0.25%胰酶是细胞生物学中常用的一种生物试剂,下面汇总一下胰酶使用过程中常见的一些问题。胰酶的使用浓度是多少?胰酶浓度:常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作为消化液。为什么收到的胰酶会有颜色差异?商品化胰酶溶液需要用干冰运输,在运输过程中,胰酶溶液中的二氧化碳与干冰挥发的二氧化碳可能会极少部分的气体交换,导致溶液PH的漂移。有些胰酶溶液里含有酚红作为PH值指示剂,因此胰酶PH的变化是肉眼可观察到的。由干冰运输过程中导致的PH值的变化很小,PH值会从7.2-8.0变化到了6.8左右,在PH值7.2-8.0的时候,溶液呈淡红色;PH值6.8左右时呈淡黄色。因此胰酶颜色的变化是由PH值的变化引起,归因于使用干冰运输。这种颜色的变化是行业普遍现象,在不同供应商的胰酶产品都会出现。胰酶的使用浓度是多少?天津EDTA胰酶价格查询
1、胰酶是,就是说PBS,注意,尽量不要用水来溶,因为要保持渗透压。2、EDTA的工作液溶度是-,根据细胞消化的难易程度自己调整。EDTA并不是必须的,容易消化的细胞可不加。EDTA对细胞贴壁性有影响,因此使用时要甚重。如果影响贴壁,但消化时必须要用,那么在用完全培养基终止消化后,可离心弃上清,再加完全培养基培养,可去除EDTA。如果对贴壁没影响,那么可不离心。3、EDTA的浓度也是质量体积比。和胰酶一起溶于PBS。4、注意,血清可终止胰酶的作用,但不能终止EDTA的作用,对有些细胞来说,终止消化后的离心是必要的。5、胰酶和EDTA在pH为8左右的时候**易溶解,在配制时可先滴几滴NaOH将pH调至8,注意,胰酶可使溶液变酸,所以要边溶边测pH,随时调整。注意,不可加过量NaOH,否则过碱,细胞会受不了。6、胰酶EDTA相对比较难溶,可用磁力搅拌器,或放入4度冰箱过夜,待溶解后过滤**。7、可配2-3乘的胰酶,这样比较节约时间和滤器,用的时候对上**PBS即可。8、储存液放在-20度冰箱冻存,使用液放在4度,用的时候不要放在27度水浴锅温浴,因为这样会让胰酶很快失效,使用前放在室温下一会。上海重组胰酶价格查询消化同种细胞时含EDTA的胰酶消化时间会比不含EDTA时间短。
胰蛋白酶**初在牛的胰腺中被发现,现在已经扩展到多种来源,包括哺乳动物(人、牛、猪和狗)、无脊椎动物和微生物等。胰蛋白酶的商业化生产主要依赖哺乳动物的胰腺组织提取或者重组表达提取。直接从哺乳动物胰腺组织中提取的缺点是生产成本高,易造成其他结构相近的蛋白污染。重组表达提取胰蛋白酶可以缩短提取时间、降低生产成本,提取的蛋白纯度高,通过优化重组表达体系可以提高蛋白的表达量,这些优势为其在医疗、食品等行业中的应用提供了更多的可能性。[1]折叠
细胞培养胰蛋白酶生物制品简介中文名称:胰蛋白酶中文同义词:胰蛋白酶;胰蛋白酶1:250(猪胰脏);胰蛋白酶1:300(猪胰脏);胰淀粉酶;胰液酵素;胰酶-EDTA溶液;胰蛋白酶1:250;蛋白酶类英文名称:Trypsin英文同义词:TRYPSIN;TRYPSIN,1-250;TRYPSIN,1-300;TRYPSIN-EDTA;TRYPSIN,HUMANPANCREAS;TRYPSINPORCINE;TRYPSIN,PORCINEPANCREAS;CAS号:9002-07-7分子式:C6H15O12P3分子量:≈24000EINECS号:232-650-8胰蛋白酶物化性质胰蛋白酶是从牛、猪、羊的胰脏提取,纯化获得的结晶,再制成的冻干制剂。易溶于水,不溶于三氯甲烷、乙醇、**等有机溶剂。在,短时间煮沸几乎不失活;在碱溶液中加热则变性沉淀,Ca2+有保护和***作用,胰蛋白酶的等电点为。牛胰蛋白酶原有229个氨基酸组成,含6对二硫键,其氨基酸排列顺序和晶体结构已被阐明。在肠激酶活自身催化下,酶原的N末端赖氨酸与异亮氨酸残基之间的肽键被水解,释放出来缬-天-天-天-天-赖6肽,生成有活性的胰蛋白酶。牛的胰蛋白酶氨基酸残基223个,分子量23800[2],活性部位的丝氨酸残基是不可缺少的丝氨酸蛋白酶。猪胰蛋白酶的化学结构与牛胰蛋白酶十分相似,在氨基酸残基排列顺序中,只有41个氨基酸残基不同。胰蛋白酶水解或胰蛋白酶化是蛋白质被胰蛋白酶消化或处理的过程,因此被称为胰蛋白酶化。
胰蛋白酶是一种肽链内切酶,属于丝氨酸蛋白酶家族,不仅可以水解碱性氨基酸(精氨酸或赖氨酸)羧基端的肽键,还可以水解由碱性氨基酸的羧基形成的酰胺键或酯键。胰蛋白酶可以从牛、猪等哺乳动物的胰脏提取,经过纯化后获得结晶,再制成冻干制剂。牛的胰蛋白酶有223个氨基酸,分子量为23800道尔顿,活性部位的丝氨酸残基是不可缺少的丝氨酸蛋白酶。胰蛋白酶溶于水,不溶于乙醇、甘油和三氯甲烷等有机溶剂。胰蛋白酶的等电点pH值为10.1,**适pH值范围在7.8~8.5左右,pH值大于9.0时不可逆失活。钙离子对胰蛋白酶的酶活具有保护和***作用。[1]胰酶使用的时候要注意什么?天津EDTA胰酶价格查询
胰蛋白酶溶液用于组织和单层细胞的解离。天津EDTA胰酶价格查询
胰蛋白酶广泛应用于食品加工、制药、生化检测和制革等多种行业。在制药工业中,胰蛋白酶可使天然蛋白、变性蛋白、纤维蛋白和黏蛋白等水解为多肽或氨基酸,以达到***的目的。胰蛋白酶生物药用于***呼吸道疾病,可以溶解黏痰和脓性痰,还可以***毒蛇咬伤等。由于血清中含有非特异性抑肽酶,故胰蛋白酶不会消化正常组织,而能分解脓性痰等黏性分泌物,促进***、化疗药物向病灶渗透。在食品工业中,胰蛋白酶主要用于水解价值较高的动植物性蛋白等,以牛乳为例,利用胰蛋白酶水解其中的酪蛋白、α-乳白蛋白和β-乳球蛋白等致敏原,能生产低敏配方奶粉。在制革工业中,胰蛋白酶用于皮革脱灰软化,也可以利用胰蛋白酶提取具有良好生物相容性和生物降解性的胶原蛋白。[1]天津EDTA胰酶价格查询