Leeming-Notman培养基(LN培养基)是一种用于培养马拉色菌属(Malassezia)的培养基。该培养基的配方包含多种营养成分,能够促进马拉色菌的生长。以下是Leeming-Notman培养基的一些关键特点和配制方法:1.**配方组成**:-蛋白胨(Bacteriologicalpeptone):10.0g-葡萄糖(Glucose):10.0g-酵母膏粉(Yeastextract):2.0g-牛胆盐(Oxbile,desiccated):8.0g-单硬脂酸甘油酯(Glycerolmonostearate):0.5g-吐温60(Tween60):5.0mL-橄榄油(Oliveoil):20mL-琼脂(Agar):15g-去离子水(Deionizedwater):1.0L-pH值调整至5.6±0.2(25℃)2.**配制方法**:-称取培养基粉末,加入到蒸馏水或去离子水中。-加热煮沸以帮助成分溶解。-调节pH值至指定范围。-进行高压灭菌,通常是121℃灭菌15分钟。-冷却至50-55℃后,无菌加入添加剂。3.**用途**:-主要用于培养马拉色菌属的菌,这些菌与人类皮肤有共生关系,并且在医学研究中具有重要意义。4.**保存条件**:-通常在2-8°C下保存,保质期通常为两年。5.**注意事项**:-避免吸入和皮肤接触。-配制过程中应在无菌条件下操作。
DTA培养基的pH值对微生物生长有影响。pH值是描述溶液酸碱性的基本指标,对微生物的生长和繁殖有深远的影响。微生物的适应pH范围各不相同,不同种类的微生物对pH值的敏感度不同,存在一定的平衡范围。pH值的过高或过低都可能对微生物的生长造成不利影响。在DTA培养基中,pH值被控制在6.7±0.1(25℃),这个pH值范围是为嗜热菌芽孢的分离培养而优化的。在这个pH值下,胰酪蛋白胨能够提供适宜的碳氮源和生长因子,而葡萄糖作为可发酵的糖,溴甲酚紫作为酸碱指示剂,琼脂作为凝固剂,共同为嗜热菌芽孢提供适宜的生长环境。当培养基的pH值偏离这个范围时,可能会影响微生物的新陈代谢和酶活性,改变细胞膜的通透性,影响微生物对营养物质的吸收和代谢产物的排泄,进而影响微生物的生长。例如,如果pH值过低,可能会抑制菌体中某些酶的活性,阻碍新陈代谢;如果pH值过高,可能会导致细胞膜通透性改变,影响营养物质的吸收。因此,在配制和使用DTA培养基时,严格控制pH值是非常重要的,以确保微生物能够在适宜的环境中生长。Vogel-Johnson琼脂培养皿血液增菌培养基含有蛋白胨、牛肉浸出粉、氯化钠、葡萄糖、枸橼酸钠、对氨基苯甲酸、硫酸镁、酚红等成分。
营养琼脂方瓶(罗氏瓶)通常是指营养琼脂培养基的一种包装形式,适合实验室进行微生物培养使用。营养琼脂是一种基础培养基,用于非苛养微生物的培养,以及在生化或血清学测试前的质量控制和纯度检查。以下是营养琼脂的典型配方:1.**成分**:-蛋白胨:10.0g/L-牛肉膏粉:3.0g/L-氯化钠:5.0g/L-琼脂:15.0g/L-终pH值:7.3±0.2(25℃)2.**配制方法**:-称取33g营养琼脂培养基粉末,加入1000mL蒸馏水或去离子水。-搅拌加热煮沸至完全溶解。-分装到方瓶(罗氏瓶)中,通常分装量为100mL或500mL。-121℃高压灭菌15分钟。3.**使用方法**:-灭菌完成后,取出方瓶并冷却至大约40-45°C。-如果需要富集,可在灭菌后加入血液或其他生物液体。-在无菌条件下,将培养基倒入无菌的培养皿中或作为液体培养基使用。-培养基凝固后,可将培养皿放置在热空气烤箱中,用较低温度烘烤几分钟,以去除使用前培养皿上的任何水分。4.**储存方法**:-粉末形式的培养基应储存在10至30°C之间,容器需紧密封闭。-制备好的培养基应在20-30°C的环境中储存。
