pH7.4磷酸盐缓冲液(Phosphate-BufferedSaline,PBS)是一种广而使用的生物化学和分子生物学实验中的缓冲溶液,具有以下特点:1.**pH稳定性**:pH值稳定在7.4左右,接近人体血液的pH值,适合细胞和生物分子的生理条件。2.**成分**:主要由磷酸二氢钠(NaH2PO4)和磷酸氢二钠(Na2HPO4)组成,这两种盐在溶液中可以形成缓冲体系,维持pH值的稳定。3.**离子强度**:PBS具有一定的离子强度,可以模拟细胞外液的离子环境,有助于保持细胞和蛋白质的稳定性。4.**渗透压**:PBS的渗透压接近人体生理盐水的渗透压,适合用于细胞悬浮和洗涤,不会引起细胞的渗透压变化。5.**清洁性**:PBS通常使用去离子水或蒸馏水配制,减少杂质和离子对实验的干扰。6.**兼容性**:PBS与多种生物分子和细胞培养基兼容,常用于细胞培养、免疫学实验、蛋白质提取和分析等。7.**无菌性**:实验用的PBS通常需要经过高压灭菌或过滤除菌处理,以保证实验的无菌条件。8.**多功能性**:除了作为缓冲溶液外,PBS还可以用于稀释试剂、洗涤实验器材和样品等。9.**易于配制**:PBS的配制相对简单,可以根据需要调整磷酸盐的浓度来改变缓冲能力。TTC的显色作用可以使大肠埃希菌等产生红色的菌落。普通琼脂平板
亚硒酸盐胱氨酸(SC)培养基是一种选择性增菌培养基,主要用于沙门氏菌的选择性增菌培养。以下是其特点介绍:1.**成分**:SC培养基的主要成分包括蛋白胨、乳糖、亚硒酸氢钠、磷酸氢二钠和L-胱氨酸。蛋白胨提供碳源和氮源,乳糖作为可发酵的糖类,亚硒酸氢钠用于抑制革兰氏阳性菌和非沙门氏菌的大多数革兰氏阴性肠道菌,磷酸氢二钠作为缓冲剂,L-胱氨酸作为还原剂。2.**检验原理**:SC培养基的设计原理在于其成分能够满足沙门氏菌生长的需求,同时抑制其他非目标细菌的生长。3.**配制方法**:SC培养基的配制方法是称取23g干粉,加入1升蒸馏水或去离子水,搅拌加热至完全溶解。配制过程中应避免高压灭菌,以免影响培养基的有效成分。4.**使用注意事项**:SC培养基比较好现配现用,或在4℃下短期保存。在室温下,尤其是夏季,培养基容易出现颜色变化,导致增菌效果减退。5.**颜色变化**:过分加热或反复加热会使培养基颜色变深,影响使用效果。因此,配制过程中只能轻微煮沸,并且要迅速用凉水冷却。6.**保存**:开封后的SC培养基比较好存放于2℃-8℃环境下,以延长使用时间。TSAWLPP平板VRBA培养基含有一些选择性成分,使其对肠道细菌更为有利。
胆盐乳糖培养基(BL)是一种专门用于增菌培养的微生物培养基,它具有以下特点:1.**用途**:主要用于药品和生物制品中大肠杆菌、沙门氏菌和绿脓杆菌的增菌培养。2.**成分**:包括蛋白胨、乳糖、牛胆盐、氯化钠、磷酸氢二钾和磷酸二氢钾。蛋白胨提供碳氮源,乳糖作为可发酵的糖类,氯化钠维持渗透压,磷酸氢二钠和磷酸二氢钾作为缓冲剂,牛胆盐和去氧胆酸钠作为选择性抑菌剂。3.**pH值**:通常调节至7.4±0.2(25℃)。4.**使用方法**:首先将培养基粉末加入蒸馏水或去离子水,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装后进行高压灭菌。然后,将样品处理后加入培养基中,放入恒温培养箱内培养18至24小时,必要时可延长至48小时,观察结果。5.**应用**:胆盐乳糖培养基也用于乳品中大肠菌群的快速检测研究,通过构建检测片法和细胞培养瓶剂法,可以快速检测乳品中的大肠菌群。6.**选择性**:胆盐的存在使得培养基能够选择性地促进革兰氏阴性菌的生长,抑制革兰氏阳性菌的生长,这使得BL培养基在分离和鉴定肠道细菌中非常有用。7.**检测乳糖发酵能力**:由于含有乳糖,该培养基能够用于检测细菌的乳糖发酵能力,革兰氏阴性细菌如大肠杆菌等通常能够将乳糖发酵产生酸或气体。
