分光光度计是用不连续的波长采样反射物体或透射物体的一种测量仪器。由于不同物体分子的结构不同,对不同波长光线的吸收能力也不同,因此,每种物体都具有特定的吸收光谱。能从含有各种波长的混合光中,将每一种单色光分离出来,并测量其强度的仪器叫做分光光度计。分光光度法是比色法的发展。比色法只限于在可见光区,分光光度法则可以扩展到紫外光区和红外光区。分光光度法则要求近于真正单色光,其光谱带宽比较大不超过3-5nm,在紫外区可到1nm以下,来自棱镜或光栅,具有较高的精度。温、湿度较高的地区应特别注意勿使紫外可见火焰光度计受潮。陕西哪里卖火焰光度计价格
两束光合为一束。并交替通过入射狭缝进入单色器中,经离轴抛物镜将光束平行地投射在光栅上,色散并通过出射狭缝之后,被滤光片滤除高级次光谱,再经椭球镜聚焦在探测器的接收面上。探测器将上述交变的信号转换为相应的电信号,经放大器进行电压放大后,转入A/D转换单位,计算机处理后得到从高波数到低波数的红外吸收光谱图。元析仪器紫外可见分光光度计二、紫外可见分光光度计和红外分光光度计的概述不同:1、紫外分光光度计的概述:根据吸收光谱图上的一些特征吸收,特别是比较大吸收波长λmax和摩尔吸收系数ε是检定物质的常用物理参数。这在药物分析上就有着很***的应用。在国内外的药典中,已将众多的药物紫外吸收光谱的比较大吸收波长和吸收系数载入其中,为药物分析提供了很好的手段。2、红外分光光度计的概述:由光源发出的光,被分为能量均等对称的两束,一束为样品光通过样品,另一束为参考光作为基准。这两束光通过样品室进入光度计后,被扇形镜以一定的频率所调制,形成交变信号。三、紫外可见分光光度计和红外分光光度计的应用不同:1、紫外分光光度计的应用:将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中,在同一条件下分别测定紫外可见吸收光谱。河南大容量火焰光度计原理超微量火焰光度计氙气闪光灯为灯源.
点击上方蓝字关注“公众号”分光光度计分光光度计是实验室检测核酸或者蛋白样品浓度**常用的工具之一。仪器使用频繁,但甚少见到有人维护。其实,保持分光光度计清洁、无污染是成功操作的关键。清洁仪器我们应该用蘸有中性清洁剂的软布擦拭分光光度计的表面。刺激性的清洁剂可能会损坏仪器表面。你也可以清洁比色皿本身。比色皿插槽只能用蘸有乙醇或异丙醇的无绒棉签来清洁。这可防止液体进入内部。如果你必须要用水清洁,那么可用蘸有乙醇或异丙醇的棉签来加速干燥。比色皿插槽的盖子也可以清洁,但不是泡在清洁剂中。如有必要,拆下盖子,用蘸有温和清洁剂的软布或无绒棉签来清洁。此外,平时不使用时,应盖上比色皿插槽的盖子,以免灰尘或其他污染物落入。消毒和净化如果分光光度计被微生物所污染,那么可采用下列步骤进行消毒和净化。首先,利用温和的清洁剂来清洁设备。然后,用蘸有消毒剂(通常是酒精溶液)的软布擦拭表面。如有必要,拆下并清洁比色皿插槽。检查组件维护的另一方面在于检查分光光度计的光度准确性。Eppendorf提供了一个滤光片系统(BioSpectrometerreferencefilterkit),以评估光度准确性和系统的波长误差。
