缺血性卒中的病理生理及药物治*缺血性卒中主要诱发神经血管单元(NVU)一系列的缺血级联反应(包括兴奋性氨基酸毒性,氧(氮)化应激和缺血后炎症等),从而造成神经细胞受损甚至部分死亡细胞凋亡,*终诱发大脑功能的异常。NVU是由神经元,神经胶质细胞,血管细胞(内皮细胞、周细胞、平滑肌细胞)以及基底膜共同构成,这些细胞相互作用,共同调节营养物质在细胞间质间的流动和脑血流,维持和修复髓鞘,清*代谢产物,从而实现和维持大脑的正常功能。在缺血发生时,NVU的各部分细胞发生不同程度的损伤,诱发神经元细胞的生理生化异常。部分凋亡细胞会进展为梗死灶,而梗死灶周围受损的神经细胞虽然出现了生理生化异常和功能障碍,但尚未死亡,及时低灌注可能可以改善其损伤状况使之恢复正常。这部分及时抢救仍然可以改善其功能的神经细胞一般被称为“缺血半暗带”。艾菱菲生物提供定制化的模型,根据客户的特定要求进行设计和构建。艾菱菲生物脑梗MCAO模型水迷宫
TTC染色如何测定脑梗MCAO面积-TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体,与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色,而缺血组织内脱氢酶活性下降,不能反应,故不会产生变化呈苍白。将模型动物大鼠安乐死,解剖取材完整的脑组织,在-20℃速冻20min,便于切片。切片切成6片,每隔2mm切一片。将切片至于2%TTC磷酸缓冲液(PH 7.4)溶液中,用锡箔纸盖住培养皿,放入37℃温箱30min,15min后翻动脑切片,使其均匀接触到染液。上海线栓法脑梗MCAO模型课题研究通过观察动物的行为表现,对动物的神经功能缺损程度进行评分,以评估脑梗死后对动物神经功能的影响。
造模方法 颈部备皮常规消毒,取颈正中切口剪开皮肤,分离皮肤下软组织并暴露颈动脉鞘; 游离出颈总动脉1.5cm,穿线备用; 向远心端找到颈外侧动脉,游离涌现结扎,提起颈总备用线,在近心端,远心端用动脉夹夹住; 在近心端动脉夹处,用5mL注射器针头刺破血管,稍微提起动脉夹,用镊子夹住线栓,从小口插入动脉后,去掉远心端动脉夹,然后用镊子夹住线栓,线栓插入到颈内距分叉处1.8-2.0cm; 用备用线将颈总和线栓一起结扎住,*好是结扎双道,记录线栓插入时间,在将动脉夹另一边近心端颈总结扎住,去掉动脉夹; 注意缝合时不要将线栓带出,*后根据评分来判断成模性。 线栓法是国内外*常用的制作脑局部缺血再灌注损伤的方法。Koizumi 于 1986 年首先报道了用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型,此后 Longa等对该方法进行了改良。线栓法脑缺血模型的研究已经取得很多突破和进展,但模型制备的稳定性受很多因素的影响,如小鼠体质量、线栓的选择等。小鼠缺血再灌注损伤后脑梗死体积百分比的变化可以为研究治*脑卒中药物时间窗提供基础依据,对进一步深入研究大鼠缺血再灌注损伤模型有重要的意义。
小鼠缺血性脑梗死模型在神经科学研究中具有重要意义,不仅在研究脑梗死发病机制、药物开发、神经康复等方面发挥着重要作用,同时也为神经精神疾病的防治提供了有力支持。 研究脑梗死发病机制,小鼠缺血性脑梗死模型是研究脑梗死发病机制的重要工具。通过模拟人类缺血性脑梗死的发病过程,可以深入了解脑梗死的病理生理机制,为治*提供理论支持。在模型中,可以对不同时间点的基因、蛋白质、代谢物等进行分析,揭示脑梗死的分子机制,为药物研发提供靶点。中风的高发病率、残疾率和死亡率给家庭和社会带来了沉重的负担。
实验研究的前提是选择合适的实验动物模型:大脑缺血再灌注MCAO疾病模型,创造了一个高度复制人类临床脑血管疾病的动物模型,包括了临床病人的疾病特征,这对于临床研究脑缺血的发病机制和药物筛选非常重要。狒狒和食蟹猕猴的颅神经中枢与人类非常相似,但它们价格昂贵且难以饲养。犬大脑的血管床与人类的明显不同,它有一个广*的颈内动脉和颈外动脉的吻合网络。在兔子中,大脑皮层发育不全,无法提供稳定的病理模型。目前,大鼠是*常用的实验研究动物,因为其饲养成本低,繁殖快。因此,大鼠是目前研究心血管疾病*常用的实验动物之一。在大鼠中建立的大脑缺血再灌注实验动物模型是比较好再现的,因为大鼠的繁殖特点与人类相似,CT中脑组织的病理变化与医院中观察到的临床病人非常相似。实验外包团队可以根据科研人员的需求,设计并执行各种实验。北京快速制作脑梗MCAO模型手术造模
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缺血性卒中的动物实验模型具有针对性与多样性的特点,其中线栓法大脑中动脉栓塞(MCAO)为制作局灶性缺血卒中模型*常用的方法。缺血性卒中的动物实验模型需要注意:(1)手术有一定技术难度,血管结扎不紧或结扎线脱落,会出血导致病理生理状态改变或增加死亡(2)进栓长度过长,易造成蛛网膜下腔出血,死亡率较高、模型制备失败,而进栓长度不足或线栓回退,不能成功制作脑缺血模型或提前灌注(3)当阻断血管达到120 min或更长时间时,会影响下丘脑的供血,导致自发性高热,影响实验结果。艾菱菲生物脑梗MCAO模型水迷宫