北京酵母表达高通量筛选技术服务技术服务

除了His标签和GST标签，还有多种融合伴侣技术可以用于提高蛋白的表达和纯度，包括但不限于以下几种：1.Flag标签：Flag是一个八肽序列(DYKDDDDK)，可以通过抗Flag标签的抗体进行免疫沉淀或西方印迹分析，有助于提高蛋白的纯度。2.Fc融合蛋白：Fc标签是免疫球蛋白的恒定区，可以提高蛋白在哺乳动物细胞中的溶解性和稳定性，并且可以通过蛋白A亲和层析进行纯化。3.人血清白蛋白(HSA)：HSA作为融合伴侣可以提高蛋白的溶解性和稳定性，延长半衰期，并通过其固有的结合特性进行纯化。4.转铁蛋白：转铁蛋白可以作为融合伴侣，利用其与铁的高亲和力进行纯化，并且有助于提高蛋白的稳定性。5.XTEN聚合物：XTEN是一种柔性的多肽聚合物，可以提高蛋白的溶解性和稳定性，有助于防止聚集。6.弹性蛋白样多肽(ELP)：ELP具有可逆的热响应性质，可以通过温度诱导的相分离进行纯化，有助于提高纯度。7.Strep标签：Strep标签是一个短肽序列，可以通过Strep-Tactin亲和层析进行高效率的纯化。8.MBP融合蛋白：麦芽糖结合蛋白(MBP)可以作为融合伴侣，提高蛋白的溶解性，并通过亲和层析进行纯化。。将正确的菌落接种至2ml的LB中，37℃过夜培养。北京酵母表达高通量筛选技术服务技术服务

UNG酶（Uracil-N-Glycosylase）在qRT-PCR中的主要作用是防止PCR产物的污染，提高实验的特异性和准确性。其工作原理如下：1.**替代dTTP**：在PCR反应中，使用dUTP替代dTTP，这样扩增产物中的胸腺嘧啶（T）被尿嘧啶（U）取代，形成了含有dU的DNA链。2.**降解尿嘧啶**：UNG酶能够识别并水解DNA中的尿嘧啶碱基，将其从DNA链中释放出来。这一过程在PCR反应前的50℃下进行，UNG酶将反应体系中已有的含U的DNA污染物降解，消除了由于污染DNA产生的扩增可能性。3.**高温灭活**：在PCR的高温变性步骤中（通常在95℃），UNG酶被灭活，因此不会影响新合成的含U的PCR产物。4.**消除污染**：UNG酶可以消除高达10^8^的U-DNA产物，有效减少因PCR产物污染导致的假阳性结果，从而保证qRT-PCR结果的特异性和准确性。5.**热启动聚合酶的使用**：UNG酶常与热启动Taq聚合酶一起使用，以建立含有UNG/dUTP防污染体系的热启动PCR反应系统，进一步减少非特异性扩增和污染。通过UNG酶的使用，可以有效地控制qRT-PCR反应中的污染问题，提高实验结果的可靠性。江苏CHO细胞稳定表达技术服务开发Pfu Master Mix (2x)(With Dye)提供高保真DNA扩增，适用于克隆、突变分析等需要高精度结果的实验。

DNA Marker VII：精细助力分子生物学实验在分子生物学研究中，DNA Marker VII是一种广使用的DNA分子量标准，主要用于琼脂糖凝胶电泳中分析DNA片段的大小。它由6条带状双链DNA条带组成，覆盖300 bp到2500 bp的分子量范围，具体条带大小分别为300 bp、500 bp、1000 bp、1500 bp、2000 bp和2500 bp。DNA Marker VII具有明显的实验优势。其中，1500 bp的条带浓度为100 ng/5 μL，显示为加亮带，便于快速定位和半定量分析，而其他条带浓度约为50 ng/5 μL。此外，该产品已预混1×loading buffer，可直接取2-5 μL进行电泳，操作简便，电泳图像清晰。在实验中，DNA Marker VII适用于多种琼脂糖凝胶浓度，建议电泳条件为1.0%的凝胶浓度、5-7 cm的凝胶长度、4-10 V/cm的电压，电泳时间约为20-25分钟。通过EB染色或Goldview等染料进行染色后，可在紫外灯下清晰观察条带。DNA Marker VII的保存条件为-20℃，有效期可达一年，短期频繁使用可置于4℃保存。它不仅适用于DNA片段大小的确定，还可用于DNA含量的粗略定量，但不适用于精确定量。总之，DNA Marker VII凭借其清晰的条带、便捷的操作和稳定的性能，已成为分子生物学实验中不可或缺的工具，为科研人员提供了可靠的分子量参考。

