模型小鼠与对照小鼠BALF中各类细胞因子的表达水平对比6.2.2肺组织病理学检测HE染色检测:待造模完成后,腹腔麻醉小鼠后,开胸暴露胸腔:取左侧肺叶固定于10%甲醛溶液24h,常规脱水石蜡包埋,切片行HE染色,光镜下观察。结果显示:空白对照组小鼠肺泡结构清晰,肺泡大小均匀,气道黏膜上皮结构完整,纤毛排列整齐;模型对照组小鼠肺组织肺间隔增厚,支气管部分上皮细胞脱落,有淋巴细胞浸润。模型小鼠(右)相对于对照组小鼠肺部组织HE染色对比阿尔辛蓝—过碘酸雪夫氏染色(AB-PAS染色)检测:待造模完成后,腹腔麻醉小鼠后,开胸暴露胸腔:取左侧肺叶固定于10%甲醛溶液24h,常规脱水石蜡包埋脱蜡至水,切片行AB-PAS染色,光镜下观察。避免了在人身上进行实验所带来的风险。无锡哪家公司提供疾病动物模型建模
急性肺损伤模型大鼠(右)与对照组大鼠肺部照片对比5.2.2肺的湿/干重比检测:肺的湿/干重比是反应肺水肿的直接指标,也是反应肺损伤严重程度的敏感指标。在急性肺损伤发生后,大量液体渗出至肺泡和肺间质,导致肺的重量增大,而肺的干重则不受影响。处死大鼠、剪断气管后取全肺,称湿重,然后将肺置于65℃恒温箱中干燥,24h后取出称干重,计算肺湿/干重比值。图7.急性肺损伤模型大鼠(ALI)与对照组大鼠肺干湿重比随不同时间点的变化。5.2.3肺泡盥洗液(BALF)中细胞计数:小鼠取血后,开胸,分离纵膈,注射器抽取3ml生理盐水从气管插管推入肺中,每次反复灌洗3次后抽出灌洗液,肺泡灌洗液以4℃3000r/min离心15min,取上清,保存于-80度用于后续检测。青浦区大鼠疾病动物模型建模上海东寰提供动物模型构建过程中的原始实验记录及数据图片。
pirb-cki)pirb基因敲入的小鼠,pirb基因敲入到特异性组织或细胞中。其中pirb-cwt小鼠表达cre,但不含有loxp-pirb等位基因,pirb-chetandpirb-cki小鼠表达cre并分别含有一个或者两个loxp-pirb等位基因。其中f3代杂交小鼠纯合子/杂合子鉴定所用的pcr引物如下:f3:5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’r3:5’-atactccgaggcggatcacaa-3’f5:5’-gcatctgacttctggctaataaag-3’homozygotes:644bpheterozygotes:644bp/453bpwildtypeallele:453bp组织特异性的基因敲入也可以通过加入另一对引物,用pcr来验证:pcrforconstitutivekiallele:f6:5’-ggcaacgtgctggttattgtg-3’r6:5’-ggctgtactctgaggataggcttag-3’f7:5’-agatctgcaagctaattcctgc-3’withcki:1180bp/215bpconstitutivekiallele:303bp注意:如果dna的样本不够纯,或者pcr的延伸时间不够长,可能扩增不出来1180bp的产物。cre阳性pcr鉴定所需的引物如下:forward:5’-gaacgcactgatttcgacca-3’reverse:5’-gctaaccagcgttttcgttc-3’creamplicon:204bp。序列表西安医学院pirb基因敲入的小鼠动物模型及其构建方法(artificialsequence)1ggcaggcttaaaggctaacctgg23223dna人工序列。
动物模型的优越性主要表现在以下几下方面。(一)避免了在人身上进行实验所带来的风险临床上对外伤、中毒、肿痛病因等研究是有一定困难的,甚至是不可能的,如急性和慢性呼吸系统疾病研究进很难重复环境污染的作用。辐射对机体的损伤也不可能在人身上反复实验。而动物可以作为人类的替难者,在人为设计的实验条件下反复观察和研究。因此,应用动物模型,除了能克服在人类研究中经常会遇到的理论和社会限制外,还容许采用某些不能应用于人类的方法学途径,甚至为了研究需要可以损伤动物组织、或处死动物。(二)临床上平时不易见到的疾病可用动物随时复制出来临床上平时很难收集到放射病、毒气中毒、烈性传染病等病人,而实验室可以根据研究目的要求随时采用实验性诱发的方法在动物身上复制出来。模型应适用于多数研究者使用,容易复制,实验中便于操作和采集各种标本。
随着大气污染、吸烟、工业经济发展导致的理化因子增多以及人口年龄老化等因素,呼吸系统疾病近年来有明显增长的趋势。由于呼吸疾病涉及的较多,包括气管、支气管及肺部等,单以肺部为例,所涉疾病就包括肺阻塞、肺纤维化、肺气肿、等,下面,武汉云克隆将以大鼠/小鼠为模式动物,介绍几种常见的肺部疾病动物模型。4.特发性肺纤维化特发性肺纤维化(Idiopathicpulmonaryfibrosis,IPF)为不明原因引起的成人慢性、进展性、纤维化性间质性肺炎。4.1建模方法:SPF级C57/BL6雌性小鼠,体重约18~20g。使用气管滴注博来霉素法建模。可以克服人类某些疾病潜伏期长,病程长和发病率低的缺点。上海生殖疾病动物模型建模
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本能发明的另一目的是公开了如上所述的方法制备的鼠慢性背根神经压迫模型的用途是将该模型用于腰椎间盘突出***方法研究和/或影像学检测研究。进一步地,该模型用于与磁性相关的***和/或检测方面的研究,比如经颅磁刺激和核磁共振。本发明利用压迫元件插入腰椎椎间孔,模拟腰椎间盘突出后突出物对神经根的持续慢性的机械压迫症状,有益效果有:1.应用机械压迫神经根模拟腰椎间盘突出病理,症状的病因学与临床情况接近;2.相关的疼痛行为类似于特定的慢性疼痛症状,且易于客观测量;3.制备方法简单,对动物损伤小,稳定性好,成功率高;4.造模关键材料压迫元件不受磁场干扰,无在磁场作用下移位风险,有利于后续对动物进行磁疗,经颅磁刺激等***及核磁共振等检查;5.造模关键材料压迫元件不影响磁场,不会对***仪器和核磁共振等仪器产生不良影响;6.此方法获得的模型由于采用了h62黄铜或聚乳酸材料制备的压迫元件,使得研究方法与检测方法不受磁场作用限制,丰富了腰椎间盘突出临床前研究的***方法及影像学检测,为临床研究提供理论依据。以下将结合附图对本发明作进一步说明,以充分说明本发明的目的、技术特征和技术效果。附图说明图1是压迫元件插入椎间孔的结构示意图。无锡哪家公司提供疾病动物模型建模