甘氨酸培养基是一种专门用于微生物培养的培养基,其特点主要包括:1.**培养基成分**:甘氨酸培养基通常包含布氏肉汤、琼脂和甘氨酸。其中,甘氨酸是该培养基的关键成分,通常添加量为10.0克/升。2.**pH调节**:甘氨酸培养基的pH值一般调节在7.0±0.2(25℃)。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行灭菌处理,通常采用121℃高压灭菌15分钟。4.**用途**:甘氨酸培养基主要用于弯曲杆菌甘氨酸耐受性试验,如GB标准所规定的。它特别适用于空肠弯曲菌和大肠弯曲菌的分离和培养,因为这些细菌对甘氨酸有耐受性。在微需氧环境下,于42℃培养48小时后,若培养基表面出现云雾状现象,则为阳性结果。5.**培养特征**:在甘氨酸培养基上,空肠弯曲杆菌能够产生灰色、湿润、平铺的菌落,并且可能带有金色金属光泽。6.**制备方法**:将甘氨酸培养基的粉末成分溶解在适量的蒸馏水中,加热以帮助溶解,然后进行灭菌处理。在冷却至大约50°C时,可以进行倒平板或分装试管。7.**储存条件**:甘氨酸培养基通常需要在干燥、避光的条件下储存,以保持其有效性。不同细菌在TSFA上的生长特征不同,如金黄色葡萄球菌可产生黄色的色素,大肠埃希氏菌形成无色透明大菌落。
使用TCBS琼脂进行细菌分离实验的步骤如下:1.**准备工作**:-确保实验室无菌操作条件,穿戴适当的实验服和手套。-准备无菌的接种环、涂布器、无菌吸管和移液器等工具。2.**配制培养基**:-按照培养基包装上的说明,称取适量的TCBS琼脂粉末。-将称取的TCBS琼脂粉末加入到适量的蒸馏水中,通常为100mL。-将混合物加热至沸腾,以确保琼脂完全溶解。3.**冷却和倾注平板**:-将溶解好的培养基冷却至50℃左右(避免过热,以免杀死细菌),此时琼脂应该仍然是液体状态。-将冷却的培养基倒入无菌的培养皿中,一般倾注量为15-20mL/平皿。-等待琼脂凝固,形成固体培养基平板。4.**接种样品**:-使用无菌操作,将待检测的样品涂布或划线接种到TCBS琼脂平板上。-可以使用稀释涂布法、螺旋接种法或其他适当的接种方法。5.**培养**:-将接种后的平板倒置,放入恒温培养箱中。-根据实验要求,通常在36±1℃下培养18-24小时。6.**观察和选择菌落**:-培养结束后,观察平板上的生长情况,记录不同类型菌落的特征。-选择性地挑选出特定的菌落,如蓝绿色或黄色菌落,这些可能是目标弧菌。
KI培养基主要用于鉴别肠道菌发酵葡萄糖和乳糖的能力,以及产生硫化氢的生化反应。SCA培养皿
乙基紫叠氮钠肉汤(EthylVioletAzideBroth,EVA)是一种用于微生物培养的选择性培养基,特别适合于链球菌的增菌培养。以下是它的一些特点和用法:**特点**:1.**成分**:含有酪蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、叠氮钠和乙基紫等成分。2.**pH值**:pH值控制在7.0±0.2(25℃),为细菌提供适宜的生长环境。3.**选择性**:叠氮钠可以抑制革兰氏阴性细菌的生长,特别是对变形杆菌的抑制效果好。4.**应用**:主要用于链球菌的增菌培养,也可用于其他需氧菌和兼性厌氧菌的培养。**配制方法**:1.称取35.8g培养基粉末,加入1000mL蒸馏水。2.加热搅拌至完全溶解。3.分装后,在121℃高压下灭菌15分钟。**质量控制**:-制备好的培养基应进行pH值、无菌性检查和适用性检查。-培养基的保存应避光、密封,并在已验证的条件下贮藏。**应用**:-用于链球菌的分离培养,通过观察菌落的生长情况和特征进行鉴定。**注意事项**:-在配制和操作过程中,应避免摄入、吸入、皮肤接触,并在通风橱中进行,佩戴适当的个人防护装备。SCA培养皿