磁珠法提取的DNA通常指的是通过磁珠吸附技术从样本中纯化得到的核酸,而基因组DNA(gDNA)是指一个生物体细胞核中包含的全套遗传信息的DNA。两者的主要区别在于:1.**来源和组成**:-磁珠法提取的DNA可以是基因组DNA,也可以是质粒DNA、线粒体DNA等其他类型的DNA。它是一个广的概念,指的是通过磁珠法技术提取的任何类型的DNA。-基因组DNA特指一个生物体细胞核中的DNA,包含了所有的基因信息,以及可能的非编码区域。它通常包含了大量的碱基对,如人类基因组由大约30亿个碱基对组成。2.**纯度和应用**:-磁珠法提取的DNA的纯度和质量取决于提取过程中的裂解、吸附、洗涤和洗脱步骤,以及磁珠的质量和操作条件。高质量的磁珠法提取的DNA可以用于多种分子生物学实验,如PCR、克隆、测序等。-基因组DNA的提取通常需要考虑其完整性和纯度,以确保后续实验的准确性。基因组DNA提取的难点在于血液样本成分复杂,且白细胞体积占比低,因此提取纯化难度较高。3.**提取方法**:-磁珠法提取DNA是一种高效、快速的核酸提取技术,它利用磁珠表面修饰的特定官能团与核酸的特异性结合,通过外加磁场实现核酸与杂质的快速分离。将MAGE-A3基因序列克隆到一个表达载体中,该载体通常包含有抗生物质抗性基因、启动子、核糖体结合位点。Recombinant Human Fc gamma RIIB/CD32b(His-Avi Tag)

在质粒DNA提取过程中,确保DNA的完整性和活性至关重要,这通常涉及以下几个关键因素:1.**温和的裂解条件**:选择适当的裂解方法对于保持DNA的完整性至关重要。对于大于15kb的质粒DNA,应采用温和的裂解方法,如将细菌悬浮于等渗的葡萄糖溶液中,加入溶菌酶和EDTA破坏细胞壁和细胞膜,以减少对质粒DNA的机械剪切力,从而保护其完整性。2.**避免过度裂解**:在质粒提取过程中,并非裂解时间越长越好。过长的裂解时间可能会造成基因组DNA片段的污染,影响质粒的纯度。3.**适当的洗涤和洗脱**:在纯化过程中,适当的洗涤可以去除蛋白质和其他杂质,但过度洗涤可能会导致DNA的损失。洗脱步骤中,确保洗脱液完全浸润柱膜,以保证结合在柱膜上的质粒得以充分洗脱,避免因洗脱体积过小而影响质粒得率。4.**避免DNA的降解**:在提取过程中,添加核酸酶抑制剂可以防止DNA被核酸酶降解。同时,避免长时间将DNA暴露在室温下,以及避免多次冻融循环,这些都有助于保护DNA的完整性。5.**低温操作**:尽量在低温条件下进行提取操作,以减少核酸酶的活性,从而保护DNA的完整性。

耐高盐全能核酸酶与一般核酸酶的主要区别体现在以下几个方面:1.**盐耐受性**:-**耐高盐全能核酸酶**:具有较高盐浓度耐受性,在150-900mM盐浓度范围内有效,尤其在600-700mM盐浓度下活性比较好。-**一般核酸酶**:大多数全能核酸酶在高盐环境下会失活,酶切效果降低。2.**活性条件**:-**耐高盐全能核酸酶**:在0.5MNaCl条件下具有比较好活性,这使得它在高盐环境下也能保持高效。-**一般核酸酶**:可能在低盐或无盐条件下活性更高,但在高盐条件下活性受限。3.**应用领域**:-**耐高盐全能核酸酶**:广泛应用于生产工艺流程中高盐环境下核酸污染去除,如病毒纯化、疫苗生产、蛋白和多糖类制药工业等。-**一般核酸酶**:可能更多用于一般的分子生物学实验,如DNA或RNA的降解,但不特别针对高盐环境。4.**酶切效果**:-**耐高盐全能核酸酶**:能够有效去除核酸残留,将所有类型的DNA和RNA降解为3~5个碱基片段。-**一般核酸酶**:酶切效果可能受到高盐环境的影响,导致效率降低。5.**pH范围**:-**耐高盐全能核酸酶**:具有宽泛的pH范围(7.0-11.0),在这一范围内保持活性。-**一般核酸酶**:可能具有更窄的pH活性范围。
BsuDNAPolymerase(嗜热脂肪芽孢杆菌DNA聚合酶)在PCR中的应用具有多个优势,以下是一些关键点:1.**链置换活性**:BsuDNAPolymerase具有很强的链置换活性,这使得它非常适合于等温扩增技术,如重组酶聚合酶扩增(RPA)。在这些技术中,BsuDNAPolymerase可以快速、高效、特异性地扩增模板,在10到30分钟内将痕量的核酸模板(低至单拷贝)扩增至可以检出的水平。2.**高温稳定性**:BsuDNAPolymerase在高温下保持活性,这使得它在一些需要高温反应的实验条件下表现出色。3.**高灵敏度和特异性**:BsuDNAPolymerase在等温扩增中展现出高灵敏度,能够将微量核酸模板扩增到可检测水平。同时,它也具有高特异性,减少了非特异性扩增的风险。4.**简化的样品处理**:BsuDNAPolymerase可以直接对复杂样品进行扩增,无需事先进行复杂的核酸纯化和提取步骤,节省了时间和成本。5.**可扩增DNA和RNA**:BsuDNAPolymerase不仅可以扩增DNA,还可以直接扩增RNA,省去了额外的逆转录反应(cDNA合成)步骤,这对于RNA的检测和分析更加方便快捷。6.**无核酸外切酶和RNase残留**:BsuDNAPolymerase在生产过程中确保无核酸外切酶、切口酶及RNase残留,这有助于提高实验的准确性和重复性。Probe qPCR Mix (2×)通常含有热启动DNA聚合酶,这种聚合酶在高温下激发,可以减少非特异性扩增 。

