进口PEI转染试剂生产商

方法：1．细胞分盘：通过胰酶消化收集细胞，用适当的完全培养基以4×105至8×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60mm组织培养皿上（根据实验需要选择培养皿，使细胞贴壁后所占总面积达到培养皿面积的70-90％）。根据细胞贴壁情况于含5％CO2的37℃温箱中孵育8-24h,当细胞贴壁完全后即可开始转染。转染前换入2mL预热的无血清培养基。2.制备PEI-DNA混合物：以60mm组织培养皿用420μL反应总体积为例。准备两支1.5mL离心管，一管将质粒DNA（总量2-8μg为佳）加入240μLHBS中，混匀。另一管中则用HBS将100μM的PEI储存液稀释成10μM，充分混合。然后取180μL10μMPEI溶液加入含有DNA的HBS中，充分混匀后室温静置20-30min。将这420μL的PEI-DNA混合液逐滴加入上述单层细胞的细胞培养基中，轻轻摇动平皿混匀，置于含5％～7％CO2的37℃温箱孵育。注：每次用100μM的PEI储存液前都需要先将其充分混匀，保证所取的浓度一致。3.培养6-10h后更换为37℃预热的含有血清的培养基，继续培养，16h左右可以观测到报告基因的表达。

PEI转染试剂是一种稳定的具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子。进口PEI转染试剂生产商

PEI在于可以应用于体内试验。当初试验经费很有限，被逼无奈只能放弃脂质体2000，选择PEI，以至于相当长的时间内，转染试验都不顺利。下面是几点关于PEI转染的注意要点：1.PEI的使用量可以参照脂质体2000的说明书，所用质粒尽量去内2.转染时，一定要把PEI+DMEM加入到质粒+DMEM中，顺序不可错，轻微混匀，静止20min3.转染后4小时，一定要换液！换含有FBS的完全培养液！因为PEI对细胞毒性太大4.如果后续试验涉及到稳定筛选，建议把血清浓度适当提高。PS：事实证明，PEI是可行的，已经做出稳定细胞系了。40KPEI转染试剂品牌PEI转染试剂有没有毒性？

稳定转染方法: 

1.接种细胞：转染前，用胶原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化细胞并计数（不建议用胰酶）。调整细胞浓度，将细胞铺入细胞培养的器皿，每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。2.准备DNA-PEI复合物：DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用1.5-5μL线性PEI转染试剂(这个需要客户自行摸索配比，每一批转染试剂和每一批DNA比例可能会稍有不同）。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管，一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中（注意：请勿颠倒添加顺序）。充分混匀后，室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时，请用圆底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL离心管。

准备DNA-PEI复合物：DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用2-5μL线性PEI转染试剂。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管，一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中（注意：请勿颠倒添加顺序）。充分混匀后，室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时，请用圆底聚丙烯管，例如Falcon5mL/14mL离心管。转染细胞：直接向每个孔中加入DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时，去除生长培养基，替换成无血清培养基，然后滴DNA-PEI复合物。转染3h后，添加?体积的包含30%血清的生长培养基。更多关于Polysciences PEI，欢迎咨询上海曼博生物！PEI转染试剂和脂质体转染试剂的区别？

对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞，在转染前两天铺板可显著提高转入基因的表达水平。如果选择转染前两天铺板，可适当降低铺板密度，以确保转染时细胞的汇合度仍为70~80%。2.对于接触抑制敏感的细胞，可适当降低铺板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情况下，DNA-PEI复合物仍能转染细胞，但是DNA-PEI复合物必须在无蛋白存在的条件下形成。我们推荐使用Opti-MEMITM培养基以达到*转染效率。其他的无蛋白培养基则需测试与线性PEI转染试剂的兼容性。

PEI转染试剂是粉末的还是液体的？核酸PEI转染试剂价格多少

PEI转染试剂不含动物源成分。进口PEI转染试剂生产商

对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞，在转染前两天铺板可显著提高转入基因的表达水平。如果选择转染前两天铺板，可适当降低铺板密度，以确保转染时细胞的汇合度仍为70~80%。2.对于接触抑制敏感的细胞，可适当降低铺板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情况下，DNA-PEI复合物仍能转染细胞，但是DNA-PEI复合物必须在无蛋白存在的条件下形成。我们推荐使用Opti-MEMITM培养基以达到*转染效率。其他的无蛋白培养基则需测试与线性PEI转染试剂的兼容性。

进口PEI转染试剂生产商

上海曼博生物医药科技有限公司位于自由贸易试验区达尔文路16幢104室，是一家专业的生物医药科技（人体干细胞、基因诊断与zhiliao技术开发和应用除外）领域内的技术开发、自有技术转让，并提供相关的技术咨询和技术服务；计算机软件的开发、设计、制作（音像制品、电子出版物除外）、销售自产产品；实验室试剂及耗材（药品、危险品除外）、化工原料及产品（除危险化学品、监控化学品、烟花爆竹、民用baozha物、易制毒化学品）、仪器仪表、机械设备、电子设备、塑料制品、玻璃制品、办公用品、电子产品的批发、进出口、佣金代理（拍卖除外）。【依法须经批准的项目，经相关部门批准后方可开展经营活动】公司。在曼博生物近多年发展历史，公司旗下现有品牌PL Bioscienc,Quan-Lab,Polysciences,Sirion Biote,CN-Bio,Dharmacon,Horizon,Pfenex,Visual Prote等。我公司拥有强大的技术实力，多年来一直专注于生物医药科技（人体干细胞、基因诊断与zhiliao技术开发和应用除外）领域内的技术开发、自有技术转让，并提供相关的技术咨询和技术服务；计算机软件的开发、设计、制作（音像制品、电子出版物除外）、销售自产产品；实验室试剂及耗材（药品、危险品除外）、化工原料及产品（除危险化学品、监控化学品、烟花爆竹、民用baozha物、易制毒化学品）、仪器仪表、机械设备、电子设备、塑料制品、玻璃制品、办公用品、电子产品的批发、进出口、佣金代理（拍卖除外）。【依法须经批准的项目，经相关部门批准后方可开展经营活动】的发展和创新，打造高指标产品和服务。自公司成立以来，一直秉承“以质量求生存，以信誉求发展”的经营理念，始终坚持以客户的需求和满意为重点，为客户提供良好的血小板裂解液，WB自动孵育系统，微流控器官芯片，蓝牙无线标签机，从而使公司不断发展壮大。