细胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛细胞固定液,室温培养30分钟,弃固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸,摇床孵育5分钟,以中和过量的多聚甲醛;(c)弃甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室温清洗5分钟;(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100细胞通透液,室温通透10分钟,弃细胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室温清洗5分钟;该产品是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。也可以应用于流式细胞仪检测上海东寰告诉您如何正确使用EdU细胞增殖检测试剂盒?浙江EdU细胞增殖检测试剂盒说明书
以及酶或荧光偶联二抗,检测单细胞水平的DNA合成(BrdUbased)。前者通过免疫荧光检测,后者通过荧光显微镜检测。优点是:使用核酸酶变性DNA,在不伤害细胞完整性的情况下使抗体结合BrdU。体内外均可进行标记,且可同时使用其他标记进行检测,操作安全简便。适用于贴壁或悬浮细胞,冰冻或福尔马林包埋组织切片。EdU与BrdU检测法不同,EdU-Click检测,如EdU-Click594(BCK-EDU594)无需进行DNA变性来检测掺入的EdU,而是通过一次快速、高度特异性的点击反应,将EdU高效地掺入到新合成的DNA之中,通过EdU与不同荧光染料的特异性反应检测DNA复制活性,从而确地反映细胞的增殖情况。这一类细胞增殖用荧光标记采用温和的点击实验方案,准确且兼容各种抗体实验方案,整个实验可在30分钟内完成,在结果的数据丰富程度方面,堪比多重分析方法。天津哪一家EdU细胞增殖检测试剂盒公司上海哪家EdU细胞增殖检测试剂盒值得信赖?
细胞增殖能力的检测是评估细胞活性、基因毒性和抗药物效果等的基本方法。公认的精确的检测细胞增殖的方法是直接检测细胞中DNA的合成。初使用的通过检测DNA合成来检测细胞增殖的方法是放射性标记核苷掺入法,如氚标记胸腺嘧啶脱氧核苷([3H]thymidine)掺入法。细胞活性的细胞增殖检测方法,能检测到细胞的总体增殖效果,但无法检测到单个的增殖细胞。这几种方法尽管都不是检测DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine掺入法。上述这些基于细胞活性或CFDASE的方法可以作为EdU法的补充性检测方法。
EdU只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内更容易扩散,不需要严格的样品变性(酸解、热解、酶解)处理,有效地避免了样品损伤,有助于在组织、的整体水平上观测细胞增殖的真实情况,具有更高的灵敏度和更快的检测速度。AdrianSalic特别强调:“与传统的免疫荧光染色不同,EdU反应能在几分钟内完成,且不需要进行严格的样品变性处理,使得组织成像更简单易行。”细胞增殖检测方法基于EdU与Apollo?荧光染料的完美结合准确检测新合成的DNA,简单,快速,准确。这种检测方法非常快速,且只需简单的几个步骤,因此也适用于高通量筛选试验,如在药物筛选中检测加药后细胞的活力。使用EdU细胞增殖检测试剂盒到底有什么好处?
EdU细胞增殖方法简单,方便,无需DNA变性,能够与各种抗体或荧光蛋白同时标记,以检测细胞其他性状特征。该方法无需DNA变性,无需抗原修复,无需抗原抗体反应,简单、灵敏、快速、准确,适合各种细胞系的细胞增殖检测,尤其适用于各种细胞系的高通量筛选实验,如在药物筛选中检测加药后细胞增殖变化。EdU方法无需DNA变性,完全适用于各种显微成像技术,在10X,20X,40X都能得到很好的成像效果。EdU细胞增殖检测方法不需要剧烈的DNA变性操作,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点EdU细胞增殖检测试剂盒的特点是什么?上海东寰告诉您。北京咨询EdU细胞增殖检测试剂盒公司
EdU细胞增殖检测试剂盒的结构如何组成?浙江EdU细胞增殖检测试剂盒说明书
本试剂盒使用便捷、兼容性好。本试剂盒只需常用的多聚甲醛固定和Triton X-100穿透,就可以使叠氮化物探针有效进入细胞并发生点击反应,不会影响细胞形态,不会影响基于抗体的免疫荧光和免疫组化检测,也不会影响DNA的荧光染色(如PI染色检测细胞周期、DAPI或Hoechst染料检测细胞核)。而BrdU法为了使大分子的BrdU抗体进入细胞并与DNA上的BrdU结合,需要对双链DNA进行变性处理(如酸变性、热变性或者DNase消化等),这种变性可能会影响细胞形态,影响后续的免疫荧光和免疫组化检测、DNA的荧光染色等。BrdU法和BeyoClick™ EdU法检测原理的比较参见图2。浙江EdU细胞增殖检测试剂盒说明书
上海东寰生物科技有限公司成立于2015-09-24,是一家专注于原代细胞,细胞增殖与凋亡,细胞检测试剂盒,动物疾病模型的****,公司位于上海市嘉定区兴贤路1180号5幢2楼206室。公司经常与行业内技术**交流学习,研发出更好的产品给用户使用。公司业务不断丰富,主要经营的业务包括:原代细胞,细胞增殖与凋亡,细胞检测试剂盒,动物疾病模型等多系列产品和服务。可以根据客户需求开发出多种不同功能的产品,深受客户的好评。公司秉承以人为本,科技创新,市场先导,和谐共赢的理念,建立一支由原代细胞,细胞增殖与凋亡,细胞检测试剂盒,动物疾病模型**组成的顾问团队,由经验丰富的技术人员组成的研发和应用团队。在市场竞争日趋激烈的现在,我们承诺保证原代细胞,细胞增殖与凋亡,细胞检测试剂盒,动物疾病模型质量和服务,再创佳绩是我们一直的追求,我们真诚的为客户提供真诚的服务,欢迎各位新老客户来我公司参观指导。