在制备培养基的过程中,安全是第1原则。要保证培养基的无菌性、无致病性、无致变性,避免应用医疗性维生素、肽聚糖、半合成血清等,以避免在细胞培养等实验过程中产生的杂菌和微生物的病变,对实验过程的准确性和可靠性产生不利影响。培养基中含有营养成分,必须考虑基本食物成分(水、碳水化合物、蛋白质、脂肪、维生素、微量元素等)作为通用要素。不同类型的生物需要不同的营养成分,因此在制备培养基时必须注意保证各种营养成分的均衡和充足,以确保生物体生长、繁殖的需要和生理上的健康状况。无血清培养基是在常规培养基中添加多种蛋白质、生长因子等等营养物质来代替动物血清。番茄汁特制琼脂
干粉培养基是一种在体积很小的瓶子里包含了原材料、微量元素和保持pH缓冲液的粉末状态培养基。因其干燥的特点,具有很长时间的保存期限,在良好的保存环境下,可以达到数年乃至十年的保存。这使得干粉培养基非常适合涉及多个实验、多个批次的工作。干粉培养基只需要在配制时加入一定的水,就可以得到所需的液体培养基,降低了配制的难度和操作的复杂度。这种方法避免了由于不同配制批次需要不同的调整,从而导致实验结果的上下波动的情况。干粉培养基的优点之一是可以自由调整,根据需要添加不同的成分,达到特定实验目的的需要。例如,添加具有特定作用的内分泌物质,如去氧地酸、细胞因子等,可以促进细胞增殖或发育。此外,通过添加一些抑菌物质,如维生素或其他抑菌剂,可以有效地抑制不需要的微生物污染。胡萝卜培养基 胡萝卜浸出液葡萄琼脂糖培养基培养基的配方也会受到环境、药物和其他外部压力的影响,因此,在实际应用中需要不断进行调整和改进。
预装培养基的有效期是指由于技术和保质问题而限定的使用时限。虽然预装培养基在生产过程中基本上是消毒处理的,但是在使用过程中,仍然会存在着微生物和其他污染因素对培养基的影响。因此,即使保质期未过,在使用之前也应检查其质量,并确保其适用于实验的要求。一般情况下,市售的预装培养基的保质期通常为6-12个月,但是这只是一个约定值,并不是通用值。在制造过程中,每个厂家都会考虑到不同的因素,如培养基成分、凝胶结构、包装方式和储存条件等,保质期因此也不一样。因此,在购买预装培养基时,我们应该认真查看其保质期,以便判断其可行性。
液体培养基:只含有稀释的琼脂而没有固体成分的培养基称作液体培养基,这类培养基可以是透明的,也可以加入某些蛋白质、胆汁、奶酪素等物质使其呈乳白色。液体培养基的传递作用弱,在其内部微生物可以自由地游走和移动。由于养分的扩散和弥散,微生物生长比较均匀,容易观察和操作。液体培养基适用于下列技术和用途:培养非必需氧气的微生物,便于大规模分离和培养细胞,易于获得菌液。固体培养基:上面介绍的培养基中,添加2-3%琼脂成为了固体培养基。固体培养基结构较坚硬,微生物只能在上面生长,分布和传播相对固定,因此比较有利于观察某些微生物的生长,或对不同微生物胡进行分离。固体培养基适用于下列技术和用途:建立单个菌落,分离微生物混合物,培养土壤样品等。培养基是一种营养物质混合物,可以为细胞提供生长所需的物质。
不同的研究目的需要不同种类的培养基。例如,对于细胞的生化实验,需要使用无血清(serum-free)培养基,以避免血清中对实验结果造成的干扰;而在进行免疫细胞培养时,需要使用低血清(low-serum)培养基,以保证免疫活性。此外,在一些特定的研究领域中,需要使用小份量培养基、无菌培养基或其他特殊处理的培养基。实验室的环境也会对培养基的选择产生影响。例如,高温、高湿度或高气压等极端环境下,需要选择相应的抗旱、抗热或抗氧化的培养基,以确保实验的成功。此外,在空气中存在大量的微生物和气溶胶时,为避免微生物的污染,需要使用低菌量的培养基或实验室级别的干扰者。胰蛋白酶大豆琼脂(TSA) TGE肉汤(含TTC) 四号琼脂基础/4号琼脂基础 O/F试验用培养基(HLGB)。BG-11培养基ATCC Medium 616
牛肉精蛋白胨培养基是常用的富营养培养基,适用于快速生长的微生物。番茄汁特制琼脂
如何有效避免培养基污染?做好实验操作规则:在实验中制定好统一意识的操作规则至关重要。例如,制定有关实验前和实验中洗手、换鞋、穿戴实验服的规定。还要保证操作的环境卫生、实验材料消毒等等。这样可以降低实验环境中的细菌来源,保证实验材料的纯度,同时也可以提高操作人员的自觉性和流程规范性,然后避免因人为原因而产生的污染。做好培养基制作:在培养基的制作过程中,一些常见的问题往往会导致污染,例如:不干净的试管,不洁净的机器设备,不正确的过滤操作和培养基储存不当等。为了避免这些问题,实验室人员应该采用高标准的实验原料,在制作培养基前彻底清洗操作区,并使用无菌试管及机器设备,千万不要盲目省事不进行适当的实验准备和操作过程。番茄汁特制琼脂