【点评原理】关节软骨遭到急性外伤和慢性磨损，出现不同程度的损害，导致关节疼、活动受限，乃至功能丧失。关节软骨的修正首要靠软骨细胞的增殖分化，生产满足的细胞外基质修正软骨缺损。人软骨细胞通常是停止的，血管化程度低，营养首要来源于关节液和软骨下骨，修正再生则显得十分有限，需求外源性的手法来辅佐修正。DXMS破坏软骨细胞的代谢平衡，引起软骨细胞的逝世或凋亡，从而引起软骨损害。斑马鱼的骨骼发育与其他脊椎动物骨骼发育进程极其类似，因此，可用于软骨修正功效点评。斑马鱼的软骨首要散布于头部，包括七对咽颅软骨弓（下颌弓、舌弓及五对鳃弓）和脑颅软骨。根据转基因软骨荧光斑马鱼特性，患有软骨损害的斑马鱼的软骨荧光强...

应用视网膜修复斑马鱼因为它具有自我修复破损视网膜的独特能力。人类视网膜中也拥有类似斑马鱼能够修复视网膜的细胞，并计划在5年内将研究结果用于失明患者***，让他们重见光明，这可能有助于***因视网膜受损引起的失明。听觉修复放大2.1万倍的耳蜗毛细胞华盛顿大学西雅图一直在对斑马鱼进行研究，试图解决人类听力丧失的问题。和许多其他水生生物一样，斑马鱼在身体表面长有毛细胞。这些毛细胞的作用是探测水中的振动，其原理与人类内耳中的毛细胞相似。但是，与人类不同的是，斑马鱼的毛细胞在受损后还可以再生。研究人员希望他们的工作可以揭开谜底，保护人类的毛细胞免受损伤、并推动毛细胞的再生。另一组研究试图了解导致斑马鱼、...

斑马鱼基因突变技术服务：包括插入诱变和ENU化学诱变技术。斑马鱼转基因资源库和突变体资源库服务：包括研制、收集和分发各种斑马鱼转基因品系和突变体信息服务：包括建立斑马鱼资源信息网络数据库和提供斑马鱼基因组生物信息学分析服务。转基因斑马鱼的制备主要采用两种方法：通过Tol2转座子构建组织特异性表达报告基因的方法；利用特定基因的启动子/增强子驱动报告基因在特定细胞组织中表达的方法。首先构建以Tol2转座子为基础的enhancertrap载体，在放大的照片中可看到耳蜗内的毛细胞在放大的照片中可看到耳蜗内的毛细胞斑马鱼试验都需求哪些设备？斑马鱼毒性试验1、斑马鱼可应用于发育生物学的细胞谱系分析、突变鉴...

鱼类的性腺发育和繁殖行为受到下丘脑-垂体-性腺轴（HPG轴）的调控。下丘脑排泄促进性腺开释元素（GnRH），其作用于脑垂体，影响其排泄促黄体生成素（LH）和促卵泡素（FSH），这两种通过血液循环与相应的受体结合后作用于性腺，影响性腺产生睾酮（T）、17β-雌二醇（E2）和11-酮基睾酮（11-KT）等类固醇，从而使精子和卵子的发育和成熟。行为研讨鱼类行为轨迹的盯梢和量化研讨中描绘的一切鱼类行为测验都用摄像机(SONYHandycam,FDR-AX60,Japan)进行了录像，并运用动物行为盯梢软件VisuTrack动物行为剖析软件进行了离线剖析。单个空间实际上被一个内圆分红两个部分。(b)游程...

斑马鱼作为免疫学新模式生物的优点在于：（1）与传统的免疫学模式生物——小鼠相比，斑马鱼有体型小，子代数量多，培育要求低，易于养殖，饲养成本低，便于开展大规模研究。（2）斑马鱼个体发育过程是在全透明状态下完成，使得整个心血管系统的发育过程能十分完整的被观察。特别是免疫系统个体发育的相关资料，是无法从小鼠上所进行的实验中轻易获得的。（3）先期对斑马鱼的遗传学研究积累的丰富突变库也为研究免疫相关基因的功能提供了条件。（4）在已知生物中，鱼类是**早具备获得性免疫系统的纲。斑马鱼实验成效验证！斑马鱼染毒实验费用随着成效护肤和健康年代的到来产品的成效和安全益发受到重视美白、辅助***…当各种新成分层出不...