BsuDNAPolymerase(LargeFragment,5U/μL)是一种来源于嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillussubtilis)的DNA聚合酶。这种酶保留了BsuDNAPolymeraseI的5'-3'聚合酶活性,但缺失了5'-3'核酸外切酶结构域,因此它具有链置换活性,可以用于重组酶聚合酶扩增(RPA)等恒温扩增技术。以下是BsuDNAPolymerase(LargeFragment,5U/μL)的一些关键特性和应用:1.**活性定义**:在37°C条件下,30分钟内将10nmol的dNTP掺入酸不溶性物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。2.**热失活条件**:75°C,20分钟。3.**酶保存液成分**:25mMTris-HCl,50mMNaCl,1mMDTT,0.1mMEDTA,50%Glycerol,pH7.4@25°C。4.**储存条件**:-25~-15°C保存,有效期2年。5.**注意事项**:-由于缺乏3'-5'核酸外切酶活性,BsuDNAPolymerase(LargeFragment)不能切除3'未配对的突出末端,因而不适用于生成平齐末端。-25°C时BsuDNAPolymerase(LargeFragment)保留50%的活性,是同温度下Klenow片段(3'-5'exo-)的两倍。6.**应用**:-随机引物法标记。-cDNA第二条链的合成。-单个dA的加尾。-链置换的DNA合成。泛素化蛋白随后被靶向到26S蛋白酶体进行降解,或出现蛋白位置或活性变化。Recombinant Human EFEMP1 Protein,His Tag
在CRISPR-Cas9等基因编辑技术中,使用Pfu DNA Polymerase进行修复模板的合成。Recombinant Human Fc gamma RIIB/CD32b(His-Avi Tag)
牛痘DNA拓扑异构酶I(VacciniaVirusDNATopoisomeraseI)与细菌DNA拓扑异构酶的主要区别如下:1.**来源不同**:-牛痘DNA拓扑异构酶I来源于牛痘病毒,是一种真核生物病毒中的酶。-细菌DNA拓扑异构酶则来源于原核生物,如大肠杆菌的ω蛋白等。2.**功能特性**:-牛痘DNA拓扑异构酶I能够解旋DNA的超螺旋结构,并且识别并切割双链DNA末端[5’C(T)CCTT],与DNA形成共价连接形成稳定复合物,遇到DNA的5’-OH基团后,重新连接形成完整DNA链。-细菌DNA拓扑异构酶,如大肠杆菌的ω蛋白,主要功能是催化DNA链断开和结合的偶联反应,以改变DNA的拓扑结构。3.**活性条件**:-牛痘DNA拓扑异构酶I即使在Mg2+不存在的条件下也显示活性。-细菌DNA拓扑异构酶可能需要Mg2+等金属离子作为辅因子来发挥活性。4.**作用的DNA链**:-牛痘DNA拓扑异构酶I能使正负两方的超螺旋分子均形成松散型。-原核生物由来的DNA拓扑异构酶I只作用负链的超螺旋分子。5.**共价键形成**:-牛痘DNA拓扑异构酶I与DNA形成共价连接,此酯键中所贮存的能量可能在切断端的再结合上起着作用。-细菌DNA拓扑异构酶在原核生物中是游离型的5′-OH末端扣3′-磷酸末端与酶形成共价键。
Recombinant Human Fc gamma RIIB/CD32b(His-Avi Tag)
Recombinant Human BAFFR/TNFRSF13C(His Tag)
Recombinant Mouse BID Protein
Recombinant Mouse gp130/CD130/IL-6 R beta Protein
Recombinant Cynomolgus BAFFR/TNFRSF13C Protein
Recombinant Human CD55 Protein
Recombinant Human CD93/C1q R1 (hFc Tag)
Recombinant Human TIE2 Protein
Recombinant Mouse GITR Ligand/TNFSF18 Protein
Recombinant Human Wnt-3a protein
Recombinant Human CRTAM (His Tag)