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10×DNA Loading Buffer:助力DNA电泳的关键试剂在分子生物学研究中,DNA凝胶电泳是一种常用的技术,用于分离和分析DNA片段的大小和纯度。而10×DNA Loading Buffer作为电泳实验中的关键试剂,其性能和特点对实验结果的准确性和可靠性起着至关重要的作用。一、产品特点10×DNA Loading Buffer是一种10倍浓缩的上样缓冲液,主要用于DNA凝胶电泳。其主要成分包括甘油、EDTA、溴酚蓝和二甲苯青等。甘油的高密度特性使得DNA样品能够快速沉入凝胶加样孔中,避免样品漂浮。EDTA则可螯合反应缓冲液中的Mg²⁺,终止反应,防止核酸外切酶活性导致的产物降解。此外,该缓冲液中添加了溴酚蓝和二甲苯青两种指示剂,分别用于指示电泳进程。在1%琼脂糖凝胶中,二甲苯青条带约为4Kb,溴酚蓝条带约为400bp。这种双指示剂系统为电泳提供了直观的参考,帮助研究人员实时监控电泳进度。二、性能优势10×DNA Loading Buffer的性能优势在于其高稳定性和适用性。它适用于多种类型的DNA样品,包括双链DNA、单链DNA、DNA引物以及小RNA等。此外,该缓冲液不仅适用于琼脂糖凝胶电泳,还可用于非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),满足不同实验需求。Pfu酶能够在高温条件下保持活性,在95℃孵育1小时后,仍能保持90%以上的活性特性使其在PCR反应中表现出色。Recombinant Cynomolgus IL-17F Protein,His Tag
一、产品特点(一)高灵敏度该qPCR Mix采用了先进的热启动Taq酶技术,通过化学修饰将酶活性锁定在低温条件下,在PCR反应的高温变性阶段释放活性。这一特性有效避免了非特异性扩增,显著提高了反应的灵敏度,即使对于低丰度的靶基因,也能实现检测。例如,在检测稀有突变基因时,其高灵敏度能够确保即使在野生型基因背景中含量极低的突变基因也能被准确识别,为病痛早期筛查等研究提供了有力支持。(二)高特异性其独特的缓冲体系经过优化,能够精确调控引物与模板的结合过程。在反应过程中,该体系可有效减少引物二聚体的形成,同时增强引物与目标模板的特异性结合能力。这使得在复杂的基因组背景下,目标基因得以高效扩增,从而显著提高了qPCR反应的特异性。在多基因家族成员的区分检测中,这种高特异性优势尤为明显,能够避免因引物错配导致的非目标基因扩增,确保实验结果的准确性。Recombinant Cynomolgus IL-17F Protein,His TagPfu DNA Polymerase在基因组测序中的应用:Pfu DNA Polymerase用于基因组测序,确保测序结果的准确性。
Ultra-Long DNA Polymerase 是一种专为超长片段扩增设计的耐热DNA聚合酶,具有链延伸能力和高保真性,能够高效扩增长达数十千碱基(kb)的DNA片段。这种聚合酶在基因组学研究中具有重要意义,尤其是在复杂基因组的完整组装和超长测序领域。特点Ultra-Long DNA Polymerase 的重要优势在于其超长扩增能力。它能够在单次反应中合成超过100 kb的DNA片段,甚至在某些优化条件下,比较大读长可达数百万碱基。这种能力使其在填补基因组组装中的缺口(gap)和实现端粒到端粒(T2T)基因组组装方面表现出色。此外,Ultra-Long DNA Polymerase 具有高保真性,能够降低扩增过程中的错误率,这对于需要高精度的基因组学研究至关重要。它还具备3'-5'外切酶活性,能够进一步提高扩增产物的准确性和可靠性。应用Ultra-Long DNA Polymerase 在多个领域展现出巨大潜力。例如,在植物基因组学中,它被用于优化超长DNA片段的提取和扩增,成功实现了多个植物物种的高质量T2T基因组组装。通过结合牛津纳米孔(Oxford Nanopore)测序技术,Ultra-Long DNA Polymerase 能够生成超长读长的测序数据,明显提高了基因组组装的完整性和准确性。