斑马鱼在国际上已广泛应用于食品药品早期安全性评价和毒理学研究，辉瑞、默克、强生、阿斯利康等跨国医药巨头都在用斑马鱼进行药物早期安全性评价。FDA和EMA早在2009年就通过了对斑马鱼安全药理学数据的GLP检查。中国重大新药创制专项自2012年开始将斑马鱼药物安全性评价技术列为了关键技术开发课题之一，并连续滚动支持。斑马鱼在化学品安全性评价与环境毒理学评价领域的应用也已经非常，OECD已经颁布了9项相关的指导原则，中国也已制订了10项相应的国家标准。环特根据OECD指导原则和中国的国家标准，提供一系列的斑马鱼化学品安全性和环境毒理学评价服务。为什么用斑马鱼做试验？斑马鱼行为实验测试方法鱼类的性腺...

在国际上，斑马鱼模式生物的使用正逐渐拓展和深入到生命体的多种系统（例如，神经系统、免疫系统、心血管系统、生殖系统等）的发育、功能和疾病（例如，神经退行性疾病、遗传性心血管疾病、糖尿病等）的研究中，并已应用于小分子化合物的大规模新药筛选。我国开展斑马鱼相关的研究无论在规模还是在重视程度上都远远落后于国际形势发展的需要。推动和发展斑马鱼模式生物在我国生命科学研究中的***使用是本中心的宗旨。在国家科技部重大科学研究计划的支持下，我们汇集优势，整合我国现有的斑马鱼主要研究力量，在未来几年内逐步建立全国共享的斑马鱼模式动物研究技术和资源库，向国内同行提供斑马鱼资源、信息和技术支撑。本着提高服务效率和质...

传统药物临床前研究模式主要包括两个环节：体外实验和体内实验。体外实验（包括细胞实验、生化实验、微生物实验等）具有快速高效的优点，但是体外实验的结果与人体实验结果的可比性差。常规的哺乳类动物实验——包括老鼠、兔、犬、猪及猴子等——可提供可比度较高的筛选评估结果，但实验周期较长、成本高、审批程序复杂，严重影响药物研发的进度。斑马鱼模型既具有体外实验快速、高效、费用低等优势，又具有哺乳类动物实验预测性强、可比度高等优点，可以有效弥补体外实验和哺乳类动物实验之间的巨大生物学断层，完善现有药物研发体系。斑马鱼实验的可靠性。北京斑马鱼实验研究价值在这项研究中，科研团队利用模式生物斑马鱼来研究肌肉再生。这种...

当各种内源性和外源性DNA损害因子诱发细胞DNA链断裂时，其超螺旋结构受到破坏，在细胞裂解液作用下，细胞膜、核膜等膜结构受到破坏，细胞内的蛋白质、RNA以及其他成分均扩散到细胞裂解液中，而核DNA因为分子量太大只能留在原位。在中性条件下，DNA可进入凝胶发生搬迁，而在碱性电解质的作用下，DNA发生解螺旋，损害的DNA断链及片段被释放出来。因为这些DNA的分子量小且碱变性为单链，所以在电泳过程中带负电荷的DNA会离开核DNA向正极搬迁构成“彗星”状图像，而未受损害的DNA部分保持球形。DNA受损越严重，发生的断链和断片越多，长度也越小，在相同的电泳条件下搬迁的DNA量就愈多，搬迁的距离就愈长。通...

知识产权成果方面，环特生物在斑马鱼应用领域已牵头起草、发布团体标准3项，申请国家发明专利57项、授权27项（截止2021年5月）。公司自主开发斑马鱼技术模型150多种，发表SCI及核心期刊论文99篇（IF=12）、英文专著1部。有7个新药项目，成功将环特生物斑马鱼实验数据用于CFDA的临床试验申报。两项成果分获浙江省科学技术进步奖三等奖和神农中华农业科技奖一等奖，并作为技术方承担2022年杭州“亚运果蔬类食品农药残留非靶向快筛斑马鱼模型构建研究”的项目。两项斑马鱼产业化项目成果鉴定，经张伯礼院士和孙宝国院士技术**审核评定，分获“国内**水平”和“先进水平”。斑马鱼可以在体外试验和哺乳动物试验...

