纺锤体观测新技术提升“试管婴儿”胚胎受精率
什么是纺锤体观测仪?
纺锤体观测仪是利用光线经过双折射性的物体时产生的光程差,对卵母细胞内的纺锤体进行动态及无创观察的显微观测系统。
纺锤体观测仪主要有什么用处?
纺锤体观测仪主要用于ICSI注射时纺锤**置观测,避免ICSI注射时对卵子的纺锤体损伤。
目前的ICSI注射方法是:假定成熟的MII卵母细胞的纺锤体靠近***极体,通过定位***极**置于6点或12点方向,在垂直于***极体的3点钟方向注入精子。但事实上,纺锤体的位置不是固定不变的,***极体不能精细预测所有卵母细胞纺锤体的位置,约39%的纺锤体并不能通过***极体预测。传统的ICSI注射很可能损坏纺锤体,若纺锤体损伤很可能导致卵母细胞死亡或染色体异常。因此,在ICSI注射时对纺锤体进行观察,对于ICSI操作和受精结局都有非常重要的意义,可以显著提高ICSI受精率,有大量文献报道正常受精率在观察到纺锤体的卵子中***高于未观察到纺锤体的卵子(83.3% VS 77.2%)。
纺锤体仪还有什么作用?
纺锤体观测仪还可以对一代受精后的卵母细胞受精情况进行评估,选择未受精的卵母细胞进行补救ICSI***。 纺锤体,作为细胞分裂的“引擎”,驱动着生命的延续与多样性。上海双折射性纺锤体兼容大部分显微镜
纺锤体是卵母细胞在减数分裂过程中形成的一种微管结构,负责精确分离染色体。然而,纺锤体对环境温度、渗透压等外部条件极为敏感,在冷冻保存过程中容易发生损伤,导致染色体分离异常,进而影响卵母细胞的发育潜力和受精后的胚胎质量。因此,如何有效监测和评估冷冻过程中纺锤体的变化,成为纺锤体卵冷冻研究的重要课题。纺锤体实时成像技术的出现,为这一问题的解决提供了可能。纺锤体实时成像技术主要利用高分辨率显微镜结合荧光标记技术,对卵母细胞内的纺锤体进行实时、动态的观察和记录。常用的荧光标记方法包括使用绿色荧光蛋白(GFP)标记微管蛋白,以及利用特定抗体对纺锤体相关蛋白进行染色。通过这些方法,研究者可以清晰地观察到纺锤体的形态、位置、动态变化等信息,从而准确评估冷冻过程中纺锤体的稳定性和完整性。北京卵母细胞纺锤体玻璃底培养皿在有丝分裂中,纺锤体形成并维持着染色体的稳定性。
纺锤体功能分解
在细胞分裂中,其主要作用有两个部分。其一为排列与分裂染色体。纺锤体的完整性决定了染色体分裂的正确性。纺锤体的正常生成是染色体排列的必要条件。纺锤体生成完毕后一般会有5-20分钟的延迟,以供细胞调整着丝点上微管束的极性,以及决定是否所有的着丝点都附着正确。此后细胞进入分裂后期,染色体分裂为两组数目相等的姐妹染色单体。同样,纺锤体的完整性决定这个分裂过程在时间和空间上的准确性。
纺锤体另一功能为决定胞质分裂的分裂面。染色体分裂的同时,纺锤体中的一部分微管不随染色体分裂到两极,而停弛在纺锤体**, 形成纺锤**体(central spindle)。在纺锤中体的**为两组极性相反的微管交叠的区域,称为纺锤**区(spindle midzone).此**区就是接下来的胞质分裂面。胞质分裂开始于分裂后期的较晚期。胞质分裂一般结束于分裂末期后1-2小时,此期间两个子细胞由中心颗粒体(midbody)连接。 一般认为纺锤体的分解发生在细胞分裂末期。
玻璃化冷冻技术因其快速冷冻和解冻的特点,在哺乳动物纺锤体卵冷冻保存中展现出巨大优势。该技术通过极快的降温速率和高浓度的冷冻保护剂,使细胞内溶液在冷冻过程中呈玻璃态而非结晶态,从而避免了冰晶对纺锤体的损伤。此外,研究者们还尝试将微流控技术、激光辅助冷冻等新技术应用于卵母细胞的冷冻保存中,以进一步提高冷冻效果。为了准确评估冷冻对纺锤体的影响,研究者们开发了多种纺锤体稳定性评估技术。例如,通过偏光显微镜观察纺锤体的形态变化;利用免疫荧光染色技术检测纺锤体相关蛋白的分布和表达;以及通过分子生物学方法检测纺锤体相关基因的转录和翻译水平等。这些技术的应用为深入研究冷冻过程中纺锤体的变化提供了有力支持。纺锤体微管的聚合与解聚受到多种酶的调控。
什么是纺锤体?它有多重要?
纺锤体主要由微管蛋白组成,微管蛋白是一种含有α和β亚单位的异二聚体。纺锤体不是一成不变的,常常处于组装和去组装的动态变化过程中,一般在细胞分裂的中、后期,纺锤体结构较为典型。纺锤体主要有两个作用:其一,排列与分配染色体;其二,决定细胞胞质分裂的分裂面。纺锤体的完整性决定了染色体分裂过程在时间和空间上的准确性。纺锤体就像一位聪明的大力士的双手,在细胞分裂过程中,能精细的将等位染色体平均拉向细胞的两极,确保分裂后的2个子细胞中的染色体数目相等。但是,如果这个大力士多了一只或几只手,染色体的分配将紊乱,导致非整倍体。纺锤体损伤的增加多见于高龄妇女,或接触某些化学物质的卵母细胞。
在细胞分裂过程中,纺锤体对卵母细胞染色体的平衡、运动、分配、和极体的排出非常关键。卵母细胞成熟过程中的两次减数分裂形成两次纺锤体,卵母细胞受精、雌雄原核融合后又会形成有丝分裂纺锤体。 纺锤体在细胞分裂后期通过微管切割机制实现染色体分离。上海双折射性纺锤体兼容大部分显微镜
纺锤体在细胞分裂完成后迅速解体,为细胞进入下一个周期做准备。上海双折射性纺锤体兼容大部分显微镜
随着科技的不断发展,无损观察技术将不断得到优化和创新。未来有望开发出更加便捷、高效、低成本的成像设备,进一步降低设备成本并提高操作简便性。同时,通过优化成像算法和数据处理技术,可以实现对纺锤体形态变化的更精细、更准确的评估。无损观察纺锤体卵冷冻研究涉及生殖医学、细胞生物学、材料科学等多个领域。未来通过加强不同学科之间的交叉融合和协同创新,可以推动该领域取得更多突破性进展。例如,结合分子生物学和遗传学的研究成果,可以进一步揭示纺锤体在卵母细胞发育和受精过程中的作用机制。上海双折射性纺锤体兼容大部分显微镜