除了毕赤酵母，还有几种常用的表达系统可以用来提高重组蛋白的表达量和纯度：1.大肠杆菌（Escherichiacoli）表达系统：大肠杆菌是常用的原核表达系统，具有遗传背景清晰、培养简单、成本低廉等优点，适合快速表达和生产目的蛋白。但是，它不能进行复杂的翻译后修饰。2.酿酒酵母（Saccharomycescerevisiae）表达系统：酿酒酵母是一种真核表达系统，具有蛋白质翻译后加工能力，适合于表达真核的蛋白，且培养和转化操作简便，适合大规模工业化生产。3.昆虫/杆状病毒表达系统：这种系统可以对真核的蛋白进行翻译后加工，适合于表达复杂糖蛋白，且具有较高的表达量和纯度。4.哺乳动物细胞表达系统：如HEK293细胞，能够进行与人类相似的翻译后修饰，适合表达需要复杂糖基化等修饰的蛋白，但成本相对较高。5.枯草杆菌（Bacillussubtilis）表达系统：枯草杆菌具有蛋白分泌能力强、培养简单等优点，适合于工业规模生产。6.粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomycespombe）：其生理特性接近高等生物，适合表达真核膜蛋白。每种表达系统都有其独特的优势和局限性，选择时需要考虑目标蛋白的特性、所需的翻译后修饰、成本、产量以及纯化路线等因素。通过敲除特定的基因，可以改变毕赤酵母的糖基化模式，使其更接近人类糖基化模式。

DL2000 Plus DNA Marker：精细的DNA分子量标准DL2000 Plus DNA Marker 是一种即用型的DNA分子量标准，广应用于琼脂糖凝胶电泳中，用于估算DNA片段的大小。它由多条线状双链DNA片段组成，能够为DNA分析提供精确的分子量参考。产品特点组成：DL2000 Plus DNA Marker 由8条线状双链DNA片段组成，条带大小分别为100 bp、250 bp、500 bp、750 bp、1000 bp、2000 bp、3000 bp和5000 bp。其中750 bp条带浓度较高，显示为亮带。即用型设计：已预混1×Loading Buffer，使用时无需额外添加，直接上样。清晰的条带：电泳图像清晰，背景干净，条带亮度均匀。稳定性高：在室温下可稳定保存三个月，长期保存建议置于-20℃。注意事项保存条件：建议低温保存，避免反复冻融，以防止核酸酶污染导致条带降解。避免加热：使用前无需加热，直接上样。电泳缓冲液：及时更换电泳缓冲液，使用高质量的琼脂糖，以获得比较好分离效果。染料选择：如果使用GenGreen等安全染料，染色效果更佳。应用场景DL2000 Plus DNA Marker 适用于常规PCR产物、基因组DNA片段等的大小鉴定，特别适合需要精确测定DNA片段大小的实验，如基因编辑验证、小片段插入/缺失分析等。毕赤酵母被认为是表达亚单位疫苗的独特宿主，这对医疗生物技术市场的增长具有影响 。上海重组类人源胶原蛋白技术服务研发

50×TAE粉剂凭借其高效、经济和稳定的特点，成为分子生物学实验中理想的缓冲液选择。北京酵母表达高通量筛选技术服务技术服务

DL2000 II DNA Marker：精细的DNA分子量标准DL2000 II DNA Marker 是一种即用型的DNA分子量标准，广应用于琼脂糖凝胶电泳中，用于估算DNA片段的大小。它由多条线状双链DNA片段组成，能够为DNA分析提供精确的分子量参考。产品特点组成：DL2000 II DNA Marker 由6条线状双链DNA片段组成，片段大小分别为100 bp、250 bp、500 bp、750 bp、1000 bp和2000 bp。即用型设计：已预混1×Loading Buffer，使用时无需额外添加，直接上样。清晰的条带：电泳图像清晰，背景干净，条带亮度均匀。稳定性高：在室温下可稳定存放，长期保存建议置于-20℃。使用方法上样量：建议每次取5 µL直接加入琼脂糖凝胶的加样孔中。如果加样孔较宽，可适当增加上样量。电泳条件：推荐使用1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶，1×TAE或0.5×TBE缓冲液，电压5-10 V/cm。染色与观察：电泳结束后，使用溴化乙锭（EB）或其他DNA染料染色，在紫外灯下观察。注意事项保存条件：建议低温保存，避免反复冻融。琼脂糖质量：电泳时应尽量选用高质量的琼脂糖，以获得比较好分离效果。电泳缓冲液：及时更换电泳缓冲液并使用新制备的凝胶，以免影响电泳结果。北京酵母表达高通量筛选技术服务技术服务