苏州小鼠疾病动物模型建模

SPF级SD雄性大鼠，体重约200～220g。使用脂多糖（LPS）诱导建立急性肺损伤模型。将大鼠放入固定盒中，用酒精檫拭大鼠尾静脉后，按压住尾静脉1/3处，注射器进针后回抽有血后注入LPS溶液（溶于生理盐水，给药剂量10mg/kg），从而建立内性急性肺损伤大鼠模型。对照组的大鼠尾静脉注射等体积的生理盐水。5.2模型鉴定及后续检测：5.2.1肺损伤后的目视观察：如下图所示，在急性肺损伤模型小鼠中，肺部有多处明显渗血，后有肉眼可见肺部大面积出血渗出，可以直观的反映肺损伤程度。欢迎致电咨询疾病动物模型建模。苏州小鼠疾病动物模型建模

卵巢早衰(pof)是指女性40岁前以闭经、不育、雌***缺乏及促性腺***水平升高为特征的一种疾病。一般人群中发病率为1％～3％，在继发性闭经妇女中占4％～8％，在20岁以前的发病率为％。近年来pof在育龄妇女中的发生率有逐年升高且向年轻化发展的趋势，由于卵巢早衰患者卵巢分泌的雌***量减少，即可导致一些其他疾病，如骨质疏松、泌尿生殖道萎缩、脂质代谢紊乱、心血管疾病。顺铂又称顺氯氨铂、氯氨铂、ddp、锡铂，是目前常用的金属铂类络合物，在分子中铂原子对其抗**作用有重要意义。但只有顺式才有意义，反式无效。其可与dna链交叉连接，显示出细胞毒作用。溶解后在体内无需载体转运，即可通过带电的细胞膜。由于细胞内氯离子浓度低(4mmol/l)，氯离子为水所取代，电荷呈阳性，具有类似烷化剂双功能基团的作用，可与细胞核内dna的碱基结合，形成三种形式的交联，造成dna损伤，破坏dna复制和转录，高浓度时也抑制rna及蛋白质的合成。顺铂具有抗*谱广、乏氧细胞有效、作用性强等优点，已普遍用于***睾丸*、卵巢*、子宫*、膀胱*、颈部*、前列腺*、脑*等，疗效***。但顺铂用于****有一定的毒性，会引起副作用，与卵巢的损害有直接关系，有研究表明顺铂可诱导卵巢细胞凋亡。小鼠疾病动物模型建模购买这类动物疾病模型是指各种疾病共同性的一些病理变化过程的模型。

人乳腺*裸鼠模型：1、实验方法：**细胞移植法、**组织块移植法。a.**细胞移植：**细胞在二氧化碳培养箱培养至足够数量。取对数生长期的**细胞，用0.25％胰酶消化，用不完全培养液配成浓度不低于1×107个/mL的细胞悬液，于小鼠乳腺脂肪垫注射0.2mL细胞悬液，注意每次注射前需混匀细胞悬液。b.**组织块移植：**接种于动物长至1cm时，取新鲜的**组织块，在不完全培养液中漂洗，切取生长良好、鱼肉装的瘤组织，将其剪切成约1.5mm直径的小**块。将动物接种部位消毒，剪一小口，将小**块经这一小口接种到小鼠乳腺脂肪垫，如切口较大需要缝合切口。

上海东寰生物科技有限公司模型特点：烟雾、空气污染物或者有害气体诱导模型使用的物质、暴露的剂量、频次和时间不尽相同；脂多糖造模时间短，可用来模拟急性加重反应，但不能反应慢性病变的过程，使动物机体内存在致敏物，然后气道局部激发（反复雾化或者滴鼻激发），诱导。模型特点：造模时的致敏激发的时间间隔、剂量和频次不尽相同，通常通常需要和其他造模方法联用。2.基因模型实验动物：α1-抗胰蛋白酶等基因敲除小鼠获得方式：直接购买模型特点：α1-抗胰蛋白酶基因敲除小鼠是经典的COPD转基因模型，更准确地理解易感基因的致病机制。生物医学研究的进展常常依赖于使用动物模型作为实验假说和临床假说二者的试验基础。

步骤i.将步骤h的吸附柱放入收集管，12000rpm离心2min。步骤j.吸附柱放到一个新的，在吸附柱膜**加入50～200μl灭菌水或者洗脱液，停留5min。(将无菌水或者洗脱液加热到65℃能够增加洗脱的得率)。步骤i.基因组dna定量，洗脱的基因组dna可以通过电泳鉴定。方法2：一种低成本基因组dna的粗提方法：步骤a.每只小鼠剪下一段尾巴(2-5mm)，放入离心管中，加入100μl尾部消化缓冲液，注意不要剪尾太长；步骤b.将离心管及其内容物于56℃孵育过夜；步骤c.过夜后将离心管于98℃孵育13min，使蛋白酶k失活；步骤d.在微型离心机以**大转速旋转15min，上清直接用于pcr体系(每50μlpcr体系加入上清2μl)。尾消化缓冲液成分：50mmkcl10mmtris-hcl()％tritonx-100(b)长链pcr反应：长链引物：pcrprimers1(℃):扩增片段：5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):扩增片段：3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’pirb基因敲除型有上述两条扩增片段，野生型等位基因没有扩增产物。疾病动物模型建模有加些方式？苏州小鼠疾病动物模型建模

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急性肺损伤模型大鼠(右)与对照组大鼠肺部照片对比5.2.2肺的湿/干重比检测：肺的湿/干重比是反应肺水肿的直接指标，也是反应肺损伤严重程度的敏感指标。在急性肺损伤发生后，大量液体渗出至肺泡和肺间质，导致肺的重量增大，而肺的干重则不受影响。处死大鼠、剪断气管后取全肺，称湿重，然后将肺置于65℃恒温箱中干燥，24h后取出称干重，计算肺湿/干重比值。图7.急性肺损伤模型大鼠(ALI)与对照组大鼠肺干湿重比随不同时间点的变化。5.2.3肺泡盥洗液（BALF）中细胞计数：小鼠取血后，开胸，分离纵膈，注射器抽取3ml生理盐水从气管插管推入肺中，每次反复灌洗3次后抽出灌洗液，肺泡灌洗液以4℃3000r/min离心15min，取上清，保存于-80度用于后续检测。苏州小鼠疾病动物模型建模