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检测铜绿假单胞菌的注意事项，采用无菌操作进行检测，做好器具、环境的灭菌工作。均匀取样，应保证所取样品具有代表性。对样品进行前处理时，严格遵守操作规程，保证样品溶液的振荡次数，使其充分混匀。画线分离培养是检测铜绿假单胞菌的关键步骤。分离培养得到的单个菌落越多越利于提高检出率。做革兰氏染色时，涂片要薄厚均匀，菌体密度适宜。氧化酶试验结果是判定铜绿假单胞菌是否存在的重要依据。可将其作为筛选试验。如氧化酶试验结果为阴性，则不必再进行后续试验，即可判定为未检出铜绿假单胞菌。1%二甲基对苯二胺试液放置时间延长，试液颜色会逐渐变深，所以要现用现配。挑取菌落时要用玻璃棒，也可用木质或竹制小棒代替，尽量不要使用金属丝或金属棒，防止试验出现假阳性。铜绿假单胞菌的o抗原含有内毒养素和原内毒养素蛋白质两种成份。巴西毛球二孢

大肠埃希氏菌（Escherichiacoli，E、coli），又称大肠杆菌，是肠杆菌科（Enterobacteriaceae）、埃希氏菌属（Escherichia）的表示菌。因Escherich在1885年发现而得名，因其具有结构简单、需要的营养物质简单、易于培养、繁殖速度快、分布广等特点，无论在科学试验研究中，还是在食品安全和相关疾病研究中，常作为载体菌、指示菌、病原菌备受广大科研工作者的关注。如何快速检测样品中的大肠杆菌是研究者几十年来一直亟待解决的问题，特别是大肠杆菌生长过程中的形态、染色特性等基本内容。试验通过革兰氏染色的方法，对培养8~24h大肠杆菌的形态特征进行研究，对今后更好地控制和利用大肠杆菌，具有指导意义和参考价值。巴西毛球二孢铜绿假单胞菌是一种常见的条件致病菌。

金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus，S.aureus)也称“金葡菌”，隶属于葡萄球菌属，是革兰氏阳性菌表示，为一种常见的食源性致病微生物。该菌较适宜生长温度为37℃，pH为7.4，耐高盐，可在盐浓度接近10%的环境中生长。金黄色葡萄球菌常寄生于人和动物的皮肤、鼻腔、咽喉、肠胃、痈、化脓疮口中，空气、污水等环境中也无处不在。金黄色葡萄球菌形态为球形，在培养基中菌落特征表现为圆形，菌落表面光滑，颜色为无色或者金黄色，无扩展生长特点，将金黄色葡萄球菌培养在哥伦比亚血平板中，在光下观察菌落会发现周围产生了透明的溶血圈。金黄色葡萄球菌在显微镜下排列成葡萄串状，金黄色葡萄球菌无芽孢、鞭毛，大多数无荚膜。是常见的引起食物中毒的致病菌。常见于皮肤表面及上呼吸道黏膜。

铜绿假单胞菌低温保存法主要为简单保存法，将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4摄氏度冰箱保存，保存时间不超过1~2个月，若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡，以隔绝外界空气和水汽，保持时间可达3~4个月。液氮较低温保存法，将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中，密封于安瓿管内，然后控制冷却速度，使安瓿管温度逐步下降至-35摄氏度时，即可置于-150~-196摄氏度的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物，都可用此法长期保存。大肠杆菌的出现带动了很多行业的快速发展，例如医药行业。

金黄色葡萄球，甘油菌和斜面试管菌种作为定性菌种，可以直接用于继续传代，用来做上述应用。定量菌液有不同的浓度，主要是用于口罩阻菌性能验证及其他相关检测，需要干冰运输，-80度保存。按照《WS/T774-2021期间现场消毒评价标准》制成传染钢片和染菌布片，就是把10的6次方个金黄色葡萄球菌涂布到钢片上，用来做消毒效果评价指示菌片。金黄色葡萄球菌的应用广，但是主要是用来做科学研究用途。甘油菌液和斜面试管比较便宜，45元/支，现货供应。冻干粉菌种按照规定属于0代，现货，现货库存。其中甘油菌可以加冰袋运输，斜面试管可以常温运输。甘油菌液需要在-80度保存，保质期可以1-2年。斜面试管保存条件不高，4-10度就可以保存，保质期3个月。）金黄色葡萄球菌中，腐生葡萄球菌数量更多，一般不致病。巴西毛球二孢

枯草芽孢杆菌是一种新型的微生物源生物农药。巴西毛球二孢

大肠杆菌耐药性的产生机制：细菌获得耐药性是因为存在耐药基因、敏感菌一旦通过突变选择或结合，转导或转化就可获得耐药性，而几乎所有的病原菌均可查见耐药质粒、质粒的传递加速了耐药性在各菌株间的传播、大肠杆菌是临诊上由质粒介导耐药性的重要细菌之一。1959年日本Aki-ba等人发现并证实多重耐药性可在大肠杆菌和痢疾杆菌间互相传递、1962年此种传递耐药性的因子被命名为耐药因子或R质粒。1963年Lebek从致病性大肠杆菌中发现了R质粒。1969年，Smith曾亲自服用带有质粒的大肠杆菌，证明R质粒的出现与使用抗s素呈正相关。其后，有很多关于正常人、病人及畜禽R质粒检出情况的报道、现在已知R质粒的宿主普遍，可以在多种菌属中传播，目前已发现携带R质粒的细菌有：葡萄球菌、链球菌、淋球菌、几乎整个肠菌科、假单胞杆菌、流感杆菌等。巴西毛球二孢

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