产品简介产品简介:产品编号产品名称产品包装产品价格C0201胰酶细胞消化液100ml碧云天生产的胰酶细胞消化液(Trypsin-EDTASolution)含。该消化液经过过滤**,可以直接用于培养细胞的消化,或者一些**的消化。本胰酶细胞消化液具有方便快速的特点,通常室温消化1分钟左右就可以消化下大多数贴壁细胞。包装清单:产品编号产品名称包装C0201胰酶细胞消化液100ml―说明书1份保存条件:4℃保存,一年有效。注意事项:在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被**污染。胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。为了您的安全和**,请穿实验服并戴一次性手套操作。使用说明使用说明:1.贴壁细胞的消化:a)吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。b)加入少量胰酶细胞消化液,略盖过细胞即可,室温放置30秒至2分钟。不同的细胞消化时间有所不同。c)显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用***吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。d)如果发现消化不足。细胞培养中胰酶的作用一般是分解脂肪等。进口胰酶哪家便宜
乙二胺四乙酸:(EDTA)是一种有机化合物,常温常压下为白色粉末。它是一种能与Mg2+、Ca2+、Mn2+、Fe2+等二价金属离子结合的螯合剂。动物细胞在粘附的时候,需要有Ca或Mg离子的参与,EDTA与他们结合后,导致动物细胞粘附能力降低,再加上胰蛋白酶的消化作用,使得细胞与瓶壁快速脱离。两者起到了协同消化的作用。难消化的细胞,胰酶中可填加EDTA。EDTA对细胞贴壁性有影响,因此使用时要甚重。如果影响贴壁,但消化时必须要用,那么在用完全培养基终止消化后,可离心弃上清,再加完全培养基培养,可去除EDTA。如果对贴壁没影响,那么可不离心。海南重组胰酶常见问题消化使用的胰酶是含EDTA还是不含的?
细胞培养胰蛋白酶生物制品简介中文名称:胰蛋白酶中文同义词:胰蛋白酶;胰蛋白酶1:250(猪胰脏);胰蛋白酶1:300(猪胰脏);胰淀粉酶;胰液酵素;胰酶-EDTA溶液;胰蛋白酶1:250;蛋白酶类英文名称:Trypsin英文同义词:TRYPSIN;TRYPSIN,1-250;TRYPSIN,1-300;TRYPSIN-EDTA;TRYPSIN,HUMANPANCREAS;TRYPSINPORCINE;TRYPSIN,PORCINEPANCREAS;CAS号:9002-07-7分子式:C6H15O12P3分子量:≈24000EINECS号:232-650-8胰蛋白酶物化性质胰蛋白酶是从牛、猪、羊的胰脏提取,纯化获得的结晶,再制成的冻干制剂。易溶于水,不溶于三氯甲烷、乙醇、**等有机溶剂。在,短时间煮沸几乎不失活;在碱溶液中加热则变性沉淀,Ca2+有保护和***作用,胰蛋白酶的等电点为。牛胰蛋白酶原有229个氨基酸组成,含6对二硫键,其氨基酸排列顺序和晶体结构已被阐明。在肠激酶活自身催化下,酶原的N末端赖氨酸与异亮氨酸残基之间的肽键被水解,释放出来缬-天-天-天-天-赖6肽,生成有活性的胰蛋白酶。牛的胰蛋白酶氨基酸残基223个,分子量23800[2],活性部位的丝氨酸残基是不可缺少的丝氨酸蛋白酶。猪胰蛋白酶的化学结构与牛胰蛋白酶十分相似,在氨基酸残基排列顺序中,只有41个氨基酸残基不同。
胰酶使用注意:1、在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。2、胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。胰酶配制方法:1、培养液配制,方便好用,对细胞影响小,并且培养液的ph值正好适合胰蛋白酶的溶解2、生理盐水配制,要先调ph值(①胰酶(1:250)②③④⑤⑥⑦Water1000mL磁力搅拌2-3小时,调,过滤除菌。)3、pbs(:称取胰酶粉末,先用少许灭菌过的PBS调成糊状,然后补足到100ml。置室温搅拌4小时或冰箱内过夜,过滤灭菌,分装,4℃保存备用。);或是hanks或是D-hanks液配制(1.称取胰蛋白酶粉末置烧杯中,先用少许D-Hanks平衡盐溶液()调成糊状,然后再补足D-Hanks平衡盐溶液,搅拌混匀,置室温4小时或冰箱过夜,并不断搅拌振荡;2.次日,先用滤纸粗滤,再进行过滤除菌,分装入瓶中,低温冰箱保存备用,常用浓度为。胰蛋白酶溶液偏酸,使用前可调用碳酸氢钠溶液调pH至。)一般,至于作用效果,需要消化一次细胞感觉一下,因为不同厂家的酶不一样,有的作用温和,有的作用剧烈。4、是否需要四度放置过夜,取决于你的胰酶的纯度。过去的胰酶纯度不高,所以难以溶解,需要四度过夜.而现在的胰酶纯度都很高。 胰蛋白酶是一种动物源性产品,是培养细胞过程中常用的酶。
细胞消化胰酶的配制对一般细胞0.25%胰酶(胰蛋白酶,Trypsin)配方:100mlPBS,0.25g胰酶步骤:1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O/2.9gPO4HNa2,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸馏水)2称胰酶0.25g3加入PBS中,低速搅拌〈4h冰浴中,或者4℃过夜低速搅拌0.5h冰浴中4调PH7.45仍在冰浴中6过滤,分装,-20℃保存,4℃短期内用完tip:低速很重要,机械搅拌对酶是一种冲击,如果起沫,酶就变性了。低温,防止酶失活对难消化的细胞:在上述配方中,加入0.02g的EDTA(0.02%)tip:因为EDTA可以络合Ca2+,增加消化效力为什么收到的胰酶会有颜色差异?四川胰酶常见问题
有些胰酶溶液里含有酚红作为PH值指示剂。进口胰酶哪家便宜
胰酶分装冻存时要注意什么?胰酶分装时尽量分装成多瓶,并遵守3次左右用完和只装2/3体积的原则。因为冷冻保存时体积会膨胀,多次使用同一瓶胰酶反复冻融会降低消化效果并增大污染的可能性。5、怎么才能判断胰酶消化完全?注意:不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才表示消化好了。一般肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙状移动就可以了,就应该停止消化。6、胰酶适用于哪些细胞消化?它的消化效果与哪些有关呢?胰酶适用于消化细胞间质较少的软组织和传代细胞,如胚胎、上皮、肝、肾等组织,但对纤维性组织和较硬的*组织效果较差。胰酶的消化效果主要与pH值、温度、胰酶浓度、组织块大小和硬度有关。进口胰酶哪家便宜