芯弃疾JX-8B数字ELISA产品
每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
人类形式的蛋白质被加入到25%牛血清中以代替临床测试样本;通常使用四倍稀释因子以减少免疫测定中的基质效应4。使用数字ELISA检测25%血清中的PSA,从该实验中确定了LOD为~50aM(1.5fg/mL),相当于整个血清中的LOD为~200aM(6fg/mL)。检测到的比较低浓度为250aM,相当于25%血清中的1fMin全血清。由于LOD是通过外推背景浓度来确定的加上背景的三个标准差,不同运行的LOD取决于背景的CV。在具有典型背景方差的几个实验中,全血清PSA的亚飞摩尔LOD得以保持。相比之下,一种前列的商业PSA检测方法(ADVIACentaur,西门子)报告在人血清中的LOD为3pM(0.1ng/mL),并且已经报道了LOD在10-30fM17,26。 芯弃疾JX-8B单分子小型化ELISA检测产品,每个生物实验室都能用的单分子检测;创新性数字ELISA优势
创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA
我公司推出的数字化高灵敏ELISA芯片检测产品应用场景:适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物病情检测等各种应用场景应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。
将200,000个功能化DNA捕获探针与100μL孵育含有目标DNA的溶液(5‘-TTGACGGCGAAGACCTGGATGTATTGCTCCTCTGAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘孵育2小时后,移除DNA靶标溶液,用0.2×SSC缓冲液洗涤珠子三次含有0.1%Tween-20的微球重新悬浮并与10nM混合生物素标记的信号探针(5‘-TACATCCAGGTCTTCGCCGTCAA/生物素/-3’)对目标DNA具有特异性,孵育1小时。然后将珠子在去除信号探针后用含0.1%吐温-20的0.2×SSC缓冲液洗涤三次。随后向珠子沉淀中加入10pMS阝G溶液,混匀并混合1小时。然后将珠子分离并在含0.1%吐温-20的5×PBS缓冲液中洗涤六次。重悬于10μLofPBS中并加载到飞升微升孔阵列上。 高科技数字ELISA优势数字化高敏ELISA芯片,可以进行8孔、4孔的灵活检测。
创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。循环血液转化为~2×10−15M(或2飞摩尔,fM);早期HIV传染血清中每mL含有10-3000个病毒颗粒,相当于p24抗原浓度范围为从50×10−18M(50attomolar,aM)到15×10−15M(15fM)10.尝试开发能够测量这些蛋白质浓度的方法集中在蛋白质上的核酸标记复制,11,12或测量整体、结合标记蛋白分子的性质13-16。Mirkin等人12,17及其他研究者18使用基于金纳米颗粒和DNA生物条形码的标记物,已将蛋白质的检测范围扩展至低飞摩尔水平;更近使用该技术的一篇报道展示了检测到10飞摩尔PSA插入物17。这些方法所达到的灵敏度然而,检测蛋白质仍然落后于核酸,如聚合酶链反应(PCR),从而限制了蛋白质组中具有已在血液中检测到6,19。单个蛋白质分子的分离和检测为测量极低浓度的蛋白质s1,2提供了一种有希望的方法。
芯弃疾JX-8B数字化高灵敏ELISA芯片检测产品;应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。
生物实验室、医学实验室常见问题:ELISA使用繁琐、用时长、样本用量大、使用不够灵活。使用方法比较繁多,用时长,每次检测可能要花几个小时,经常半天就测试了一轮工艺;如果要根据结果来改善,就得再花上半天、一天;使用和实验安排不够灵活。ELISA试剂盒每次购买和使用,大多都要以整版方式进行,不够灵活。 芯弃疾JX-8B单分子ELISA检测产品,微量样本实现多重快速检测!
芯弃疾JX-8B数字ELISA高敏检测产品;将传统的模拟信号转化为新型的数字化信号;创新型原理,有效提高检测灵敏度,可达fg/aM级!
阵列芯片原理:从15µLof基质中的500,000个珠子开始。结果表明,阵列图像的定量分析大约一半的孔在珠子沉降几分钟后被占据。对于SimoaHD-1分析仪,沉降时间减少到90秒,分布在三个仪器处理周期之间。随着珠子重新沉降到阵列中,仪器对其他操作(密封和成像)进行索引,这些操作已经加载到阵列上。通常,会检测25,000-50,000个珠子。由于Simoa中的测量单位(AEB)是一个比率,一定珠装载量的差异不影响数据质量或在大多的范围内保持精度,前提是存在足够的珠子数量以保持在泊松噪声水平之上。22数据质量会受到影响,当泊松噪声主导测量误差时。这发生在与背景相关的正井数量降至约50个珠子以下时,此时泊松噪声明显影响测量的变异系数(CV)。
7)数字化高敏ELISA芯片,低成本、便捷、快速进行微量样本的检测;单分子蛋白数字ELISA稳定性
芯弃疾JX-8B单分子小型化ELISA检测产品,微量多重检测,微量样本就能同时测试4项指标;创新性数字ELISA优势
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测我们的方法利用了亚飞克尔反应室阵列(图1C)我们称之为单分子阵列(SiMoA)——可以分离和检测单个酶分子20-24。这种方法借鉴了Walt等人20-23的工作阵列用于研究单个酶的动力学和抑制作用。我们的目标是利用捕获和检测单个酶的能力来检测用酶标记的单个蛋白质分子。在这个单分子免疫测定的第一步(图1A),在微球(直径μm)上形成一个三明治抗体复合物,结合的复合物用酶标记,如同常规的基于微球的ELISA。当测定含有极低浓度蛋白质的样品,蛋白质的比值分子(以及由此产生的酶标记复合物)与微球的比例很小(通常小于1:1),因此含有标记免疫复合物的微球百分比遵循泊松分布,导致单个微球上存在单一免疫复合物。例如,如果在(3000个分子)的蛋白质中捕获并标记了50μM的蛋白质,并且在200,000个微球上进行标记,则珠子,然后,。无法检测到这些低数量的酶使用标准检测技术(例如,平板阅读器)的标签,因为荧光染料由每种酶生成的产物扩散到一个大卵试验体积(通常为),并进入其中需要数十万种酶标签才能产生高于该水平的荧光信号背景。 创新性数字ELISA优势