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同样唾液和口腔拭子中核酸提取方法与血液的提取方法相似包括以下4个过程:1.通过裂解液裂解口腔脱落细胞,释放核酸物质。2.通过离心柱或纳米磁珠特异性吸附核酸物质,去除其他杂质。3.通过漂洗液洗掉挂在离心柱或纳米磁珠表面的化学试剂残留和蛋白残留。4.加入洗脱液将核酸从离心柱或纳米磁珠上洗脱下来。传统的提取方法由于核酸提取纯化过程耗时长,成本较高,步骤繁多,增加了基因污染的风险。因此需要一种血液、唾液和口腔拭子样本经过简单处理就可以作为模板进行荧光PCR扩增检测方法,满足科研和医学领域快速检测的要求。技术实现要素:本发明提供了一种快速提取血液和口腔拭子基因组DNA的方法。该发明通过快速简单处理口腔拭子和血液样本,且无需纯化可直接用于荧光PCR扩增的DNA。10分钟内即可得到应用于ARMS-PCR反应体系的模板DNA。同时优化ARMS-PCR荧光体系,在反应液中加入防污染UDG酶以及提高Taq酶稳定性的的BSA,从而实现血液和口腔拭子基因组快速荧光PCR扩增检测。该方法快速简单,成本低廉,检测灵敏,且用该方法提取的基因组与商品化试剂盒提取的基因组的检测结果相近。
专业用在基因检测行业,细胞学,遗传学,疾病筛查,检测,基因DNA,分子诊断,个人检测诊断,大健康,医学,生物,制药等行业**的海绵拭子【基因检测DNA海绵拭子】:基因检测口腔DNA样本采集【产品结构、组成】:一次性使用基因采样袋由基因海绵采样拭子、细胞保存液管组成。【使用说明】:本基因采样作为基因检测的采样工具,其用途是采集和保存口腔黏膜上皮脱落细胞。采样拭子由海绵头、采样套杆和采样推杆三部分组成。使用方法将密封包装的采样拭子拆封后,将有海绵头一端深入口腔内,用海绵头刮拭口腔内壁,可将口腔黏膜上皮脱落细胞及部分唾液吸在采样头表面。在刮拭后可单手持采样拭子,用拇指抵住采样推杆,将采样头顶入采样管内,拧紧采样管盖,便可在常温下保存。一个采样头对应一个采样管,套杆及推杆可丢弃。操作如下图:【产品特点】:本采集袋具有采集方便、携带方便、一次性使用,无交叉污染的特点。【用途】:本产品用于采集人体口腔黏膜上皮脱落细胞。【注意事项】:使用本产品前详细阅读使用说明书;本产品为‘一次性使用’不可重复使用,用后请立刻丢弃;本产品禁止存放在0、有害、有腐蚀性物质的环境;本产品在储运过程中不得被重压,并保存包装完好。 口腔拭子是海绵口腔拭子。

所有反应孔背景信号好、Ct值都在19~25之间,荧光扩增曲线呈典型的S型,说明本发明实例1提供的血液样本快速提取法用于荧光PCR扩增的方法具有较好的可行性。将四份不同来源不同的人血液样本进行荧光PCR扩增检测,每份样本平行三次,结果分别如图2、图3、图4、图5所示,由图可见,每个样本的平行实验,其曲线的Ct值很接近且≤25。说明本发明实例提供的血液样本快速提取法用于荧光PCR扩增的方法有可靠的重复性以及较好的均一性。实施例2与市场现有的血液基因组提取试剂盒产品对比。本发明的具体步骤如下:将**管颠倒混匀后,吸取100μL血液至,加入200μL的核酸释放剂(20mM~80mM的氢氧化钠溶液、~、~、~、~***钠、~3%甲酰胺),涡旋混匀,然后5000g离心30s,弃上清,获得细胞沉淀;然后再加入200μL核酸释放剂,涡旋1min至沉淀完全散开,5000g离心30s,弃上清;向细胞沉淀中加入50μL核酸释放剂,涡旋振荡1min,室温放置5min,12000g离心30s,取上清液即为提取的血液基因组DNA;取上清液3μL,加入到配制好的荧光PCR反应液,于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。选用某公司的血液基因组提取试剂盒作为方法比对,具体操作过程:将取血管颠倒混匀数次,吸取200μL血液于。口腔拭子在使用时要握住手柄,将拭子伸进口腔用刷牙的力度同时旋转拭子,让拭子头部充分接触口腔粘膜。性能优良口腔拭子出厂价
口腔细胞采样时要撕开口腔拭子外包装,小心取出口腔拭子(注意:整个取样过程中手不能接触拭子部分)。辽宁口腔拭子服务为先
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