生化实验中加入缓冲液的目的和作用生物缓冲液是一种能够保持pH值不受酸碱度影响的溶液,多种细胞只能在很小的PH范围内活动,需要有缓冲体系来维持整个过程不受干扰。尤其是在生化实验中,生物缓冲液极其受重视,因为实验中的各类物质非常容易使PH发生变化,而这就直接影响到整体工作进程。例如在酶活性实验中,有时因为PH的变化大,会使酶活性下降甚至失活,导致实验无法进行下去,所以在生化实验中加入缓冲液的主要目的就是维持PH的稳定。常用作缓冲溶液的酸类由弱酸及其共轭酸盐组合成的溶液具有缓冲作用。浙江HBSS缓冲液哪家便宜
三、缓冲液使用中的注意事项在实际工作中有些分析人员由于不大了解缓冲溶液的作用机理,当所配制和使用的缓冲溶液与规定的数值不相符时,为使缓冲溶液达到要求,就用盐酸或氢氧化钠等强酸、强碱进行调节,以为这样做可以使缓冲溶液尽快达到所需要的pH值,然而,结果却适得其反,这样的溶液pH值虽然调对了,可是它的缓冲体系却被破坏了,作用也就失去了,缓冲溶液一般都是由弱酸及其弱酸盐或是弱碱及其弱碱盐组成的一对共轭体。使用缓冲溶液的注意事项:不少缓冲溶液都含有易挥发组分,如,氨-氯化铵中的氨酷酸-醋酸钠中的醋酸。现在,不少实验室引入了定量加液器,用定量加液器加试剂,具有简便准确误差恒定的特点,特别是在做成批样品时更显出它的优越性,不少同志也喜欢用它来加缓冲液,但是,应注意缓冲液不能长久存放在定量加液器中,因该器皿不密闭,易造成氨的挥发(醋酸-醋酸钠缓冲液中的醋酸也同理),从而,导致溶液失效,正确的做法是缓冲液应适量配制,使用后及时密闭并置于低温中保存。江苏无酚红缓冲液代理商生化实验中加入缓冲液的目的和作用。
PBS溶液又称磷酸盐缓冲溶液,一般选择Na2HPO4和KH2PO4配制,因为钠盐溶解的较慢。根据不同pH的溶液,称量不同质量的磷酸盐,也可以用pH计调溶液的pH。PBS一般用作支持电解质。
配置方法播报编辑采用去离子水、KH2PO4和Na2HPO4·2H2O配制PBS溶液,按以下步骤进行:(1) 配制1/15mol/L KH2PO4,即每升水中溶解9.078克KH2PO4;(2) 配制1/15mol/LNa2HPO4·2H2O,即每升水中溶解11.876克Na2HPO4·2H2O;(3) 将18.2%(体积分数)KH2PO4溶液和81.8%Na2HPO4·2H2O混合;
缓冲液浓度和温度的影响浓度影响:缓冲液的浓度会影响其缓冲能力。浓度过高或过低都可能影响实验结果。因此,需要根据实验需求精确计算缓冲液的浓度,以确保其既能有效维持pH稳定,又不会对实验造成干扰。温度影响:温度的变化也会影响缓冲液的pH值。例如,Tris缓冲液的温度效应大,温度变化会导致pH值的变化,因此在配制和使用时需要考虑温度的影响。6综上所述,缓冲液在酶活性实验中扮演着至关重要的角色,它不仅为酶提供了一个**适的pH环境,还通过其抗酸抗碱能力维持实验环境的稳定。选择合适的缓冲液、控制其浓度和温度是确保酶活性实验准确性的关键。PBS溶液一般指磷酸缓冲盐溶液,不可以喝。
在缓冲溶液中加入少量强酸或强碱,其溶液pH值变化不大,但若加入酸,碱的量多时,缓冲溶液就失去了它的缓冲作用。这说明它的缓冲能力是有一定限度的。缓冲溶液的缓冲能力与组成缓冲溶液的组分浓度有关。0.1mol.L-1HAc和0.1mol.L-1NaAc组成的缓冲溶液,比0.01mol.L-1HAc和0.01mol.L-1NaAc的缓冲溶液缓冲能力大。关于这一点通过计算便可证实。但缓冲溶液组分的浓度不能太大,否则,不能忽视离子间的作用。组成缓冲溶液的两组分的比值不为1∶1时,缓冲作用减小,缓冲能力降低,当c(盐)/c(酸)为1∶1时△pH**小,缓冲能力大。不论对于酸或碱都有较大的缓冲作用。缓冲溶液的pH值可用下式计算:此时缓冲能力大。缓冲组分的比值离1∶1愈远,缓冲能力愈小,甚至不能起缓冲作用。对于任何缓冲体系,存在有效缓冲范围,这个范围大致在pKaφ(或pKbφ)两侧各一个pH单位之内。弱酸及其盐(弱酸及其共轭碱)体系pH=pKaφ±1弱碱及其盐(弱碱及其共轭酸)体系pOH=pKbφ±1例如HAc的pKaφ为4.76,所以用HAc和NaAc适宜于配制pH为3.76~5.76的缓冲溶液,在这个范围内有较大的缓冲作用。配制pH=4.76的缓冲溶液时缓冲能力比较大,此时(c(HAc)/c(NaAc)=1。磷酸缓冲盐溶液一般作为溶剂,起到溶解保护试剂的作用。浙江HBSS缓冲液哪家便宜
缓冲溶液的作用是在有限的范围内调整溶液的pH值,使待测溶液的酸度符合分析方法所规定的范围。浙江HBSS缓冲液哪家便宜
ph值缓冲液常用三种
pH酸碱度常用的三种标准溶液:pH分别为4.0、7.0和10.0。标准缓冲液(应选择与供试液pH值接近的标准缓冲液),目前标准溶液有7种,在我国一般使用以下3种溶液:(pH值在25℃时)。1.邻苯二甲酸氢钾(KHC8H4O4)pH4.003;0.05M。2.混合磷酸盐(Na2HPO4):磷酸二氢钾和磷酸氢二钠混合盐溶液pH6.864;0.025M3.硼砂(Na2B4O7·l0H2O)pH9.182;0.01M。三种标准缓冲液的配置方法:1.pH4,邻苯二甲酸氢钾标准缓冲液:精密称取在115±5℃干燥2~3小时的邻苯二甲酸氢钾[KHC8H4O4]10.12g,加水使溶解并稀释至1000ml。2.pH7,磷酸盐标准缓冲液(pH7.4):精密称取在115±5℃干燥2~3小时的无水磷酸氢二钠4.303g与磷酸二氢钾1.179g,加水使溶解并稀释至1000ml。3.pH9,硼砂标准缓冲液:精密称取硼砂[Na2B4O7·10H2O]3.80g(注意:避免风化),加水使溶解并稀释至1000ml,置聚乙烯塑料瓶中,密塞,避免与空气中二氧化碳接触。 浙江HBSS缓冲液哪家便宜