精子手工计数原理及操作方法1.原理:将精液用适当的稀释液作一定量稀释后,混匀注入计数池内计数,再算出每毫升精液中精子数。2.方法(按照***版第四版《全国临床检验操作规程》)1).于小试管内加精子稀释液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀释液内混匀。2).充分摇匀后,滴入改良Neubauer计数板的计数池内,静置1~2分钟,待精子下沉后,以精子头部作为基准进行计数。3.计算1).如每个**中方格内精子少于10个,应计数所有25个中方格内的精子数。2).如每个**中方格内精子在10~40个,应计10个中方格内的精子数。3).如每个**中方格内精子多于40个,应计数5个中方格内的精子数。公式:精子数=计数结果/计数中方格×25×1/计数池高度×20×103/ml=计数结果/计数中方格×1/计数池高度×5×103/ml所有操作人员都应接受规范的CASA分析仪使用培训,严格按照使用指南进行操作。北京Hamilton Thorne精子分析精确温度控制

HamiltonThorne精子分析仪IVOSⅠ与IVOSⅡ一致性比对分析根据质量控制的要求,对新精子分析系统进行性能验证后,应与旧系统进行一致性评价,从而保证检测结果的准确性。方法:选用原有HamiltonThorne精子分析仪IVOSⅠ为参比仪器,新购仪器IVOSⅡ为实验仪器,对精子分析系统的主要参数(精子浓度、前向运动精子百分率、总活力)进行分析比对。结果:两台仪器的方法内和方法间离群值检验、偏倚图和散点图的线性关系和离群值检测所有参数均能符合比对要求,检测结果具有相关性;对实验仪器的检测结果适合范围的检验,当其精子浓度r=0.988,前向运动精子百分率r=0.975,总活力r=0.981,r均≥0.975,表明取值范围合适;对预期偏倚(Bc)的接受性评价表明当精子浓度在12×10~6/ml,允许总误差(TEa)为6.67%;当前向运动精子百分率<31%,TEa为2.34%,两项检测的Bc上限<1/2允许误差(Ea),实验仪器经比对分析显示符合质控要求。结论:通过比对分析,得出两台精子分析系统的主要参数(精子浓度、前向运动精子百分率、总活力)结果具有可比性,检测结果一致,可同时用于临床标本的检测。上海快速运动精子分析DSL全自动精子分析仪严格按照世界卫生组织(WHO)和KRUGER标准,并通过ISO9001认证。

扩展性检查:可以在某些情况下由实验室选择或根据临床医生的特殊要求而使用的项目。手册增加了精子DNA损伤、遗传学和炎症细胞等相关检查项目。提出了基因突变是导致不育和精液常规检查异常的原因。新增了精液相关细胞因子、趋化因子等检测的方法、试剂、检测步骤等内容。在精液参数异常的男性中普遍存在精子DNA损伤,并且已有报道指出其与精液参数正常男性的不育有关。由于与精液质量相关,精子DNA损伤检测是男性不育检查中的重要补充内容,已成为男科学基础和临床中论述**多、**有前景的精子损伤分子标志物之一。本版手册增加了大量篇幅对其原理和检测方法进行了描述。新增了基因和基因组测序内容。临床上,越来越多的人意识到染色体异常[数量异常、结构异常(包括微缺失和微重复)]和基因突变是导致各种男性不育症的基础病因,而这正是在精液分析中观察到的许多异常的原因。尽管基因和基因组测序常规在医学遗传学实验室进行,但一些男科实验室也在做同样的检测。为明确生殖道炎症对于男性不育的影响,泌尿男科医生可能提出对精液中的趋化因子和细胞因子进行评估。本手册纳入了精液中白细胞介素检测方法。
检查具备条件受检者,经历一段经常排精过程后,禁房事5-7天(上次排精到取标本间隔时间至少不得少于100小时);[1]备大口有盖清洁干燥容器一个,以**方式获取精液,一次全部射入容器,盖上盖,记录标本离体时间;贴身保温,30分钟内送到化验室,并向检验员提供标本取出时间。精液常规观察:精液总容量(毫升),精子活动情况,精子密度(个/毫升),精液液化时间(标本取出到精液液化的时间),不动精子(个/高倍视野)等。见不动精子,须染色方可区分:不活动的精子、死精子、未成熟精子等。找不到精子必须离心后检验,仍然找不到精子;方可报告无精。经三次取样化验,结果仍然找不到精子方可确认无精子症。IVOS具有高分辨率和高灵敏度的特点,能够捕捉到微小的细节和变化,进一步提高了精子分析的准确性。

定量测定是医学发展的重要保证。WHO1980年出版了男科实验室手册***版及以后版本[1]对有关男科的实验进行了详细的阐述。对计算机辅助精子分析进行质量管理包括:计算机本身的软硬件、CASA分析结果、工作人员的具体操作几方面。CASA参数包括精子数量和各种活动力变量其质量包括所测得数据的可靠性、精确度、如何避免差错和数据的正确性及确认以及分析中的标准[2]。CASA质量管理关系到男科实验室中**分析的质量具有以下特点:⑴在实验室内部质量和医生处置质量方面优于其它测定精子运动的方法;⑵CASA结果及结果质量的评估较困难;⑶WHO标准是医生处置质量保证的基础;⑷今后应加强操作人员的培训。Hamilton Thorne精子分析仪采用先进的光学成像,能够实时分析精子的动力学参数,提供有效的精子质量评估。广州牛精子分析精子动力分析
精子分析仪参数,精子头侧摆幅度(ALH):精子头关于其平均路径的侧向位移幅度。北京Hamilton Thorne精子分析精确温度控制
二、生化及免疫学检验:5、精浆肉碱测定【正常参考值】浓度为239.56±l05.59umol/L。【临床意义】精浆肉碱测定精浆中的肉碱主要由附睾分泌,其次是精囊。精浆中肉碱分为游离肉碱和乙酰肉碱二种,附睾中含高浓度的肉碱,主要与精子在附睾成熟时所需的能量来源有关。现认为精浆肉碱含量和果糖含量的变化,常反映附睾、精囊的功能。精浆肉碱及果糖含量正常,表明附睾、精囊功能正常。当肉碱含量高于正常的50%,而果糖含量降低,则提示精囊功能障碍,附睾功能正常;精浆肉碱约为正常含量的50%左右,果糖含量正常,说明附睾功能障碍,精囊功能正常;而肉碱急剧下降,果糖含量亦减少,表示精囊、附睾功能均发生障碍。6、抗精子抗体(AsAb)测定【正常参考值】阴性。【临床意义】AsAb检测对不育原因检查有重要临床意义。存在于血清或生殖道分泌液中的AsAb,可抑制精子的活动,干扰精子的运行,阻碍精子穿透及精卵结合,使受精发生障碍。即使已经受精,也可能影响发育中的胚胎,造成免疫性流产。不育夫妇AsAb阳性者占25%-30%,当精子输出管道受阻、睾丸损伤、炎症、附睾等生殖系***时,系精子外逸而产生的自身抗体。北京Hamilton Thorne精子分析精确温度控制