这几种方法尽管都不是检测DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine掺入法。CFDASE法(C0051、C1031)基于细胞荧光示踪的原理能检测到单个的增殖细胞,但由于每增殖一次荧光减弱一半,在荧光显微镜下较难区分荧光减弱一半的细胞,检测灵敏度不是很高,通常*适用于流式细胞仪检测。在进行科学研究时,上述这些基于细胞活性或CFDASE的方法可以作为EdU法的补充性检测方法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名为5-乙炔基-2-脱氧尿苷,是一种新型胸苷(胸腺嘧啶脱氧核苷,thymidine)类似物,EdU可以在DNA合成过程中替代胸苷掺入到新合成的DNA中。EdU细胞增殖检测试剂盒的基本结构级应用。湖南品质好的EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好
保存条件:4℃或-20℃保存,MTT需避光保存,一年有效;MTT配制成溶液后需-20℃避光保存;Formazan溶解液也可以室温保存。注意事项:由于使用96孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,一定要注意蒸发的问题。一方面,由于96孔板周围一圈容易蒸发,可以采取弃用周围一圈的办法,改加PBS,水或培养液;另一方面,可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方,以缓解蒸发。MTT溶剂在低温情况下会凝固,使用前请室温放置或20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。MTT配制成溶液后为黄色,需避光保存,长时间光照会导致失效。当颜色变为灰绿色时,请勿使用。MTT溶液在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。湖南品质好的EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好EdU细胞增殖检测试剂盒怎样使用?上海东寰告诉您。
Jurkat细胞只用EdU标记(左列),或在标记EdU0min用10mM的DNA合成抑制剂羟基脲(Hydroxyurea)处理(右列),2小时后染色,然后通过流式细胞仪进行检测。从流式结果图中可以看出,EdU标记的细胞有较高比例的绿色荧光阳性细胞,呈现绿色荧光阴性(弱染色)和阳性(强染色)的两个峰,分别对应于未增殖细胞和增殖细胞。经过Hydroxyurea处理的细胞,绿色荧光阳性的细胞几乎完全消失,剩下一个绿色荧光阴性的峰。Hela细胞只用EdU标记(左列),或在标记EdU0min用10mM的DNA合成抑制剂羟基脲(Hydroxyurea)处理(右列),2小时后染色(步骤染Hoechst,方便观察增殖细胞比例),然后通过荧光显微镜进行检测。镜下可见,*EdU标记的细胞有一部分染上绿色荧光的增殖细胞,未增殖细胞的细胞核呈蓝色单染。
保存条件:-20℃保存,一年有效。BiotinAzide、DAB显色液A和DAB显色液B须避光保存。注意事项:ClickAdditive配制成溶液后请注意适当分装。如果溶解后有白色物质析出,请上下颠倒多次,待全部溶解后使用。如果该溶液颜色变成棕色,说明该组分的有效成分已失效,请弃用。DAB对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。由于本产品需要铜离子催化进行点击反应,请注意如下的兼容性问题及解决方案。本产品完全兼容有机类染料如AlexaFluor®系列普通染料及fluorescein(FITC)、Allophycocyanin(APC)及APCE-tandems染你知道EdU细胞增殖检测试剂盒的特点吗?
本试剂盒小包装C0085S如果用于培养的细胞(6孔板)的检测,可以检测50个样品,每个样品的反应体系为500μl的Click反应液;如果用于96孔板检测,可以检测500个样品,每个样品的检测体系为50μl的Click反应液;如果用于12孔、24孔、48孔或384孔板样品的检测,分别可以检测125、250、350和1250个样品,每个样品推荐的Click反应液用量为200μl、100μl、70μl和20μl。小包装如果用于冰冻或石蜡切片的检测,可以检测125-250个样品,每个样品的反应体系为100-200μl的Click反应液。大包装C0085L可检测样品的数量为小包装C0085S的4倍。上海东寰与您分享EdU细胞增殖检测试剂盒对如今市场的影响。湖南品质好的EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好
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可通过CellProliferationELISA,BrdU(比色法.)或CellProliferationELISA,BrdU(发光法)进行细胞群落中DNA合成测定(BrdUbased)。优点是:实验结果同增殖细胞数目紧密相关,可一步完成细胞的温和固定和变性,操作方便稳定,不破坏细胞形态。5-Bromo-2´-dULabeling/DetectionKitI(荧光法)或KitII(AP)可使用试剂盒提供的BrdU单抗,以及酶或荧光偶联二抗,检测单细胞水平的DNA合成(BrdUbased)。前者通过免疫荧光检测,后者通过荧光显微镜检测。优点是:使用核酸酶变性DNA,在不伤害细胞完整性的情况下使抗体结合BrdU。湖南品质好的EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好