天津高性价比PEI转染试剂

产品简介：Polysciences转染试剂系列是基于聚乙烯亚胺（Polyethylenimine，PEI）的产品，因其较高的转染效果，已广泛应用于工业化生产。聚乙烯亚胺是一种具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子，每相隔二个碳原子，即每“第三个原子都是质子化的氨基氮原子，使得聚合物网络在任何pH下都能充当有效的“质子海绵”体(protonsponge)。PEI可用作转染试剂，它可以缩聚DNA分子形成颗粒并转染真核细胞。有实验证明，分子量为25000的线性PEI即Polysciences23966（PEI25K）转染效率表现优良。产品特点：适用于生产mABs、rAbs、bsABs和病毒载体(AVV、LV、BEV)；在HEK293、CHO和Sf9细胞系中高度有效；适用于从研发到工业化生产的各个阶段；可预测，可大规模生产；两周内即可生成大量目标蛋白或病毒；高转染效率；大量已发表的文献支持。哪个公司有卖GMP等级的PEI转染试剂？天津高性价比PEI转染试剂

瞬时转染方法：1.接种细胞：转染前一晚，用胶原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化细胞并计数（不建议用胰酶）。调整细胞浓度，将细胞铺入细胞培养的器皿，每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。2.准备DNA-PEI复合物：DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用1.5-5μL线性PEI转染试剂。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管，一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中（注意：请勿颠倒添加顺序）。充分混匀后，室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时，请用圆底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL离心管。3.转染细胞：直接向每个孔中加入DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时，去除生长培养基，替换成无血清培养基，然后滴DNA-PEI复合物。转染1.5h后，添加½体积的包含30%血清的生长培养基。4.孵育细胞和分析结果：在CO2培养箱中37℃下孵育细胞至可以分析检测。转染后5h即可检测到转入基因的表达。请自行确定适合检测时间。如想申请试用装，请关注公众号：Mine-bio，回复“申请PEI”，即可参加！RNAPEI转染试剂使用说明使用PEI转染试剂时出现沉淀是什么原因？

Transporter 5转染试剂是一种非GMP等级的即用型线性聚乙烯亚胺（PEI转染试剂）溶液，由PEI MAX配置而成，采用0.1um PES无菌过滤器，完全消除支原体污染风险。Transporter 5将DNA缩聚成带正电荷的复合物，这些复合物很容易通过内吞作用进入细胞，并且Transporter 5-DNA 复合物能很好地抵御溶酶体的降解作用，有效提高转染效率。适用于工艺开发、临床前和早期临床研究，可无缝过渡到MAXgene GMP用于商业化生产。Transporter 5转染试剂能高效地将DNA转染入HEK-293、CHO、COS、HELA、昆虫（SF9、SF21） 等真核细胞系，可作用于大到135,000个核苷酸的质粒，所以较大的质粒也可以成功地转染。 Transporter 5可节省试剂准备时间，加快项目进度。经过严格的性能检测，确保品质，在新药研发过程中是一款快速、重复性好、可用于批量产的转染试剂。产品特点：非GMP，研究级PEI转染试剂溶液；高转染效率；无缝过渡到MAXgene GMP；易放大，可预测产量；用于工艺开发，临床前和早期临床研究。

注意事项质粒质量：请务必使用高质量转染级无内质粒（推荐使用QIAGEN或者MN公司去内质粒提取试剂盒）。通过260nm光吸收测定DNA浓度，260nm/280nm比值确定DNA纯度（比值应该在1.8~2.0的范围之内）。如有可能，请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。细胞条件：使用适当保存和经常传代的健康细胞。确保培养基没有被细菌、或支原体污染。如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞，请在转染前至少传代两次。建议使用GIBCO或者78bio公司血清培养细胞。近期还有PEIfree申请活动，欢迎咨询上海曼博生物！关注曼博生物公众号：Mine-bio，私信回复关键词：PEI申请，即可参加试用装申请活动。用PEI转染试剂时，一般和DNA的比例是多少?

注意事项质粒质量：请务必使用高质量转染级无内质粒（推荐使用QIAGEN或者MN公司去内质粒提取试剂盒）。通过260nm光吸收测定DNA浓度，260nm/280nm比值确定DNA纯度（比值应该在1.8~2.0的范围之内）。如有可能，请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。细胞条件：使用适当保存和经常传代的健康细胞。确保培养基没有被细菌、或支原体污染。如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞，请在转染前至少传代两次。建议使用GIBCO或者78bio公司血清培养细胞。近期还有PEIfree申请活动，欢迎咨询上海曼博生物！欢迎关注我们的公众号：Mine-bio，回复关键词“申请PEI”，即可参加活动！更多关于Polysciences PEI转染试剂相关产品信息，欢迎咨询上海曼博生物！有哪些品牌的PEI转染试剂?无动物源成分PEI转染试剂中国代理权

PEI转染试剂会不会有毒性?天津高性价比PEI转染试剂

细胞分盘：通过胰酶消化收集细胞，用适当的完全培养基以4×105至8×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60mm组织培养皿上（根据实验需要选择培养皿，使细胞贴壁后所占总面积达到培养皿面积的70-90％）。根据细胞贴壁情况于含5％CO2的37℃温箱中孵育8-24h,当细胞贴壁完全后即可开始转染。转染前换入2mL预热的无血清培养基。2、制备PEI-DNA混合物：以60mm组织培养皿用420μL反应总体积为例。准备两支1.5mL离心管，一管将质粒DNA（总量2-8μg为佳）加入240μLHBS中，混匀。另一管中则用HBS将100μM的PEI储存液稀释成10μM，充分混合。然后取180μL10μMPEI溶液加入含有DNA的HBS中，充分混匀后室温静置20-30min。将这420μL的PEI-DNA混合液逐滴加入上述单层细胞的细胞培养基中，轻轻摇动平皿混匀，置于含5％～7％CO2的37℃温箱孵育。注：每次用100μM的PEI储存液前都需要先将其充分混匀，保证所取的浓度一致。3、培养6-10h后更换为37℃预热的含有血清的培养基，继续培养，16h左右可以观测到报告基因的表达。天津高性价比PEI转染试剂