作为一个良好的模式生物，斑马鱼为人类生理学的发展做出了贡献。同样，人类不能忘记斑马鱼的付出。希望我们每个人能够给予斑马鱼应得的尊重，也同样祈祷人类能够利用斑马鱼开展更多有价值的实验。环特生物，依托斑马鱼实验生物检测技术，为客户提供产品和质控解决方案。主要应用：临床前研究、产品功效及安全性评价、药物高通量筛选、毒性试验、水质测定、斑马鱼技术授权培训、斑马鱼实验室建设及斑马鱼养殖系统等。环特生物已通过国家CNAS、CMA资质认证及AAALAC国际认证，并建立生物评价研究中心标准GLP实验室。先后荣获德国纽伦堡,俄罗斯,英国,中国四大国际发明展金奖、国家高新技术企业等荣誉，并与中国农科院质标所联合成...

在饲养体系里，科研人员们会准确调控水的温度、电导率等参数，并设定固定的日常光照时刻，以保证斑马鱼能在实验室内大规模繁育，确保实验的有序进行。仪器设备实验室除了先进的饲养体系，还具有了先进的正置荧光显微镜、荧光定量PCR仪、荧光酶标仪、斑马鱼行为分析仪等检测设备。斑马鱼成鱼体长5cm左右，其胚胎通明，在受精72h后完结孵化，并在孵出后3个月内性成熟。成年斑马鱼的繁衍周期短(一般7d左右)，若条件适宜，成年雌性斑马鱼可定期产卵(每次200～300个)。在斑马鱼的前期胚胎及幼体的发育过程中，尚无性别分解，原始性腺都是相同的且具有双向发育的潜能，易受环境(温度、光照、pH值等)因素的影响而改变其遗传性...

人们发现，斑马鱼的优点十分，比如斑马鱼与人类基因十分相似，其信号传导通路与人类基本近似，生物结构和生理功能与哺乳动物高度相似，具有个体小、发育周期短、实验周期短、费用低、体外受精、透明、单次产卵数较高以及实验用药量小等优点，斑马鱼作为模式动物受到运用。之后的历史上，科学家们用模式生物斑马鱼开展了许多实验。1995年诺贝尔生理学或医学奖得主ChristianeNusslein-Volhard致力于识别和分类对决定身体计划和身体片段形成至关重要的少量基因，将目光转向鱼类，以此发现的突变。斑马鱼在基因转录调控作用实验、视网膜实验、心脏再生实验上发挥着关键作用，目前已建立高尿酸血症、、抑制血管生成、发...

心血管病这些鱼类也主要用于研究心血管疾病，因为它们具有与人类胚胎相似的胚胎心脏结构。此外，斑马鱼的优点是能够在没有足够的心脏循环的情况下生存。氧气进入斑马鱼胚胎，通过被动扩散到达其他组织。这种独特的特征有助于胚胎从初始阶段发育，尽管有心血管缺陷。他们在这一领域的应用的一个例子是探索炎症和心肌梗死之间的联系。神经病学由于人类和斑马鱼大脑中存在大量相似的信号蛋白，因此该模型也被***用于神经系统疾病的研究。几种人类神经系统疾病在这些鱼类中也有对应的疾病。例如，独眼针头是斑马鱼的变种，它有一个较小的腹侧大脑，只有一只眼睛。这与人类疾病“无脑症”相比较，在这种疾病中，病人有一个小的大脑和一只眼睛。这种...

斑马鱼的皮肤结构和功用与人类高度类似，含有基底层、棘层、颗粒层、通明层和表皮角质细胞层。因而，业内普遍认为以斑马鱼胚胎为试验基础的结果，在一般情况下适用于人体，可对化妆品功效宣称进行检测评价，例如抗氧化、抗糖基化、抗老、淡斑亮肤等等。依据已存案成功的案例显示，若不包含前期准备的时间，只是上样检测到出具结果，斑马鱼检测的周期要比其他检测方式周期更短且本钱更低。另外，依据欧盟动物保护法，出生5天以内的斑马鱼胚胎和幼鱼不属于动物，能够代替哺乳动物测试，契合3R（代替、减少、优化）原则。因而，斑马鱼检测在动物福利层面也契合了年代潮流。斑马鱼实验需求注意什么呢？青海斑马鱼实验文献斑马鱼是功能基因组是科学...