RV沙氏增菌肉汤(RappaportVassiliadisSalmonellaEnrichmentBroth,RVS肉汤)是一种用于沙门氏菌选择性增菌培养的培养基。它的主要特点如下:1.**成分**:RV沙氏增菌肉汤包含大豆蛋白胨、乳糖、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、孔雀石绿、氯化镁、煌绿等成分,这些成分有助于抑制其他非沙门氏菌的生长,同时促进沙门氏菌的生长。2.**用途**:主要用于沙门氏菌的选择性增菌培养,特别是在食品、水和牛奶等样品中检测沙门氏菌时。3.**配制方法**:通常需要称取一定量的干粉培养基,加入指定量的蒸馏水或去离子水,搅拌加热至完全溶解,然后进行高压灭菌。4.**培养条件**:RV沙氏增菌肉汤通常在35-37°C的温度下培养,培养时间根据实验需求而定。5.**效果**:在RV沙氏增菌肉汤中,沙门氏菌能够良好生长,而其他一些细菌则受到抑制。6.**质量控制**:使用时需要进行质量控制,确保培养基的制备和使用符合标准操作程序。7.**储存**:RV沙氏增菌肉汤的干粉形式应在干燥、避光的条件下储存,通常在4-10度的环境中保存,以保持其有效性。8.**有效期**:在适当的储存条件下,RV沙氏增菌肉汤的有效期通常为三年。胰蛋白胨琼脂培养皿可以根据微生物的形态、生长速率、菌落颜色等特征进行初步鉴定。
麦康凯琼脂培养基(MacConkeyAgar,简称MacC培养基)是一种用于微生物学研究和临床诊断中分离和识别肠道细菌的培养基,具有以下特点:1.**选择性培养**:利用胆盐抑制革兰氏阳性细菌的生长,同时促进革兰氏阴性细菌,特别是大肠杆菌的生长。2.**成分**:包含蛋白胨、乳糖、牛胆盐、氯化钠、中性红和琼脂。其中乳糖作为可发酵的糖类,中性红作为pH指示剂,琼脂作为凝固剂。3.**pH值**:pH值控制在7.4±0.2(25℃),为细菌提供适宜的生长环境。4.**菌落特征**:大肠杆菌在MacC培养基上生长时,由于发酵乳糖产酸,菌落周围会出现胆盐沉淀的浑浊圈,并且菌落本身可能呈现粉红色。5.**检验原理**:通过乳糖发酵和中性红的颜色变化,可以将分解乳糖和不分解乳糖的细菌区分开。6.**制备方法**:通常需要将培养基粉末溶解在蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟后备用。7.**微生物灵敏度试验**:使用质控菌株进行微生物灵敏度试验,以确保培养基的适用性。8.**应用**:主要用于肠道致病菌的选择性分离培养,如大肠埃希氏菌和志贺氏菌等。9.**注意事项**:在制备和使用过程中,需要做好防护措施,确保无菌操作。EMB培养基的特点是它对大肠杆菌等产酸革兰氏阴性菌的选择性较强。普通琼脂培养皿
此外,BHI Agar可以根据实验需要添加不同的补充剂,如血液、等,以增强其选择性或提供额外的营养。普通琼脂平板
Kovacs氏靛基质试剂是一种用于吲哚(靛基质)试验的试剂,其特点如下:1.**应用领域**:主要用于鉴定肠系细菌,如大肠杆菌等,通过检测细菌分解色氨酸生成的吲哚来进行鉴定。2.**反应原理**:某些细菌能够分解蛋白胨中的色氨酸,生成吲哚。吲哚与试剂中的对二甲氨基苯甲醛结合,形成玫瑰吲哚,产生红色化合物,从而进行显色反应。3.**操作步骤**:首先将纯培养物接种于适宜的培养基中,如色氨酸肉汤或胰蛋白水培养基,然后在36±1℃下培养24±2小时。之后加入2-4滴Kovacs试剂,混匀后立即观察或放置室温5-10分钟观察结果。4.**结果判断**:阳性反应表现为培养基上部有一红色环,而阴性反应则为黄色、桔黄色或棕色。5.**试剂盒组成**:Kovacs氏靛基质试剂盒包含溶液A,配制依据是将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中,然后缓慢加入25mL浓盐酸。6.**产品规格与价格**:以青岛海博生物提供的产品为例,产品规格为5ml*2,价格为35元,保质期为一年。7.**应用范围**:除了用于病原细菌的鉴定,还可用于食品卫生检测、环境控制、食品毒性检测、水中大肠杆菌检测、食品过敏性检测、食品生产环境的清洁检测、菌落计数及控制系统。普通琼脂平板