Westem HRP基材。高背景分锁不足更改为不同的阻止解决方案。吸笔架不够湿组装前,先将吸墨纸架弄湿。阻塞解决方案可能有始终准备新鲜的0.5%脱脂/低脂干奶。降级的抗体浓度过高降低抗体的浓度。吸笔架朝上放置将印迹架朝上放在蛋白素框架中。在框架中洗涤不足进行至少4次每次30 mL的洗涤。添加清洗剂时,确保真空连续运行缓冲。整个系统电平不一致的信号确保系统在平坦的水平表面上。污点抗体不均匀补充封闭液和抗体稀释剂遍及整个表面0.1%Tween 20表面活性剂。吸墨纸架使用小量移液器(例如5毫升),慢慢散布整个印迹中的抗体。应用至少2.5 mL(用于MultBlot),5 mL(用于Mini blot)或10 mL(用于Midi印迹)抗体。抗体体积低没有抗体回收盘确保抗体中的孔,回收托盘algn一个好的微流控细胞芯片分析仪需要具备哪些特点您知道吗?闵行区MerckAmicon搅拌式过滤器Merck仪器联系人
位孔收集盘与底座中的定位销对齐。注意:对于Mini和Midi框架,将单个清洁托盘放置在底座的**。对于多印迹如图所示,在框架上放置两个收集托盘。在MultiBlot框架中运行单点印迹时,将空白的卡放在空的孔中,然后将孔下方的收集盘上有污点。4.将污渍固定框架放回底座上的位置。5.按照《通用规程》第6步和第7步中的指示,应用一抗并进行孵育。6.孵育10分钟后,打开真空并等待一分钟,以确保所有蚂蚁都具有被收集。注意:当同时处理两个框架时,请先对一侧进行吸尘,然后再对另一侧进行吸尘。这确保在每个框架上具有完全的真空力,并改善体积回收率。7.关闭真空并卸下框架。卸下抗体收集盘。8.将抗体转移到合适的容器中进行存储或分析。9.将印迹保持架放回原位,并继续执行通用规程的步骤9。 性能证明图1. B-管蛋长宁区MerckSNAPi.d.2.0加速器Merck仪器销售上海益启生物的样本制备仪询价公司电话。
中移出并在恒定的温度下孵育颤抖。如果需要过度保温,建议冷藏。虽然表面上的污点支架可能看起来部分干燥,印迹不会变干,因为溶液包含在框架中。注意:如果长时间处理多个印迹,则可以堆叠印迹固定框架减少工作空间。可选:如果要回收一抗,请先将抗体回收盘放入底座,然后再继续执行步骤4。4.延长孵育时间后,将框架放回底座上,卸下盖子,然后按照步骤8进行操作。通用议定书第12条。注意:SNAP i.d不需要延长二抗的孵育时间。 2.0系统。建议使用5倍浓度的二抗,持续10分钟。抗体回收1.执行《通用议定书》的步骤1至5,但将真空时间增加到2分钟,以确保所有的封闭溶液都已从框架的凹槽和通道中移除。2.从底座上取下印迹固定框架,并用一根刷子擦拭框架底部的所有残留液体。纸巾。3.将抗体收集盘放入底座,确保抗体上的定
项卡(图8)创建和启动自定义协议。要手动控制流量,使用“手动模式”标签选择所需的井,压力,和温度(如果使用加热歧管)。有关自动化协议或每次融合的手册,请参阅CellASICO《ONIX2微流体系统用户指南》。注意:对于需要快速交换溶液的实验,请执行以下操作可以应用以下技术:高压(55.2kPa[8psi)下的流量对于初始过渡,然后将流量减小到标准压力长期暴露于6.9-13.8kPa(1-2psi)。 软件操作下图显示了使用ellAsICEONX2软件进行实验的两种模式,请参阅CllASICEONIX2MicrofuidieSystem用户有关软件功能的详细信息的指南。图7.手动模式降低了ONIX2系统的迭代操作。可以手动设置操作参数,此模式a5o提供了选项运行简短的自动印版设置序列,这些序列上海益启生物的微流控细胞芯片分析仪公司电话。
2.0系统计算SNAP i.d.9 2.0系统所需的抗体浓度用于标准免疫检测的浓度标准SNAP i.d.o 2.0免疫检测免疫检测多印迹迷你印迹Midi污点_Ab浓度1毫克/毫升1毫克/毫升1毫克/毫升1毫克/毫升所需抗体量_ 1微克0.25微克0.5微克1微克使用的抗体量30毫升2.5毫升5毫升10毫升比较终抗体稀释1:30,0001:10,0001:10,0001:10,000使用的抗体库存1微升0.25微升0.5微升1微升由于每种抗体都是只有一个的,并且检测试剂的灵敏度各不相同,因此可能有必要进行调整抗体或抗原浓度,使用的检测试剂的类型或灵敏度或印迹X射线曝光时间。请注意,本指南只作为开发比较终抗体的起点浓度以获得所需的性能。表2.封闭,抗体和洗涤的建议体积SNAP i.d.o 2.0SNA上海益启生物的电阻仪询价公司电话。青浦区Merck细胞计数器Merck仪器代理价
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向。松开框架,并同时使用双手,像书一样打开它,同时轻轻地将左半部分向下推,右半部分向上推。当框架是几乎完全打开,两半将滑开。注意不要丢掉位于其中一个的小O形圈中心销的位置。 。要重新组装框架,请按照与上述相反的步骤进行操作。可能需要更多的力才能使两者接合由于O形圈已被压缩,因此可将其减半。注意:此0环的目的是在将印迹放入框架中时保持框架盖处于打开状态。这框架没有0环就可以正常工作。组件重用吸盘支架和抗体夹盘只一次性使用。重复使用会增加污点固定器堵塞的风险印迹中信号不均匀,以及样品交叉污染。请参阅适用的国际,联邦,州和地方法规,以进行适当处置。 故障排除症状原因纠正措施真空控制旋钮棒_清洁不足用洒水冲洗系统。吸盘座不能倒空真空度不足确保系统和真空之间的管道连接或何时缓慢排空来源是安全的。真空M闵行区MerckAmicon搅拌式过滤器Merck仪器联系人