细胞壁缺陷型细菌培养基(L-型细菌培养基)是一种为支持细胞壁缺失或缺陷型细菌(如L-型细菌)生长而设计的高渗、低毒、富营养的培养基。这类细菌因缺乏完整的细胞壁,不能耐受常规培养基的渗透压,因此必须在培养基中加入高浓度的渗透稳定剂,如蔗糖(10–15%)、NaCl(2–5%)或甘露醇,以维持细胞膜的稳定性,防止细胞破裂。L-型细菌通常由某些抗生物质(如青霉素、头孢类)诱导产生,也可在某些慢性沾染或免疫抑制状态下自然出现。由于其生长缓慢、形态多变、常规培养难以检出,因此需要的培养基进行分离与培养。细胞壁缺陷型细菌培养基通常以脑心浸液(BHI)或蛋白胨酵母膏为基础,提供丰富的氨基酸、维生素和其他生长因子,促进L-型细菌的复苏与增殖。部分配方还会加入马血清或人血清(5–10%),以提供胆固醇和脂质,进一步增强膜的稳定性。该培养基可用于临床标本(如尿液、血液、关节液)中L-型细菌的分离,尤其适用于慢性、反复沾染但常规培养阴性的病例。接种后通常在35–37℃、5% CO₂条件下培养3–7天,L-型细菌可形成“油煎蛋”样菌落,即致密、边缘扩散的微小菌落,需用倒置显微镜观察确认。霍氏肠杆菌触酶试验阴性,分解甘露醇,不分解阿拉伯糖,胆汁七叶苷试验阳性,在含6.5% NaCl的肉汤中生长。长孢链霉菌
堀越氏芽孢杆菌(Bacillus horikoshii)是20世纪90年代由日本科学家堀越等从碱性温泉沉积物中分离出的嗜碱菌,也是国际公认的模式菌株(ATCC 700161)[ ^82^ ][ ^84^ ]。菌体杆状、革兰氏阳性,可形成椭圆芽孢,更适pH 8.5–9.5、温度30–37 ℃,在Na₂CO₃浓度50 g L⁻¹的极端环境中仍能正常代谢,被称为“天然碱性细胞工厂”。一、耐碱机制基因组编码多拷贝Na⁺/H⁺逆向转运蛋白(mnh、nhaC)和碳酸酐酶,可将胞内多余Na⁺排出,并将CO₃²⁻转化为HCO₃⁻,维持胞内pH稳态;细胞壁肽聚糖含高比例二氨基庚二酸,增强膜稳定性,为高温高碱酶的高效表达提供平台。二、工业酶潜力其耐碱淀粉酶、普鲁兰酶更适pH 9–10,90 ℃半衰期>2 h,已用于淀粉糖化“一步法”,可省略传统工艺中的中和环节,节能15 %;耐碱蛋白酶在洗涤剂中可去除血渍、奶渍,低温活性优于市场同类酶20 %。三、农业与环境应用菌株P1具备“溶磷-钝化重金属”双重功能:在pH 9、Cd²⁺ 50 mg kg⁻¹条件下,仍可将难溶磷酸钙转化为磷277 mg kg⁻¹,同时胞外多糖吸附Cd²⁺,使水稻籽粒镉含量下降35 %,产量提高18 %。

Bushnell-Haas琼脂(Bushnell-Haas Agar,简称BH琼脂)是一种专为检测环境微生物降解烃类能力而设计的合成培养基。其配方精简而精细:以磷酸钾缓冲对维持pH 7.0±0.2,硫酸铵提供氮源,氯化钠、硫酸镁与微量金属盐构成基本离子环境,却不含任何有机碳源。正这份“刻意为之的贫瘠”,使BH琼脂成为筛选“吃油微生物”的黄金标准——只有当培养皿中额外滴加柴油、石蜡或多环芳烃时,能利用这些烃类作为碳与能源的细菌、酵母乃至菌才会长出可见菌落,降解能力越强,菌落周围出现透明晕圈的速度越快、直径越大。自1940年代问世以来,BH琼脂被广用于石油污染土壤、海洋表面膜及工业废水的微生物资源普查。研究人员只需将样品匀浆涂布于表面覆有薄层原油的BH平板,28℃培养3–7天,即可依据菌落形态与晕圈初步分离高效降解株;再结合GC-MS测定残余烃量,可在两周内完成从筛选到定量评价的完整流程。近年来,随着极端环境研究升温,BH配方被灵活调整:添加3% NaCl可分离耐海盐烃降解菌;降低pH至4.5、补充Cu²⁺则用于勘查酸性矿山废水中的耐重金属菌。
阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)是2009年印度科学家从平流层空气尘埃中分离的新种,以古印度天文学家阿耶波多命名,象征“高空来客”。菌体杆状、周生鞭毛,能形成椭圆芽孢,耐紫外、耐干燥,在pH 5–9、15–45 ℃范围内生长良好,是兼具促生与抗逆的“空中特种兵”。一、促生机制菌株AB15可分泌IAA 28 mg·L⁻¹,溶磷3.5 mg·L⁻¹,并产1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)脱氨酶,降低植物乙烯水平,使小麦、玉米根系增35%,干旱存活率提25%;与根瘤菌共接种,大豆结瘤数提高40%,亩产增加18%。二、防病降镉菌株Cd-19对番茄青枯、黄瓜枯萎抑菌带宽达26 mm;同时胞外多糖吸附Cd²⁺,使糙米镉含量下降45%,达到国家限定标准,为“重金属-病害”复合障碍田提供一菌双解方案。三、工业酶潜力其耐碱淀粉酶更适pH 9、55 ℃,在洗衣液中可去除淀粉污渍,活性比市售酶高20%;低温蛋白酶在10 ℃仍保持70 %活力,为寒区洗碗粉节约能耗15 %。四、太空农业由于源自平流层,AB15对紫外、低气压具有天然适应性,已被选为“月宫一号”生物再生生命保障系统候选菌,可在微重力下稳定促生小麦,为地外基地提供微生物保障。枯草芽孢杆菌芽孢形成:特定环境触发,芽孢外衣构建,休眠体抗逆强,遇适宜再萌发。

异常嗜冷芽孢杆菌(Bacillus psychrodurans)是芽孢杆菌家族里的“极地居民”。它可在−2 ℃缓慢生长,更适温度只15 ℃,比较高不超过30 ℃,却能在南极冻土、深海沉积物中形成椭圆芽孢,耐−20 ℃冷冻和反复冻融,被视作研究低温适应的模式菌之一。其“耐寒密码”有三重:细胞膜富含支链和短链脂肪酸,保持流动性;冷休克蛋白Csp与RNA伴侣协同,防止核酸二级结构冻结;兼产低温活性酶,在4 ℃仍具80 %活力,为冬季生物过程提供催化可能。在农业上,菌株L-4分泌IAA 18 mg·L⁻¹并溶磷2.3 mg·L⁻¹,4 ℃下仍使冬小麦根长增25 %,返青期提前5天,分蘖数提高一成,相当于给作物“穿”上生物羽绒服。工业端,它的耐冷蛋白酶已在洗涤剂中试用,10 ℃洗衣去污力提升30 %,节能20 %;低温淀粉酶可将糖化温度由60 ℃降至35 ℃,为冬季酒精发酵省蒸汽、减碳排。环境修复方面,菌株ANT-1在−5 ℃、10 %盐度下60天降解柴油60 %,为极地溢油、寒区输油管泄漏提供原位生物修复方案。未来,借助合成生物学,把异常嗜冷芽孢杆菌的“冷酶+冷激”模块植入生产菌,有望实现“零加热”生物制造,让微生物在冰水里也能为人类催化价值反应。小小嗜冷芽孢杆菌,用极端低温下的生存智慧,把寒冷转化为绿色科技的新动能。昼夜输送给花生,亩产蛋白因此提升三成,农户少施20公斤尿素,却多收一筐饱满果仁。圈卷产色链霉菌
假普通链孢囊菌在燕麦粉酵母精琼脂(30℃)上,气丝呈现淡粉色,基丝反面淡褐色,可溶色素为淡黄褐色。长孢链霉菌
纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)是土壤里的“多面小钢炮”。菌体直杆、常成链排列,革兰氏阳性,周生鞭毛,可形成椭圆芽孢,耐干燥、耐酸碱,正面黄色、湿润小菌落,易挑取,是实验室常见模式菌株。一、绿色防控菌株CGMCC No.28950对南方根结线虫防效突出,盆栽试验虫口密度降70 %;同步产蛋白酶、几丁质酶,破坏虫卵壁,为蔬菜连作障碍提供化学杀线剂的替代方案。二、促生提质该菌溶磷量达277 mg kg⁻¹,解钾能力明显,可分泌IAA,使玉米、番茄根系增30 %,吸磷量提棚试验每亩滴灌200 g菌粉,番茄Vc含量提高12 %,糖酸比更协调,货架期延长5天。三、环境修复贵州大学团队利用菌株GZU-Lys01转化煤矸石中难溶磷钾为植物可吸收养分,制备微生物肥料;还能矿化固定垃圾焚烧底灰和尾矿中的Cd、Pb,吸附量分别达50 mg g⁻¹与35 mg g⁻¹,为矿区复垦提供低成本方案。四、工业酶潜力该菌产果胶酶活性高,可在25 ℃、pH 8条件下水解果胶,为果汁澄清、麻类脱胶提供低温酶源;耐碱蛋白酶已在洗涤剂中试用,10 ℃下去污力提升30 %,节能20 %。长孢链霉菌