随着成效护肤和健康年代的到来产品的成效和安全益发受到重视美白、辅助***…当各种新成分层出不穷，怎样证明其成效？正式投放市场前，怎样保证产品安全性？斑马鱼是目前较为成熟的高通量挑选形式生物，拥有与人相似的安排组织和系统，基因和信号通路与人类高度保守。同时，斑马鱼被誉为“水中小白鼠”，具有多种研究优势特点：1、个别小2、发育周期短(24小时可形成身体组织结构)3、试验周期短(1周内可得挑选成果)4、幼鱼身体通明(便于调查)5、单次产卵数较高(约150~200枚)6、试验用药量小斑马鱼急性毒性试验试验报告。斑马鱼实验外包公司斑马鱼作为模式生物的优势斑马鱼已广泛应用于生命科学领域的基础研究，也早已应...

截止目前，环特生物已通过国家CNAS实验室认可、CMA资质认定及 AAALAC国际实验动物认证。多项技术成果先后荣获德国纽伦堡国际发明金奖、英国国际发明展金奖及杰出创新奖、俄罗斯“新时代”第十六届国际发明与新技术展金奖、第48届日内瓦国际发明展银奖等国际大奖。近年来，环特生物承担省级（含）以上科研项目8项，相继被评为国家高新技术企业、浙江省科技型中小企业，且设有院士**工作站、省级****研发中心、浙江省博士后工作站等科研平台，并与中国农科院质标所成立了“农业农村部农产品质量标准研究中心生物评价实验室”的联合创新平台。斑马鱼发育形态学研究成果。显微注射荧光标记斑马鱼应用视网膜修复斑马鱼因为...

斑马鱼模型既可以像体外实验那样对作用靶点明确的候选化合物进行靶向筛选和药效学评价，进行单个或多个作用靶点的筛选和验证，也可以像哺乳动物一样对靶点不明或致病机理复杂疾病的***药物进行基于药效学的筛选和评价，能够提高药物早期药效学评价的灵敏性和可靠性，有助于在药物研发早期淘汰那些体内药效学评价结果不佳的候选化合物。同时，斑马鱼模型能够早期发现化合物毒性、早期鉴别化合物毒性靶***，从而做到“早期评价，早期淘汰”。将斑马鱼模型鱼体外实验和哺乳动物实验相结合，可以从整体上缩短药物临床前早期研发的实验周期，降低实验成本，提高实验预测的准确性，进而提高药物研发效率，降低药物研发风险。斑马鱼是什么?斑马鱼...

【试验方案】咱们将受测试斑马鱼分成两组，分别是正常对照组和供试品组（供试品通过溶解到养鱼用水中摄入到斑马鱼体内）。皮肤吸收供试品一段时间后，咱们通过中性粒转基因荧光斑马鱼，调查皮肤/肌肉刺激性；通过表型拍照，调查肌肉纹理及皮肤色素变化；通过AO染色凋亡细胞，调查皮肤细胞凋亡情况。【评价结论】1.通过每组30尾斑马鱼的比照试验，供试品组的斑马鱼皮肤肌肉发生显着的毒性表型（包括肌肉纹理反常和色素反常），在斑马鱼尾部可见显着的凋亡细胞，在躯干部可见显着的中性粒细胞合集。2.本试验证实了该供试品对斑马鱼有皮肤肌肉毒性。物质对淡水鱼 (斑马鱼) 急性毒性测定方法。斑马鱼养殖 广州测验斑马鱼的行为和认知才...

【试验计划】咱们将受测试斑马鱼分成两组，分别是正常对照和服用/打针供试品组（供试品经过溶解到养鱼用水中或打针的方法摄入到斑马鱼体内）。服用/打针药物一段时间后，检测尾长、彗星长、尾矩和Olive尾矩。能够看到，服用/打针供试品组斑马鱼细胞核呈现拖尾。该供试品改变DNA链的负超螺旋结构、空间构象，使DNA链断裂、形成类核，终究导致细胞逝世（坏死、凋亡或自体吞噬）。【点评结论】1.经过每组30尾斑马鱼的比照试验，服用/打针供试品组的斑马鱼细胞核呈现显着拖尾，与正常对照组存在显着的差别。2.本试验证明了该供试品对斑马鱼有基因毒性。斑马鱼药物毒理学评价技术。斑马鱼养殖 实验室斑马鱼CRISPR基因编辑...

