进而使其疗效降低或丧失。这种现象在临床上非常常见,因为许多药物都需要通过肝脏代谢酶来进行代谢,而酶诱导会影响这些代谢酶的活性,从而影响药物的代谢。酶诱导的机制是通过影响肝脏细胞内的CYP酶的表达和活性来实现的。CYP酶是肝脏细胞内重要的药物代谢酶之一,它能够代谢许多药物和毒物,从而使它们被代谢出体外。当某些化合物进入体内后,它们会与CYP酶结合并使它们的特异性表达,从而使得CYP酶能够更快地代谢药物和毒物,使其被代谢出体外。原代肝细胞依旧是目前理想的体外模型,是药物代谢研究的重要组成部分。目前,分离原代肝细胞的方法有直接剪切法、组织块消化法和两步胶原酶灌流法等。江苏鹅原代肝细胞纯化

贴壁原代肝细胞主要用于肝脏再生研究、肝脏3D打印、肝脏疾病研究、HBV、HCV病毒研究等。天津兔原代肝细胞分离

原代肝细胞的体外培养和研究有着很大的应用范围。原代肝细胞(Primaryhepatocytes)是指从动物肝脏取出后立即培养的肝细胞。原代肝细胞作为一种体外模型,具有其它体外模型不可替代的优点:1.与体内环境保持一致,酶量和辅助因子水平都是正常的生理浓度,可以在接近生理状态的的情况下研究药物的代谢和毒性;2.较好保留酶水平和维持了肝细胞的完整形态和肝细胞体外代谢活性,真实反应了体内的代谢情况。3.随着技术水平的不断提高,原代培养的动物和人肝细胞已广泛应用于药物研究:4.探讨药物在肝中的代谢途径和药物药代动力学的研究;5.评价药物和外源性物质对肝脏中细胞色素P450酶诱导作用并探讨其诱导机制;6.预测和解释药物与药物之间的相互作用;7.研究药物的细胞毒性等。因此了解或者掌握原代肝细胞体外培养和研究的相关技术对于提升相关试验的成功率非常有帮助。天津兔原代肝细胞分离