在现代分子生物学研究中,聚合酶链式反应(PCR)技术已成为不可或缺的工具,广泛应用于基因扩增、突变检测、基因表达分析等多个领域。而一款PCR Master Mix则是确保实验成功的关键因素之一。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye)凭借其性能和独特的产品特点,为科研工作者提供了高效、可靠的实验解决方案。一、酶性能Phusion Master Mix的成分是Phusion DNA聚合酶,这是一种具有高保真性的热稳定酶。它能够以极高的准确性复制DNA模板,错误率极低,为普通Taq酶的1/500,这使得它在扩增长片段DNA或对序列准确性要求极高的实验中表现出色。例如,在进行基因克隆或构建基因文库时,Phusion酶能够确保扩增产物的序列与原始模板高度一致,从而提高了后续实验的成功率。二、快速扩增能力尽管Phusion酶具有高保真性,但其扩增速度并未受到影响。它能够在短时间内完成长片段DNA的扩增,提高了实验效率。对于长度在5kb以内的DNA片段,Phusion Master Mix可以在几分钟内完成扩增,这对于需要快速获得实验结果的研究人员来说是一个巨大的优势。例如,在进行高通量基因筛查或大规模样本分析时,Phusion Master Mix能够缩短实验周期,提高工作效率。在泛素化过程中,首先泛素激起酶E1(Uba1或其他)在ATP的存在下激起泛素分子,形成E1-泛素硫酯中间体。
高灵敏度与特异性该试剂盒采用优化的缓冲体系和新一代TaqDNA聚合酶,结合高效的逆转录酶,能够在低浓度RNA样本中实现高灵敏度的检测。其特异性高,即使在复杂的样本中,也能通过熔解曲线分析呈现单一峰,避免非特异性扩增。防污染设计OneStepRT-qPCRSYBRGreenKit(UDGPlus)内置dUTP/UDG防污染系统,能够有效降解含有尿嘧啶的PCR产物,防止实验室气溶胶污染对实验结果的干扰。这一特性在病毒检测和低丰度基因表达分析中尤为重要。操作简便该试剂盒将逆转录和qPCR反应整合在同一管中完成,避免了多次开盖操作,减少了人为误差和污染风险。同时,预混液的设计使得实验操作更加便捷,用户只需加入引物和模板即可进行反应。示踪染料辅助试剂盒中的反应缓冲液含有惰性示踪染料,通过颜色变化(如蓝色与黄色混合后变为绿色)直观判断样本是否加入,提高了实验操作的准确性和可靠性。兼容性该试剂盒适用于多种qPCR仪器,并提供不同浓度的ROX校正染料,以满足不同仪器的需求。Endo H 是一种糖蛋白特异性的酶,主要作用于含有 N - 连接寡糖链的糖蛋白,对其他类型的生物大分子如核酸。Recombinant Cynomolgus IL-17F Protein,His Tag
E1通常被认为是泛素化过程中的限速步骤,因为它涉及到泛素的激起和ATP的水解。Recombinant Cynomolgus IL-17F Protein,His Tag
Taq DNA聚合酶:分子生物学的“明星酶”Taq DNA聚合酶是一种从嗜热菌Thermus aquaticus中分离得到的耐热性DNA聚合酶,因其独特的耐高温特性和高效的DNA合成能力,成为分子生物学领域不可或缺的工具。该酶在PCR(聚合酶链式反应)技术中发挥着重要作用,极大地推动了基因扩增、测序和诊断技术的发展。Taq DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性,但缺乏3'→5'外切酶活性,这使得它在DNA合成过程中能够快速延伸引物,同时在PCR产物的3'端添加一个突出的A碱基,便于后续的克隆操作。此外,Taq酶的耐热性使其能够在PCR的高温变性步骤中保持稳定,从而实现高效的循环扩增。近年来,科学家们通过对Taq DNA聚合酶的改造和优化,开发出多种突变体,以满足不同的实验需求。例如,Klentaq1突变体具有更高的耐热性和保真性,适用于长片段PCR扩增。此外,Taq酶的5'外切酶活性还被用于开发新型的多重PCR检测技术,如“MeltArray”技术,实现了在单次反应中检测多个靶点。Taq DNA聚合酶的发现和应用不仅极大地简化了DNA扩增的流程,还为基因诊断、遗传病检测和个性化医疗等领域提供了强大的技术支持。Recombinant Cynomolgus IL-17F Protein,His Tag
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