MB培养基基础(Marine Broth Base)是一种专为海洋细菌设计的富营养液体培养基,由蛋白胨、酵母粉及多种无机盐组成,pH 7.2–7.6,渗透压与海水相当。配方中氯化钠浓度约2–3%,并补充镁、钾、钙等海水中主要离子,可瞬时启动依赖高盐环境的嗜盐菌与耐盐菌,缩短延滞期。实验室常规做法是将培养基干粉溶解于蒸馏水后,补加陈海水或人工海盐,即可恢复接近自然海水的离子谱,使挑剔的海洋放线菌、弧菌、假单胞菌等迅速进入对数生长,用于后续分离、保藏或活性物质筛选。由于海洋微生物常产色素、抗生物质及胞外多糖,MB培养基的高营养特性可充分展现这些次级代谢潜能:弧菌在28℃、180 r/min振荡培养12小时,菌浓即可达10⁹ CFU/mL,菌液呈乳白或淡粉;某些Planococcus则分泌墨蓝色素,使整瓶培养液变为靛蓝,成为天然色素研究的理想起点。若需固体培养,只需补加1.5%琼脂,即成MBA平板,可在表面涂布沉积物悬液,28℃培养2–3天,挑取形态各异的单菌落进行16S rDNA鉴定,流程简洁高效。在质量控制方面,MB培养基需用人工海水或陈海水配制,切忌直接使用自来水,以免钙镁离子不足或氯残留抑制菌体;灭菌后若出现沉淀,多为镁盐析出,可50℃水浴复溶,不影响使用。
肉汤培养基(测磷细菌菌数)是一种把“富营养”与“溶磷筛选”合二为一的液体计数培养基。它在传统牛肉膏蛋白胨肉汤基础上进行精简:牛肉膏3 g、蛋白胨10 g、NaCl 5 g提供碳氮和生长因子;磷源改为0.2 g难溶性磷酸三钙,经球磨过300目,悬于蒸馏水中呈乳白混悬液;pH调至7.0±0.2,分装试管后121℃灭菌15 min,冷却振荡重悬即可接种。由于无琼脂,培养基既保持肉汤的高营养促生优势,又以悬浮颗粒Ca₃(PO₄)₂为“磷开关”,可同步完成溶磷功能验证和菌数测定,适用于土壤、根际或堆肥浸出液中溶磷菌群的快速评估。操作方法沿用比较大可能数(MPN)法:将样品按10⁻¹–10⁻⁶梯度稀释,各取1 mL加入含5 mL肉汤培养基的螺口管,每稀释度3重复,28℃静置培养48 h。溶磷菌生长使Ca₃(PO₄)₂颗粒被酸溶解,培养液由乳白→局部透明→全管澄清,并伴随菌膜形成;非溶磷菌虽可增殖,但培养基保持混浊无透亮。以“出现澄清+菌膜”为阳性管,查MPN表即可算出每克样品的溶磷菌数,全程只需3天,比平板溶磷圈法缩短一半时间。质量控制要点:灭菌后磷酸三钙易沉降,使用前需涡旋混匀;若肉汤本身含磷(牛肉膏批次差异),可先用磷钼蓝法测可溶磷,超过5 mg L⁻¹即弃用。总状毛霉昼夜输送给花生,亩产蛋白因此提升三成,农户少施20公斤尿素,却多收一筐饱满果仁。

改良巴尔斯氏培养基基础(不含硫酸亚铁铵)是专为趋磁细菌Magnetospirillum gryphiswaldense等设计的高纯度液体平台。经典巴尔斯配方中,硫酸亚铁铵既作铁源又兼还原剂,却易氧化沉淀,导致批次差异大、磁小体晶型不均。改良版本彻底剔除该盐,把铁供给与氧化还原控制拆成两步:基础培养基只含乳酸钠、琥珀酸钠双碳源,酵母粉0.05 %,K₂HPO₄ 5 mmol,MgSO₄、CaCl₂及微量元素各1 mL L⁻¹,pH 6.8±0.1,经0.22 μm过滤除菌,保证无色透明、无沉淀,4 ℃可保存3个月。使用时,先在基础液中通N₂/CO₂(80:20)除氧,再按实验目标由无菌厌氧瓶补加可溶Fe(Ⅲ)-柠檬酸或FeCl₂溶液,终浓度10–100 μmol,铁形态与剂量可精确到0.1 μmol,避免传统配方一次性投铁产生的氧化应激。与此同时,通过微氧发酵系统把溶解氧稳定在0.5 %空气饱和度,氧化还原电位降至–50 mV,磁小体合成效率提升2.4倍,Cmag值达1.2以上,而细胞干重仍保持2 g L⁻¹。改良基础还兼容同位素标记与金属掺杂:只需把⁵⁷Fe-柠檬酸或CoCl₂按1 at.%比例加入,即可制备高纯度⁵⁷Fe或Co掺杂磁小体,为Mössbauer谱、磁热疗研究提供批次可重复的生物纳米磁源。
