一)、实验室种子培养基**方法1、高压蒸汽**锅、手提式**锅。容量小。2、立式或卧式**锅。容量较大,一般能装几十瓶或几百瓶。3、**柜。要和蒸汽锅炉配套,用于大量种瓶培养基的**,一次能装几百至几千瓶(袋)。(二)、培养基的分批**1、定义:将配制好的培养基输入发酵罐中,用蒸汽加热,使培养基和设备同时**的一种**方式,又称实罐**。2、**过程过程包括升温、保温和冷却等三个阶段,各阶段对**的贡献:20%、75%、5%。培养基的升温可由两种方式实现:间接加热,在夹套或蛇管中通入蒸汽加热;直接加热,在培养基中直接通入热蒸汽加热。**过程中加热和保温阶段的**作用是主要的,而冷却阶段的**作用是次要的,一般很小,可以忽略不计。此外,还应指出的是,应当避免长时间的加热阶段,因为加热时间过长,不仅破坏营养物质,而且也有可能引起培养液中某些有害物质的生成,从而影响培养过程的顺利进行。在实际生产中,也可能遇到所供蒸汽不足、温度不够高的情况,这时可以适当延长**时间。生产上甚至有用100℃蒸煮而达到彻底**的实例。如要做固体曲而没有高温蒸汽时,可将原料用100蒸汽蒸30min,杀死其中的营养细胞,但孢子与**的芽孢没有被杀死。F12培养基能够支持细胞的持续分裂。西藏DMEM/F12培养基市场报价
留点温度计标化合格后方可用于验证试验。检测前,需将温度计的**柱甩至40℃以下。每次监测后留点温度计的温差应存l℃之间,则说明**器内的温度分布是均匀的。**后的菌片应在严格无菌操作条件下放入**后的溴甲酚紫胨水培养基内56-60℃培养24-48小时,观察颜色变化。如培养基变为黄色,说明菌片中的嗜热脂肪芽胞杆菌尚未完全灭活,**仍可在培养基中生长,分解葡萄糖产酸变为黄色。如培养基颜色不变化仍为紫色,则说明芽胞已灭活。同时要用未经**的纸片放入培养基内作为阳性对照,不加纸片的空白培养基作为阴性对照。化学指示卡上的指示色块,在高压蒸气**时,由淡黄色变为黑色。随着颜色变化的深浅,并与对照色相比,可判断**效果是否达到要求。化学指示卡应在干燥处保存。遇潮会变色,影响**效果的观测。高压蒸气**必须使蒸气顺利进入**器内,与**物品接触,并将原有的冷空气排出方可达到**的效果。要进行空载热分布和满载热穿透力验证(满载时不超过总体积的2/3)。二种验证各重复三次,共做六次。5个点六次试验表明温度均在121℃,化学指示卡变黑;程度与对照色一致;培养基均未改变颜色,说明高压蒸气**效果合格。高压**器属于强检仪器,但强检只是对仪器物理参数的考核。湖南MEM a培养基哪个好MEM培养基含有多种必需的营养成分和矿物质。
生产上一般采用冷水喷淋冷却,冷却到40-50℃后,输送到预先已经**过的罐内。(四)、间歇**与连续**的比较1、歇**的***和缺点***是设备要求低,不需另外设置加热、冷却装置;操作要求低,适于手动操作,适合于小批量生产规模;适合于含有大量固体物质的培养基的**。缺点是培养基的营养物质损失较多,**后培养基的质量下降;需进行反复的加热和冷却,能耗较高;不适合于大规模生产过程的**;发酵罐的利用率较低。2、连续**的***和缺点***是**温度高,可减少培养基中营养物质的损失;操作条件恒定,**质量稳定;易于实现管道化和自控操作;避免了复的加热和冷却,提高了热的利用率;发酵设备利用率高。缺点是对设备的要求高,需另外设置加热、冷却装置;操作较麻烦;染菌的机会较多;不适合于含大量固体物料的**;对蒸汽的要求高。由此可见,无论在理论上或者在实践上,与间歇**过程相比,连续**的***十分明显。因此,连续**越来越多地被用培养基的**。
