HBSS缓冲液答疑解惑

做ELISA确定抗原**佳包被浓度，做方阵滴定具体怎么做呢？选择好一份已知为阳性和阴性背景的标本，将你的抗原用1*CBPH=*PBPH=（8个条件）后加入96孔板每孔100ul。（一般包被浓度100ng抗原或抗体/孔，**优包被条件需进行试验选择）4度过夜取出后甩干，加入20%NBS封闭每孔200ul。37度2h热封，甩去后拍干即可。将你HRP或AP标记的抗原或二抗用酶标稀释液进行稀释（倍比稀释4个梯度）即可。棋盘滴定就是板酶交叉,同时带上阳性、阴性通过试验确定**佳P/N的包被搭配E的试验2．抗原和抗体**佳工作浓度的确定?抗原抗体反应要求在**适比例条件下进行，ELISA反应试剂多，其工作浓度不同对结果影响较大，因此必须对包被抗原(抗体)和酶标抗体(抗原)进行**佳工作浓度的滴定和选择，以达到**佳的测定条件。?1）方阵(棋盘)滴定法选择包被抗原的工作浓度用包被液将抗原作一系列稀释。在生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系,因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值。HBSS缓冲液答疑解惑

    2.配制方法：将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇（24:1）混合均匀后，移入棕色玻璃瓶中4℃保存。10%(W/V)SDS组份浓度：10%(W/V)SDS配制量：100ml配制方法：1.称量10g高纯度的SDS置于100-200ml烧杯中，加入约80ml的去离子水，68℃加入溶解2.滴加浓盐酸调节pH值至3.将溶液定容至100ml后，室温保存。2NNaOH组份浓度：2NNaOH配制量：100ml配制方法：1.量取80ml去离子水置于100～200ml塑料烧杯中（NaOH溶解过程中大量放热，有可能使玻璃烧杯炸裂)。2.称取8gNaOH小心地逐渐加入到烧杯中，边加边搅拌。3.待NaOH完全溶解后，用去离子水将溶液体积定容至100ml。4.将溶液转移至塑料容器中后，室温保存。NHCl组份浓度：NHCl配制量：100ml配制方法：1.在ml的去离子水中加入ml的浓盐酸（N)，均匀混合。2.室温保存。5MNaCl组份浓度：5MNaCl配制量：1L配制方法：1.称取gNaCl置于1L烧杯中，加入约800ml的去离子水后搅拌溶解。2.加去离子水将溶液定容至1L后，适量分成小份。3.高温高压**后，4℃保存。20%(W/V)Glucose组份浓度：20%(W/V)Glucose配制量：100ml配制方法：1.称取20gGlucose置于100～200ml烧杯中，加入约80ml的去离子水后，搅拌溶解。2.加去离子水将溶液定容至100ml。北京无酚红缓冲液价目表缓冲液是一种能在加入少量酸或碱时抵抗pH改变的溶液。

在前面提到，将等式同时取对数，并简化就可以得到： 或者这就是Henderson-Hasselbalch方程。值得注意的是，式子中酸及其共轭碱的浓度都是平衡时的浓度，除了酸性过于强的情况下，由于同离子效应的存在，一般都可用此式计算，根据此式可得出下列几点结论：1 缓冲液的pH值与该酸的电离平衡常数Ka及盐和酸的浓度有关。弱酸的pKa值衡定，但酸和盐的比例不同时，就会得到不同的pH值。酸和盐浓度相等时，溶液的pH值与PKa值相同。2 酸和盐浓度等比例增减时，溶液的pH值不变。3 酸和盐浓度相等时，缓冲液的缓冲效率为比较高，比例相差越大，缓冲效率越低，缓冲液的一般有效缓冲范围为pH=pKa±1,pOH=pKb±1。 [1]

PH计校正的标准缓冲液有几种？

ph计校正常用的三种标准溶液：pH分别为4.0、7.0和10.0一般4.0的可以用邻苯二甲酸氢钾体系配制，7.0的用磷酸二氢钾-磷酸氢二钠体系配制，10.0的用碳酸钠-碳酸氢钠体系配制，可以根据需要的缓冲容量确定浓度。校正pH计所用工具和原料：标准缓冲液（应选择与供试液pH值接近的标准缓冲液），目前标准溶液有7种，在我国一般使用以下3种溶液：(pH值在25℃时)1)邻苯二甲酸氢钾(KHC8H4O4)pH4.003；0.05M2)混合磷酸盐(Na2HPO4)：磷酸二氢钾和磷酸氢二钠混合盐溶液pH6.864；0.025M3)硼砂(Na2B4O7·l0H2O)pH9.182；0.01M PBS缓冲液中的磷酸盐和盐水可以维持实验体系的离子强度稳定。

pH标准液如何正确使用及其主要作用（二）

pH标准液的主要作用是什么？  1、pH测量前标定校准pH计   2、用以检定pH计的准确性，将pH电极插入pH9.18溶液中，检查仪器显示值和标准溶液的pHs值是否一致；   3、在一般精度测量时检查pH计是否需要重新标定。pH计标定并使用后也许会产生漂移或变化，因此在测试前将电极插入与被测溶液比较接近的标准缓冲液中，根据误差大小确定是否需要重新标定。   4、检测pH电极的性能。 在生物体中有三种主要的pH缓冲体系.四川PBS缓冲液报价

为了避免PBS缓冲液对人体的负面影响,建议使用时遵循正确的使用方法和容器规格,避免长时间或过量使用。HBSS缓冲液答疑解惑

一、为什么缓冲溶液可以维持PH值的稳定呢？其实这主要是因为缓冲溶液自身的成分和性能，它的成分里包含了酸、盐或碱，所以在一定程度上可以抵消外界加入酸性或碱性溶液带来的影响。二、配制缓冲溶液作用有哪些？1、缓冲溶液是分析检测实验中常会用到的溶液，实验中通常会要求溶液的pH值需要保持在一个规定的范围内，以保证指示剂的显色或变色，这些通过加入一定量的缓冲溶液就能达到目的。2、缓冲溶液在医学检验中也起着很重要的作用，主要是因为缓冲溶液可以保持机体正常血液PH范围，其中碳酸-碳酸氢钠是血液中主要的缓冲对，这与肺呼吸以及肾功能排泄息息相关。而机体正常新陈代谢后产生的CO2，会进入血液与水结合成碳酸,碳酸又与血浆中的碳酸氢根离子组成共轭酸碱对，所以缓冲溶液在医学上就有不可忽视的作用。HBSS缓冲液答疑解惑