轻唾琼脂培养基(MSA)基础是一种用于分离培养轻型唾液链球菌的选择性培养基。以下是使用轻唾琼脂培养基(MSA)进行细菌分离和鉴定的步骤:1.**制备培养基**:-称取90gMSA粉末,加入1000mL蒸馏水或去离子水。-加热煮沸至完全溶解。-121℃高压灭菌15分钟。-冷却至50-55℃,加入1mL无菌1%亚碲酸钾溶液,混匀后倒入无菌培养皿中。2.**接种样本**:-将待测样本如咽拭子、尿液或其他临床样本进行适当的稀释。-将稀释后的样本均匀地涂布在MSA平板上。3.**培养**:-将接种后的培养皿置于35-37°C的培养箱中培养18-48小时。4.**观察菌落生长**:-观察培养基上生长的菌落,注意菌落的颜色、形态和大小。-肠球菌在MSA上通常形成蓝色-黑色的菌落。5.**挑选可疑菌落**:-挑取可疑的菌落进行纯化培养。6.**进行生化试验**:-对纯化后的菌株进行一系列的生化试验,如糖发酵试验、CAMP试验、胆汁七叶苷试验等,以进一步鉴定菌种。7.**结果分析**:-根据菌落特征和生化试验结果,结合菌株的形态学特征,进行菌种的鉴定。8.**报告结果**:-将鉴定结果整理成报告,包括菌株的名称、数量和相关的生化特性。TSFA主要用于乳制品中嗜冷菌菌落总数和需氧芽孢总数的测定,对于确保乳制品的质量和安全至关重要 。改良McBride琼脂培养皿
滤膜肠球菌琼脂(FilterMembraneEnterococcusAgar)是一种用于分离和计数肠球菌的选择性培养基。它通常用于水或其他样品中肠球菌的滤膜法分离或计数。**特点**:1.**成分**:含有胰蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、磷酸氢二钾、叠氮化钠和2,3,5-三苯基四氮唑氯化物(TTC)等。其中,胰蛋白胨、葡萄糖和酵母浸粉提供碳源和氮源,叠氮化钠作为抑菌剂抑制非肠球菌生长,TTC作为显色剂使肠球菌菌落呈现红色。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),为肠球菌提供适宜的生长环境。3.**应用**:适用于水和污水中肠球菌的检测,也可用于食品样本中肠球菌的分离和计数。4.**配制方法**:称取培养基42g,加热溶解于1000mL蒸馏水中,冷却至45-50℃时倾入无菌平皿,备用。无需高压灭菌。5.**结果观察**:肠球菌在滤膜肠球菌琼脂上通常形成红色菌落,便于识别和计数。滤膜肠球菌琼脂因其高选择性和特异性,是检测水和食品样本中肠球菌污染的重要工具。YEB预装培养基平板通常将卵磷脂吐温80营养琼脂培养基的粉成分溶解于蒸馏水中,加热煮沸以完全溶解,然后高压蒸汽灭菌15分钟。
TCBS琼脂(ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar)是一种用于分离培养弧菌科细菌,特别是致病性弧菌的选择性培养基。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:-酵母浸粉:5.0g/L-蛋白胨:10.0g/L-硫代硫酸钠:10.0g/L-枸橼酸钠:10.0g/L-牛胆粉:5.0g/L-牛胆酸钠:3.0g/L-蔗糖:20.0g/L-氯化钠:10.0g/L-柠檬酸铁:1.0g/L-溴麝香草酚兰:0.04g/L-麝香草酚兰:0.04g/L-琼脂:15.0g/L-pH值:8.6±0.2(25℃)2.**检验原理**:-蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、碳源及维生素等生长因子。-氯化钠提供弧菌嗜盐生长的环境,高浓度抑制其他细菌生长。-蔗糖作为可发酵碳源。-枸橼酸钠、高pH值和硫代硫酸钠抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群生长。-硫代硫酸钠与柠檬酸铁反应,检测细菌产硫化氢。-溴麝香草酚兰和麝香草酚兰作为pH指示剂,细菌利用蔗糖产酸会使得指示剂变黄。-琼脂作为凝固剂。3.**使用方法**:-称取8.9g培养基,溶解于100ml蒸馏水中,煮沸后冷却至50℃,倾入无菌平皿,备用。-注意:无需高压灭菌。4.**不同细菌在TCBS琼脂上的生长特征**:-副溶血性弧菌:蓝绿色斗笠状菌落,H2S阴性。-溶藻弧菌:黄色菌落,H2S阴性。-霍乱弧菌:黄色菌落,H2S阴性。
