对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板可显著提高转入基因的表达水平。如果选择转染前两天铺板,可适当降低铺板密度,以确保转染时细胞的汇合度仍为70~80%。2.对于接触抑制敏感的细胞,可适当降低铺板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情况下,DNA-PEI复合物仍能转染细胞,但是DNA-PEI复合物必须在无蛋白存在的条件下形成。我们推荐使用Opti-MEMITM培养基以达到*转染效率。其他的无蛋白培养基则需测试与线性PEI转染试剂的兼容性。Polysciences转染与递送相关产品已正式移交Kyfora Bio,相关产品标签将变更为Kyfora Bio by Polysciences,后续购买请认准备新品牌。更多关于PEI转染试剂相关产品技术问题,欢迎咨询上海曼博生物!哪个品牌的PEI转染试剂转染效率更好?不同分子量PEI转染试剂转染效率
瞬时转染方法:1.接种细胞:转染前一晚,用胶原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化细胞并计数(不建议用胰酶)。调整细胞浓度,将细胞铺入细胞培养的器皿,每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。2.准备DNA-PEI复合物:DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用1.5-5μL线性PEI转染试剂。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管,一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中(注意:请勿颠倒添加顺序)。充分混匀后,室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时,请用圆底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL离心管。3.转染细胞:直接向每个孔中加入DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时,去除生长培养基,替换成无血清培养基,然后滴DNA-PEI复合物。转染1.5h后,添加½体积的包含30%血清的生长培养基。4.孵育细胞和分析结果:在CO2培养箱中37℃下孵育细胞至可以分析检测。转染后5h即可检测到转入基因的表达。请自行确定适合检测时间。如想申请试用装,请关注公众号:Mine-bio,回复“申请PEI”,即可参加!不同分子量PEI转染试剂转染效率PEI转染试剂会不会有毒性?
细胞转染实验是生物医学实验室中常规的研究手段,目的是把外源基因、蛋白或者小分子导入到靶细胞内。目前主要有三种主流方法:生物转染,物理转染和化学转染。其中生物转染主要是利用病毒等微生物作为基因导入载体,以慢病毒、腺病毒和腺相关病毒等常见,其侵染效率可以达到90%以上,但常因安全性等问题,很多实验室对其敬而远之。物理转染主要包括显微注射、电穿孔和基因,无论哪一种都需要特定的设备,且一分钱一分货,性能好的价格也都很性感。上海曼博生物是Polysciences官方授权du jia代理商,更多关于转染试剂相关问题,欢迎咨询上海曼博生物!也欢迎关注我们的公众号:Mine-bio查看更多技术文章!回复关键词“PEI申请”可申请试用装!
1.对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板可显著提高转入基因的表达水平。如果选择转染前两天铺板,可适当降低铺板密度,以确保转染时细胞的汇合度仍为70~80%。2.对于接触抑制敏感的细胞,可适当降低铺板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情况下,DNA-PEI复合物仍能转染细胞,但是DNA-PEI复合物必须在无蛋白存在的条件下形成。我们推荐使用Opti-MEMITM培养基以达到*转染效率。其他的无蛋白培养基则需测试与线性PEI转染试剂的兼容性。4.对大多数细胞来而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM试剂都能获得较高转染效率。使用者也可尝试每1μgDNA使用1~4μL体积线性PEI转染试剂进行优化。更多关于PEI转染试剂相关产品问题,欢迎咨询上海曼博生物!近期还有PEIfree申请活动,欢迎咨询上海曼博生物!欢迎关注我们的公众号Mine-bio,回复“PEI转染试剂”即可领取!哪个公司有卖GMP等级的PEI转染试剂?
Transporter 5转染试剂是一种非GMP等级的即用型线性聚乙烯亚胺(PEI转染试剂)溶液,由PEI MAX配置而成,采用0.1um PES无菌过滤器,完全消除支原体污染风险。Transporter 5将DNA缩聚成带正电荷的复合物,这些复合物很容易通过内吞作用进入细胞,并且Transporter 5-DNA 复合物能很好地抵御溶酶体的降解作用,有效提高转染效率。适用于工艺开发、临床前和早期临床研究,可无缝过渡到MAXgene GMP用于商业化生产。Transporter 5转染试剂能高效地将DNA转染入HEK-293、CHO、COS、HELA、昆虫(SF9、SF21) 等真核细胞系,可作用于大到135,000个核苷酸的质粒,所以较大的质粒也可以成功地转染。 Transporter 5可节省试剂准备时间,加快项目进度。经过严格的性能检测,确保品质,在新药研发过程中是一款快速、重复性好、可用于批量产的转染试剂。产品特点:非GMP,研究级PEI转染试剂溶液;高转染效率;无缝过渡到MAXgene GMP;易放大,可预测产量;用于工艺开发,临床前和早期临床研究。PEI转染试剂是不含动物源成分的吗?阳离子聚合物PEI转染试剂厂家
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抗体药物研发客户提供小众创新产品,包括从Researchgrade到cGMP等级的无动物源培养基质,转染试剂、病毒转导试剂、基因编辑工具等产品和定制服务,支持ATMP(AdvanceTherapyMedicinalProducts)药物研发从R&D到Clinicaltrial以及后期商业化的无缝转化;以及提供药物开发和探索的抗体文库定制和商业授权灵活的CHO工程细胞株以支持抗体药物的商业化生产,以此希望帮助国内科研工作者快速地接触世界范围内的技术,分享研发工具进步带来的技术红利,终为细胞、基因产业以及再生医学行业等乃至整个生命科学行业赋能!更多关于转染试剂相关产品问题,欢迎咨询上海曼博生物!也欢迎关注我们的公众号:Mine-bio ,私信回复关键词“PEI申请“即可申请PEI试用装!不同分子量PEI转染试剂转染效率