1/2cs生长培养基的培养结果为:马铃薯茎端在1/2cs生长培养基上的存活率为100%,培养16d的幼苗,表现为植株健壮、平均茎高、平均茎中粗为,叶色浓绿,根系发达、平均根数为8个。如图4所示。对比培养例4:将1/2cs基本培养基替换为1/2ms基本培养基,其余完全同培养实例4,1/2ms基本培养基的成分及用量如表1所示。1/2ms生长培养基的培养结果为:马铃薯茎端在1/2ms生长培养基上的存活率为100%,培养16d的幼苗,表现为植株健壮、平均茎高、平均茎中粗为,叶色浓绿,根系发达、平均根数为6个。如图4所示。培养实例4和对比培养例4的培养结果比较:马铃薯茎端在1/2cs生长培养基和1/2ms生长培养基上的存活率均为100%;在相同条件下培养16d时,与1/2ms生长培养基相比,1/2cs生长培养基中的幼苗长势更佳,其茎高、茎中粗、根的数量均优于1/2ms生长培养基。如图4所示。培养实例5:哥伦比亚型拟南芥叶片及根愈伤**诱导(1)拟南芥叶片愈伤**诱导培养基:cs基本培养基+,用超纯水溶解,。cs基本培养基的成分及用量如表1所示。(2)拟南芥根愈伤**诱导培养基:cs基本培养基+2,,用超纯水溶解,。cs基本培养基的成分及用量如表1所示。。MEM培养基在细胞生物学研究中的基础培养基之一。
SLM)低血清培养基添加1%小牛血清在转瓶中培养CHO细胞生产EOP,可提高收液次数,每次收液表达量明显提高。概述无血清培养基是用来在无血清条件下生长特殊类型的细胞或进行专门应用的培养基。一般是由基础培养基和替代血清的补充因子组成。无血清培养基中没有添加血清,但含有个别蛋白或大量蛋白组分。无血清培养基与无蛋白培养基的区别在于培养基中没有添加蛋白,但含有一些动物或植物来源成分,如低分子量肽的水解物。还有一种化学限定培养基,培养基中不含有蛋白、水解产物或未知结构的组分,所有成分均有已知的化学结构。***:1)未知组分少;2)培养基中不存在血清中的抗体、补体等成分,对培养细胞影响小;3)杂蛋白含量少,生产的产品后期处理较容易,例如*苗生产由于人用*苗需要纯化减少杂蛋白,纯化过程中成本消耗很大,*苗的损失也很大;4)无血清培养既可以实现细胞的大规模悬浮培养,增加培养液的利用率,可以采用发酵罐培养减少了人力消耗。缺点:目前为止不是所有的细胞都能在无血清培养基中培养。无血清培养基的某些组分价格昂贵,导致无血清无法工业推广的主要原因。MEM培养基在细胞实验中表现出高效的稳定性。福建MEM培养基进口
DMEM培养基在实验室中广泛应用于细胞实验。西藏DMEM/F12培养基市场报价
人工合成培养基使用时还需添加一定量的血清使细胞生长和繁殖。组成及作用氨基酸:组成蛋白质的基本单位。不同的细胞对氨基酸的需求各异,但几种必需氨基酸细胞自身不能合成,必须依靠培养液提供,如组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、半胱氨酸、酪氨酸等。其余非必需氨基酸,细胞可以自己合成,或通过转氨作用由其他物质转化而来。绝大部分细胞对谷氨酰胺有较高的要求,因为谷氨酰胺是作为能源及碳源物质同时被细胞利用,是是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺时,细胞生长不良而死亡,所以各种培养液中都含有较多的谷氨酰胺。细胞所能利用的氨基酸是L型同分异构体,D型氨基酸不能被利用。维生素:维持细胞生长的一种生物活性物质,对细胞代谢有重大作用。它们在细胞中大多形成酶的辅基或辅酶,没有它们,酶便没有活性,代谢活动将无法进行。维生素分为水溶和脂溶两大类,的培养液中直接采用ATP和辅酶A。葡萄糖:大部分培养基都以葡萄糖作为能量来源之一。无机盐:维持培养基渗透压平衡,参与细胞的代谢活动。主要有Na+、K+、Ca2+、Mg2+等。Na+是细胞外液中**主要的阳离子,对维持渗透压的恒定有决定性的作用。西藏DMEM/F12培养基市场报价