NGKG琼脂基础是一种用于食品中蜡样芽孢杆菌分离培养的培养基。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:NGKG琼脂基础的配方包含蛋白胨、酵母浸粉、氯化钠、甘氨酸、苯酚红和琼脂等成分。蛋白胨和酵母浸粉提供碳源、氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持渗透压;甘氨酸提供氮源;苯酚红作为酸碱指示剂;琼脂作为凝固剂。2.**pH调节**:NGKG琼脂基础的pH值通常调节在6.8±0.1(25℃)。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟。4.**添加物**:在冷却至50℃左右时,需要加入20%卵黄液100mL(卵黄液制备:取无菌卵黄液20mL,生理盐水80mL,混匀)。卵黄液提供卵磷脂,产卵磷脂酶的细菌可水解卵磷脂,使其菌落周围形成一个白色的沉淀环。5.**抗生物质**:每200mL培养基中添加多粘菌素B溶液1支,以抑制革兰氏阴性细菌生长。6.**用途**:NGKG琼脂基础主要用于食品中蜡样芽孢杆菌的分离培养。7.**培养特征**:在30℃±1℃需氧培养18-24小时后,典型的蜡样芽孢杆菌在NGKG琼脂基础上表现为浅红色菌落,边缘不规则,有卵磷脂沉淀环。8.**质量控制**:通过接种质控菌株并观察培养特征来验证培养基的质量。 由于其营养成分的丰富性,不同类型的微生物在血琼脂基础2号上能够迅速生长,并形成明显的菌落。
DTA培养基的pH值对微生物生长有影响。pH值是描述溶液酸碱性的基本指标,对微生物的生长和繁殖有深远的影响。微生物的适应pH范围各不相同,不同种类的微生物对pH值的敏感度不同,存在一定的平衡范围。pH值的过高或过低都可能对微生物的生长造成不利影响。在DTA培养基中,pH值被控制在6.7±0.1(25℃),这个pH值范围是为嗜热菌芽孢的分离培养而优化的。在这个pH值下,胰酪蛋白胨能够提供适宜的碳氮源和生长因子,而葡萄糖作为可发酵的糖,溴甲酚紫作为酸碱指示剂,琼脂作为凝固剂,共同为嗜热菌芽孢提供适宜的生长环境。当培养基的pH值偏离这个范围时,可能会影响微生物的新陈代谢和酶活性,改变细胞膜的通透性,影响微生物对营养物质的吸收和代谢产物的排泄,进而影响微生物的生长。例如,如果pH值过低,可能会抑制菌体中某些酶的活性,阻碍新陈代谢;如果pH值过高,可能会导致细胞膜通透性改变,影响营养物质的吸收。因此,在配制和使用DTA培养基时,严格控制pH值是非常重要的,以确保微生物能够在适宜的环境中生长。低温是降低细菌代谢的关键因素之一。常用的低温保存方法包括4℃冰箱保存、-20℃至-80℃的低温冰箱保存。mTEC琼脂平板
哥伦比亚肉汤为非选择性培养基,大多数微生物都能在其上生长良好,因此常用于微生物的初步分离和培养。改良McBride琼脂培养皿
酵母浸粉葡萄糖琼脂(YPDA)是一种常用的微生物培养基,尤其是在酵母菌的培养中。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:YPDA的主要成分包括酵母浸粉、蛋白胨(或胰化胨)、葡萄糖和琼脂。具体配方为1%酵母浸粉、2%蛋白胨、2%葡萄糖,若制固体培养基,加入2%琼脂粉。2.**pH值**:YPDA的pH值通常调节在6.0±0.2(25℃)。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟。葡萄糖溶液灭菌后加入,以避免高温下可能发生的化学反应导致培养基成分变化。4.**用途**:YPDA主要用于酵母菌的培养,也用于药品和生物制品中含王浆和蜂蜜的合剂酵母菌数测定。5.**配制方法**:首先溶解10g酵母浸粉和20g蛋白胨于900ml水中,如制平板加入20g琼脂粉,然后进行高压灭菌。灭菌后加入100ml20g葡萄糖溶液。6.**储存条件**:液体YPDA培养基可常温保存;琼脂YPDA平板在4℃可保存几个月。7.**微生物生长特征**:不同细菌在酵母浸粉葡萄糖琼脂培养基上的生长特征不同,例如酵母菌形成白色凸起光滑菌落,白色念珠菌也形成白色凸起光滑菌落,而黑曲霉菌则有黑色孢子。改良McBride琼脂培养皿