注:1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态;2)孵育时间至少2小时,可延长至24小时后再检测也可以。4、以1×PBS清洗细胞两次,每次5分钟,以除去未掺入RNA的EU残留。注:贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。细胞的固定和通透1、每孔加入150μl细胞固定液,室温培养30分钟,弃固定液;注:1)该试剂盒配备了细胞固定液,也可以使用含4%多聚甲醛的PBS来进行细胞固定;2)如果使用其他的细胞固定剂建议用DEPC水来配置,避免RNA酶降解细胞内的RNA。2、每孔加入150μl2mg/ml甘氨酸,摇床孵育5分钟;3、弃甘氨酸溶液,每孔加入300μlPBS洗液,室温清洗5分钟;4、每孔加入300μlTritonX-100细胞通透液,室温通透10分钟,弃细胞通透溶液;5、每孔加入300μlPBS洗液,室温清洗5分钟;EU染色1、通过用10:1去离子水稀释10×反应缓冲液进行配制1×EU反应缓冲液;2、按照溶解200mg缓冲添加剂溶于1ml去离子水的比例称取适量的粉末进行溶解,即为可用的缓冲添加剂的浓度,建议现用现配;注:缓冲添加剂为白色粉末,较难准确称量,称量范围可稍微放宽,但是不应超过±20%,且该粉末较易氧化,使用后请旋紧管盖,如试剂出现棕黄色,则需报废或更换。上海东寰告诉您使用EdU细胞增殖检测试剂盒的便捷性。湖北如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒价格

EdU-488细胞增殖检测试剂盒(MeilunEdUCellProliferationKitwithAlexaFluor488),是一种利用核苷渗入法对细胞增殖情况进行快速、简单、高灵敏检测的试剂盒。其原理为:试剂盒中的EdU(5-ethynyl-2′-deoxyuridine)是一种胸苷(T)类似物,EdU可以在在细胞周期的S期中替代胸苷掺入到新合成的DNA中;另一方面,EdU上的乙炔基能与叠氮化物(如荧光探针AlexaFluor488Azide)通过Cu+的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,该反应非常迅速,被称作点击反应(Clickreaction)(图1)。通过点击反应,新合成的DNA会被绿色荧光标记,然后通过检测荧光信号实现细胞增殖的检测。安徽EdU细胞增殖检测试剂盒公司EdU细胞增殖检测试剂盒的发展前景如何呢?

本试剂盒包含EdU法检测所需要的所有组份,同时提供了蓝色细胞核染料Hoechst33342,可以用来复染所有细胞核,也可用于细胞周期分析。使用本试剂盒所做结果可以用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪或荧光酶标仪进行检测,也可以用于高内涵筛选(High-ContentScreening,HCS)。对6孔板培养的细胞(每孔500μl的Click反应液)、96孔板培养的细胞(每孔50μl的Click反应液)、每管细胞数量为10-100万的流式细胞仪检测(每管500μl的Click反应液)以及冰冻或石蜡切片的检测(每个样品100-200μl的Click反应液)
EdU与染料的共轭反应可以进行高效快速的细胞增殖检测分析,可以有效地检测处于S期的细胞百分数。与传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法相比,更简单,更快速,更准确。EdU只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内更容易扩散,不需要严格的样品变性(酸解、热解、酶解)处理,有效地避免了样品损伤,有助于在组织、的整体水平上观测细胞增殖的真实情况,具有更高的灵敏度和更快的检测速度。AdrianSalic特别强调:“与传统的免疫荧光染色不同,EdU反应能在几分钟内完成,且不需要进行严格的样品变性处理,使得组织成像更简单易行。EdU细胞增殖检测试剂盒厂家。

可通过CellProliferationELISA,BrdU(比色法.)或CellProliferationELISA,BrdU(发光法)进行细胞群落中DNA合成测定(BrdUbased)。优点是:实验结果同增殖细胞数目紧密相关,可一步完成细胞的温和固定和变性,操作方便稳定,不破坏细胞形态。5-Bromo-2´-dULabeling/DetectionKitI(荧光法)或KitII(AP)可使用试剂盒提供的BrdU单抗,以及酶或荧光偶联二抗,检测单细胞水平的DNA合成(BrdUbased)。前者通过免疫荧光检测,后者通过荧光显微镜检测。优点是:使用核酸酶变性DNA,在不伤害细胞完整性的情况下使抗体结合BrdU。使用EdU细胞增殖检测试剂盒的好处有哪些?湖北EdU细胞增殖检测试剂盒原理
EdU细胞增殖检测试剂盒使用时的注意事项。湖北如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒价格
保存条件:-20℃保存,一年有效。BiotinAzide、DAB显色液A和DAB显色液B须避光保存。注意事项:ClickAdditive配制成溶液后请注意适当分装。如果溶解后有白色物质析出,请上下颠倒多次,待全部溶解后使用。如果该溶液颜色变成棕色,说明该组分的有效成分已失效,请弃用。DAB对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。由于本产品需要铜离子催化进行点击反应,请注意如下的兼容性问题及解决方案。本产品完全兼容有机类染料如AlexaFluor®系列普通染料及fluorescein(FITC)、Allophycocyanin(APC)及APCE-tandems染湖北如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒价格