无芽孢:E=209—250*103J/mol。显然,(5)式的比值〉1,说明提高温度对于第二个平行反应,即菌体死亡的反应是有利的。提高温度,虽然两个平行性反应的反应速度常数都提高了,但是,达到同样的**效果,所需要的时间却缩短了,由于***个反应也就是营养成分破坏的反应速度常速增加的少,因此,有利于减少培养基在**过程中营养成分的破坏。换言之,高温短时**对于培养基营养成分是有利的。通常所说的高温短时**可以提高生产效益,其理论根据就在于此。结论1:当**温度上升时,微生物杀死速率的提高要超过培养基成分的破坏速率的增加。要减少营养成分的破坏,可升高温度**。结论2:在**时选择较高的温度、较短的时间,这样便既可达到需要的**程度,同时又可减少营养物质的损失。(二)、影响**效果的因素(1)微生物种类:不同的微生物k值不同。(2)初始菌量:在保持N值不变的前提下,t与初始菌量N0的对数成正比。(3)培养基成份:油脂、蛋白质增加微生物的耐热性。(4)传热与混合状况:影响受热均匀度。(5)培养基中固体颗粒的存在影响热穿透。(6)蒸汽中空气的存在降低蒸汽分压和**温度。(7)pH:酸性pH下可加快微生物热死速率三、培养基的工业**。无酚红培养基适用于对酚红敏感的实验。安徽Ham's F12培养基价格
MEM低血清培养基的平衡盐系统也不是常规的平衡盐系统,该平衡盐系统的缓冲能力强于常规平衡盐系统的缓冲能力。细胞培养过程中pH值下降产生的原因有很多。在细胞生长非常快时,pH值通常下降得很快,此时可以通过及时传代、提高传代比例或降低血清量等方法进行解决。此外,培养瓶盖拧得过紧、NaHCO3缓冲系统缓冲能力不够、培养液中盐浓度不正确、**、酵母或***污染等也能导致pH值通常下降得很快。这时,可以通过以下几种方法解决:1)增加培养液中NaHCO3浓度或减少培养箱内CO2浓度。NaHCO3含量在;2)改用不依赖CO2培养液;3)适当松开瓶盖。在培养液中加HEPES缓冲液,使终浓度为10~25mM;4)在CO2培养环境中改用基于Earle’s盐配制的培养液,在大气培养环境中培养改用Hanks’盐配制的培养液;5)如果是污染造成的则丢弃培养物或用*****。酚红在细胞培养基中用作pH值的指示剂。一般情况下,可以通过酚红的指示作用判断培养基的pH值,但低血清或是无血清细胞培养基中酚红的含量与普通细胞培养基中的酚红含量不同,不能通过肉眼观察或通过经验来判定pH值,建议使用pH计进行测定。酚红通常对含血清的细胞培养基生产的生物制品质量并不会产生明显影响,也可通过纯化技术去除。安徽Ham's F12培养基价格使用减血清培养基能减少实验的变异性。
如何正确地使用培养基及**大程度地保持培养基的营养以维持细胞的生长,对每个培养者都很重要。培养基的使用依不同的培养基种类、培养方式、细胞种类的不同而存在差异。细胞培养液的构成细胞培养液指细胞生长的液体环境,一般指完全培养液,添加了血清、水解乳蛋白、各种添加剂等可以直接使用的培养液。细胞培养基&血清模式血清对于在传统培养基配方中生长和增殖的大多数细胞系来说是需要的,因为大多数单独的培养基并不能提供细胞生长所需要的全部营养,如MEM培养基,较为常用的量为5%~10%的比例,而特殊的低血清培养基血清量可降至3%左右,细胞的形态和功能不受影响。细胞培养基&乳欧液模式化学合成培养基现虽已大规模使用,但在某些培养领域水解乳蛋白仍在使用,以补充培养液中缺乏的氨基酸、小肽物质。较为常用的方式是用汉氏(Hanks’BSS)或欧式(Earle’sBSS)平衡液溶解水解乳蛋白(一般为5‰浓度),即成乳汉(欧)液,再与化学合成培养基(一般为MEM)按比例混合使用(如1:1)。细胞培养基&各类添加剂(生长因子等)模式成分复杂的培养基还含有许多化合物,包括蛋白质、多肽、核苷、柠檬酸循环的中间产物、**酸及脂类等。