编辑|steins来源|岛津分析中心背景摘要:紫外可见分光光度计和荧光分光光度计都经常用于样品定量。使用紫外可见分光光度计进行定量时基于朗伯比尔定律,测定的吸收值一定范围内与样品浓度成正比。另一方面,利用荧光分光光度计时,使用荧光强度。在低浓度时,荧光强度与浓度成正比,所以,可以用于定量。本次使用紫外可见分光光度计和荧光分光光度计两台仪器分别测定了罗丹明B溶液。罗丹明B是用于纤维和皮革的染色的荧光物质。关于测定结果,对两个机种的定量、检测下限值和标准曲线的线性度进行了比较,下面将进行介绍。1紫外1罗丹明B溶液的吸光度测定使用了紫外可见分光光度计UV-260Oi测定样品吸光度。测定条件如表1所示。将粉末状的罗丹明B溶解在蒸馏水中,调配~5ug/ml的标准溶液。罗丹明B的标准溶液的吸光光谱如图1所示,根据544nm的吸光度值创建的标准曲线如图2和图3所示。在图2中,用~5ug/ml的6点和空白样品(蒸馏水)创建,得到了线性度良好的标准曲线(相关系数的平方值是)。在图3所示的低浓度区域中,噪声的影响相对较大,导致线性较差。2荧光2罗丹明B溶液的荧光强度测定使用了荧光分光光度计RF-60O0测定了样品荧光强度。测定条件如表2所示。超微量火焰光度计适于蛋白质、DNA、RNA样品的快速检测。
在仪器改变测试波长和测试一段时间后可通过按0%键和100%/0A键对仪器进行调零和调满度、吸光度。(5)显示方式的选择【相关实验】邻二氮菲吸光光度法测定铁的含量报告实验目的邻二氮菲吸光光度法测定铁的含量;熟悉722N型分光光度计的原理和操作。实验原理邻二氮菲吸光光度法是测定铁含量的常用方法。在PH为2~9的溶液中,Fe2+的显色剂邻二氮菲形成稳定的橘红色络合物,该络合物在508nm波长处有**大吸收。为了消除Fe2+的副反应及其他因素的影响,在微酸溶液进行,且用盐酸羟胺将Fe3+还原为Fe2+。吸光光度法定量分析的依据是朗伯比尔定律A=Ɛbc,当液层厚度b一定时A=Kc,吸光光度法定量分析的方法有直接比较法和标准曲线法,这个实验用标准曲线法。在标准曲线上查出试液中铁的含量,按下式求出原始待测溶液中铁的含量(ρ表示溶液中铁的含量,mg/L)ρFe,原始待测溶液=ρFe,标准曲线查得50/10实验步骤1、取出容量瓶和移液管,用蒸馏水清洗容量瓶并用相应的溶液润洗移液管;2、在6个容量瓶中用刻度移液管分别加入,、、、、、,5mLHAc-NaAc缓冲溶液,1mL10%盐酸羟胺溶液及,用水定容。将其分别对应编号为1、2、3、4、5、6号。保持紫外-可见火焰光度计表面和工作环境的清洁。河南f-500火焰光度计用途
火焰光度计可以应用到确定生松油中的钠含量,确定土壤中可交换钠含量。陕西哪里卖火焰光度计价格
由于仪器的制造和调整误差,单色光的实际波长与仪器的波长读数值间都存在一定的误差。但是,当吸收峰宽度较小,而且吸收峰两侧边缘比较陡直,此时波长准确度的影响就必须引起注意。2、透射比(吸光度)准确度很显然,透射比或吸光度的误差越大,测试结果的可信性越差,从而影响到测试数据的准确性。3、杂散光杂散光是由于光学元件制造误差以及光学和机械零件表面的漫反射形成的。杂散光是分析样品的非吸收光,随着样品浓度的增加,杂散光的影响也随之增大,将给分析结果带来一定的误差。在紫外的短波区域光源强度和检测器的灵敏度均明显减弱,杂散光的影响更不能忽视。因此,杂散光的大小也是仪器性能的一项重要指标。使用与维护1、若大幅度改变测试波长,需稍等片刻,等灯热平衡后,重新校正“0”和“100%”点。然后再测量。2、指针式仪器在未接通电源时,电表的指针必须位于零刻度上。若不是这种情况,需进行机械调零。3、比色皿使用完毕后,请立即用蒸馏水冲洗干净,并用干净柔软的纱布将水迹擦去,以防止表面光洁度被破坏,影响比色皿的透光率。4、操作人员不应轻易动灯泡及反光镜灯。陕西哪里卖火焰光度计价格
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