传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法需要DNA变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点,操作步骤更加快速、灵敏和准确。EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗体的1/500,在细胞内很容易扩散,无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免样品损伤,而且无需抗原抗体反应,能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性EdU细胞增殖检测试剂盒怎样使用?上海东寰告诉您。江西哪家公司提供EdU细胞增殖检测试剂盒购买
EdU法中的点击反应原理图。掺入到细胞DNA中的EdU与荧光探针或生物素等标记的叠氮化物,在铜离子的催化下发生共价反应,形成稳定的三唑环,使细胞DNA标记上荧光探针或生物素。细胞增殖检测是评估细胞活性、遗传毒性及抗药物效果等的基础实验手段。细胞增殖检测的方法按照原理通常可以分为五类:膜损伤检测、代谢活性检测、ATP水平测定、DNA合成检测和细胞荧光标记检测法。目前公认的精确的检测细胞增殖的方法是直接检测细胞中DNA的合成北京哪一家EdU细胞增殖检测试剂盒价格上海东寰告诉您EdU细胞增殖检测试剂盒的运用方式。
细胞增殖分析是细胞生长和分化研究的关键,在药物开发阶段常用来评估化学药物的毒性和对细胞生长的控制作用。通常根据平均DNA含量或细胞代谢参数进行细胞增殖检测,此类分析可以报告出总细胞数目和活细胞数目,或者测定出单个细胞内的DNA合成情况。细胞增殖染料稀释分析主要基于细胞膜通透性,荧光团分子、染料进入细胞后,将会共价结合到蛋白质上的氨基基团上,从而使染料能够长时间停留在细胞中。经过之后的细胞分裂阶段,各个子代细胞会从母细胞中接收到大约一半的荧光染料。采用流式细胞仪对荧光强度进行分析,即可测定出自标记结合起,单个细胞或细胞群所经历的传代数目。
EdU染色(a)通过用10:1去离子水稀释10x反应缓冲液进行配制1xEdU反应缓冲液;(b)按照溶解200mg缓冲添加剂溶于1ml去离子水的比例称取适量的粉末进行溶解,即为可用的缓冲添加剂的浓度,建议现用现配;注:缓冲添加剂为白色粉末,较难准确称量,称量范围可稍微放宽,但是不应超过±20%,且该粉末较易氧化,使用后请旋紧管盖,如试剂出现棕黄色,则需报废或更换。(c)按照以下的表格进行染色反应液的配制:该产品是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。也可以应用于流式细胞仪检测。EdU细胞增殖检测试剂盒使用时的注意事项。
alamarBlue®是一种快速、灵敏的细胞增殖和细胞毒性检测试剂,适用于人、动物细胞、细菌和等多种研究对象,可用于贴壁细胞和非贴壁细胞的检测。作为一种无毒、即用型的试剂,alamarBlue®为细胞增殖分析提供了一种简便、快速、安全、经济、可靠的方法。AlamarBlue®的特点与优势●使用简单方便:即用型的单组分试剂,只需加入培养基即可检测细胞的增殖状况;产生的还原产物是水溶性的,与其他常用的细胞增殖检测方法相比,不需要固定、洗涤、提取的步骤●灵活:可通过分光光度计或荧光光度计检测●性价比高:可用于高通量分析●安全:对细胞无毒、无害,不影响细胞代谢、细胞因子分泌、抗体合成等,对人体和环境也无毒无害●高灵敏:比较低可检测50个细胞EdU细胞增殖检测试剂盒运用再哪些领域?河北品质好的EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好
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