cs液体培养基和1/2cs液体培养基在用不同ph超纯水(ph为)配制时的ph都较为稳定,在未调ph的情况下,可直接用于多种植物培养。如图8所示。(2)以克新18号马铃薯无菌苗为例,观察在未调ph和将ph调至:a、培养基制作方法:随机选取超纯水,测得其ph为,用于配制8种不同的液体培养基。第一种:1/2ms未调ph液体培养基,其为取1/2ms基本培养基置于ph为;第二种:1/2cs未调ph液体培养基,其为取1/2cs基本培养基置于ph为;第三种:ms未调ph液体培养基,其为取ms基本培养基置于ph为;第四种:cs未调ph液体培养基,其为取cs基本培养基置于ph为;第五种:1/,其为取1/2ms基本培养基置于ph为,调ph至;第六种:1/,其为取1/2cs基本培养基置于ph为,调ph至;第七种:,其为取ms基本培养基置于ph为,调ph至;第八种:,其为取cs基本培养基置于ph为,调ph至。b、培养方法:从培养实例4所述培养基获得长势**的马铃薯幼苗,在清水中缓苗2-3d后选取长势一致的马铃薯幼苗,如图9-a所示,置于上述8种不同液体培养基8d,每隔2d更新1次液体培养基;于温度22-23℃、湿度50-70%、光照强度2000-3000lux、光照和黑暗交替(光照时间14h、黑暗时间10h)条件下培养。无酚红培养基确保了实验结果的高度准确性。
发酵培养基为:葡萄糖80g/l,酵母浸膏20g/l,k2hpo42g/l,mgso4·7h2o50mg/l,cecl30-40mg/l,mnso4·h2o3mg/l,feso4·7h2o3mg/l,vb110mg/l,生物素7μg/l;发酵工艺同实施例1,100l发酵罐中含有70l发酵培养基。设置cecl3的添加浓度为0,,如图1-2所示,随着cecl3添加量的增加,菌体浓度和谷氨酸含量均有所提升,当添加量为10mg/l时,菌体浓度和谷氨酸含量达到峰值,然后出现下降趋势,但是整个过程中,糖酸转化率没有明显改变(附图未显示);说明cecl3稀土盐能够促进菌株增殖,提高谷氨酸相关合成酶的活力,提高谷氨酸的产量,但是过高的浓度会造成菌株增殖放缓和死亡,谷氨酸产量相应下降。二、通过上述实验确定cecl3添加量为10mg/l,在此基础上,研究2-羟基乙胺对菌体浓度、谷氨酸含量以及糖酸转化率的影响。设置2-羟基乙胺的浓度为,5,10,20,40,80,160mg/l,如图3-4所示,随着2-羟基乙胺添加量的增加,菌体浓度随之增加,相应地,谷氨酸含量和糖酸转化率也有所提升,当添加量为40mg/l时,菌体浓度和谷氨酸含量达到峰值,继续增加2-羟基乙胺的浓度,产生明显的抑菌效果,菌株密度下降明显;原因是,低浓度的2-羟基乙胺可能促进磷脂酰乙醇胺细胞壁组分的合成。F12培养基适用于多种类型的细胞培养实验。福建Ham's F12培养基进货价
无血清培养基适合于无血清环境的细胞培养。安徽Ham's F12培养基价格
1/2cs生长培养基的培养结果为:马铃薯茎端在1/2cs生长培养基上的存活率为100%,培养16d的幼苗,表现为植株健壮、平均茎高、平均茎中粗为,叶色浓绿,根系发达、平均根数为8个。如图4所示。对比培养例4:将1/2cs基本培养基替换为1/2ms基本培养基,其余完全同培养实例4,1/2ms基本培养基的成分及用量如表1所示。1/2ms生长培养基的培养结果为:马铃薯茎端在1/2ms生长培养基上的存活率为100%,培养16d的幼苗,表现为植株健壮、平均茎高、平均茎中粗为,叶色浓绿,根系发达、平均根数为6个。如图4所示。培养实例4和对比培养例4的培养结果比较:马铃薯茎端在1/2cs生长培养基和1/2ms生长培养基上的存活率均为100%;在相同条件下培养16d时,与1/2ms生长培养基相比,1/2cs生长培养基中的幼苗长势更佳,其茎高、茎中粗、根的数量均优于1/2ms生长培养基。如图4所示。培养实例5:哥伦比亚型拟南芥叶片及根愈伤**诱导(1)拟南芥叶片愈伤**诱导培养基:cs基本培养基+,用超纯水溶解,。cs基本培养基的成分及用量如表1所示。(2)拟南芥根愈伤**诱导培养基:cs基本培养基+2,,用超纯水溶解,。cs基本培养基的成分及用量如表1所示。。安徽Ham's F12培养基价格