绿色绿芽菌(Blastochloris viridis)是一株绿色、能出芽的光合细菌,隶属α-变形菌纲芽生绿菌属。菌体圆形至卵圆,具极生鞭毛,可活跃游动;革兰氏阴性,无芽孢,不形成芽孢链,通过不对称出芽繁殖,是光合菌中少见的“芽殖型”。它的培养物呈橄榄绿至翠绿,源于细菌叶绿素b与类胡萝卜素的组合,吸收波段集中在700-900 nm近红外区,可在弱光或近红外环境中进行不产氧光合,为光能异养生长提供优势。更适生长温度30℃,pH 6.8-7.5,盐度0-6%,兼性微好氧,黑暗条件下也能缓慢呼吸增殖,适应淡水到河口多种生境。绿色绿芽菌的光合内膜为囊泡状,含Q-8、Q-10、MK-7、MK-9等醌类,G+C mol% 66-71,系统发育与红游动菌属更接近。其反应中心结构与电子传递链已被解析,是研究光能转化和人工光合器件的模型生物。应用方面,菌株ATCC 19567常用于教学与科研;因其能利用低级脂肪酸和多种有机酸,也被探索用于高浓度有机废水处理,可在光照厌氧反应器中同步去除COD并回收单细胞蛋白,为“光合-净水-资源”一体化提供新思路。随着合成生物学发展,绿色绿芽菌的细菌叶绿素b合成基因簇已被克隆,为构建近红外驱动细胞工厂奠定了遗传基础。③分泌蛋白酶与脂肽,抑制番茄青枯、辣椒疫霉,病指下降四成。

史氏芽孢杆菌(Bacillus smithii)是芽孢杆菌属中嗜热分支的,标准菌株 JCM 9076 更初从高温堆肥中分离,能在 55 ℃、pH 6.5 条件下旺盛生长,芽孢可耐 100 ℃沸水 2 h,是验证高压灭菌效果的指示菌之一。其细胞壁含特殊脂肪酸,膜脂熔点高,配合小分子热休克蛋白,使核糖体和 DNA 在高温下仍保持构象稳定,赋予菌体“耐热盾牌”。2024 年,中国团队从镉污染稻田筛选到解磷菌株 M2(保藏号 CCTCC M2024167),鉴定为 Bacillus smithii。该菌兼具三重抗逆:耐盐 6 %、耐镉 50 mg·L⁻¹,并能在 pH 4.5–9.0 范围内正常分泌有机酸,将难溶磷酸钙转化为磷,盆栽试验中使玉米根际有效磷提高 42 %,籽粒镉含量下降 35 %,实现“增磷减镉”同步完成。在酶制剂方向,史氏芽孢杆菌是“高温酶工厂”。其胞外碱性淀粉酶更适温度 70 ℃,在洗涤剂、烘焙和酒精浓醪发酵中可省去降温环节,节能 15 %;耐有机溶剂蛋白酶可在 60 ℃、30 % 乙醇环境中保持 80 % 活性,为生物炼制提供新型催化剂。农业应用上,M2 菌株可与秸秆堆肥复配,使堆体温度 24 h 升至 65 ℃,纤维素降解率提高 30 %,堆肥周期缩短 7 d;作为功能性菌剂,每亩随基肥施入 200 g 菌粉,冬小麦越冬前磷吸收量提高 18 %,分蘖数增加 1.2 个,对后期倒伏有明显缓解作用。温室试验显示,每亩用两百克菌粉拌基质,黄瓜枯萎率降四成,农药少打一半,果实仍青亮。平滑正青霉
瘤内菌变膨体,固氮酶把空气中占七成却极稳定的N₂裂成NH₃,日夜输送给宿主,自己只留一口碳糖。绿毛壳
牛奶类芽孢杆菌(Paenibacillus lactis)更早从原料奶和干酪凝块中被分离,因而得名。它呈短杆状,革兰氏阳性,具周生鞭毛,可形成椭圆芽孢,更适30–37℃、pH 6–7,耐干燥、耐冷链,是乳品环境中常见的“温和住客”。一、乳品益生菌株MB2401能分泌胞外多糖,在酸奶发酵中与 Streptococcus thermophilus 协同,可提升黏度、减少乳清析出,延长货架期7天;同时产细菌素 Lactocin 2401,对单增李斯特菌抑菌带宽达22mm,为原奶生物保鲜提供天然“护栏”。二、肠道健康牛奶类芽孢杆菌耐胃酸、耐胆盐,能形成芽孢穿越胃肠道,在结肠萌发后分泌果聚糖酶,降解膳食多糖产生丁酸,降低pH,抑制沙门氏菌定植;小鼠试验显示,日灌胃10⁸ CFU,血清IgA提高35 %,腹泻率下降60 %,已列入欧盟QPS清单,安全等级高。三、工业酶潜力其低温普鲁兰酶在10℃仍保持70 %活性,可用于乳清寡糖制备;耐碱脂肪酶更适pH 9、40℃,在CIP管道清洗中分解乳脂肪,节能15 %,减少化学碱用量。四、农业应用将菌株NZ1制成活菌数10⁸ CFU mL⁻¹的“乳菌肥”,滴灌奶牛场周边青贮玉米,土壤有机质提高12 %,产奶净能增加8 %,实现种养循环。绿毛壳