作为生命科学、发育生物学、环境科学等研讨的方式生物，斑马鱼适用于多种研讨用处：化妆品、养分保健食品的成分成效和安全性评价生物学质量控制、新适应症发现、配方挑选和天然药物研制等实验室养殖系统完美生科院的斑马鱼养殖实验室具有单独的、恒温恒湿的斑马鱼标准养殖系统：1、清水供水系统2、清水贮存及水质控制系统3、斑马鱼专属循环养殖系统等养殖系统里自成一个生态链，斑马鱼交配、孕育、喂养、养殖的全过程都在其间进行。斑马鱼在药理学毒理学的应用。斑马鱼无菌模型以下是多孔板实验的具体进程：1、准备实验设备和资料多孔板实验需求一个容器、一个多孔板、一些食物和一些斑马鱼幼鱼。容器应足够大，以包容多个斑马鱼幼鱼，但不要...

心血管病这些鱼类也主要用于研究心血管疾病，因为它们具有与人类胚胎相似的胚胎心脏结构。此外，斑马鱼的优点是能够在没有足够的心脏循环的情况下生存。氧气进入斑马鱼胚胎，通过被动扩散到达其他组织。这种独特的特征有助于胚胎从初始阶段发育，尽管有心血管缺陷。他们在这一领域的应用的一个例子是探索炎症和心肌梗死之间的联系。神经病学由于人类和斑马鱼大脑中存在大量相似的信号蛋白，因此该模型也被***用于神经系统疾病的研究。几种人类神经系统疾病在这些鱼类中也有对应的疾病。例如，独眼针头是斑马鱼的变种，它有一个较小的腹侧大脑，只有一只眼睛。这与人类疾病“无脑症”相比较，在这种疾病中，病人有一个小的大脑和一只眼睛。这种...

斑马鱼作为模式生物的起源和发展1938年，美国布朗大学Roosen-Rung教授***报道斑马鱼发育形态学研究成果。1950年代，美国罗格斯大学K.KennethHisaoka教授***报道斑马鱼毒理学研究成果。1972年，美国俄勒冈大学GeorgeStreisinge教授开始斑马鱼发育生物学研究和模式动物建立工作。1989年，美国俄勒冈大学MonteWesterfield教授出版斑马鱼研究圣经TheZebrafishBook***版。1998年，较早斑马鱼模式生物数据库ZFIN成立。1998年，全球***家斑马鱼药物研发服务外包公司成立。2004年，斑马鱼国际资源中心（ZIRC）在俄勒冈大学...

还记得2015年12月份CFDA批准进行临床试验两个1.1类化药新药吗？浙江仙琚制药股份有限公司的奥美克松钠及其注射剂和北京市**防治研究所的1.1类血管生成抑肽及其注射剂。作为这两个新药临床前研发的参与者之一，环特生物的斑马鱼平台在其中发挥了重要作用，听我们说说其中的故事吧奥美克松钠是由浙江仙琚制药与杭州奥默公司一起研制的***神经肌肉阻滞的药物，其申报适应症为在全麻手术中逆转不同浓度罗库溴铵、维库溴铵（这两种药物都是手术中常用的麻醉剂）诱导的神经肌肉阻滞，也就是麻醉肌松类药物。奥美克松钠属于重大专项品种，也是特殊审评，从申请临床到获批历时16个月。奥美克松钠的作用机制与默克的Bridion...

而且通常斑马鱼产卵数量大，测试的样本数很多，这样一来，可以确保统计学意义上显赫性与数据的可靠性。同时，早期的安全评价还可以评估药物对多种组织的伤害程度。因此，可用于测试潜在药物对生物体的毒性评估。此外，科学家们还发现，斑马鱼也是检测水污染程度的优良物种，因为转基因斑马鱼可以根据污染物浓度的变化而发出可看到的荧光。随着研究的深入，斑马鱼在人类科学史上的地位已不可撼动，这位实验动物中的新星将和那些推动人类进步的科学家们一道永载史册。利用斑马鱼实验成效点评。斑马鱼行为轨迹分析仪器斑马鱼作为免疫学新模式生物的优点在于：（1）与传统的免疫学模式生物——小鼠相比，斑马鱼有体型小，子代数量多，培育要求低，易...

斑马鱼模型既可以像体外实验那样对作用靶点明确的候选化合物进行靶向筛选和药效学评价，进行单个或多个作用靶点的筛选和验证，也可以像哺乳动物一样对靶点不明或致病机理复杂疾病的***药物进行基于药效学的筛选和评价，能够提高药物早期药效学评价的灵敏性和可靠性，有助于在药物研发早期淘汰那些体内药效学评价结果不佳的候选化合物。同时，斑马鱼模型能够早期发现化合物毒性、早期鉴别化合物毒性靶***，从而做到“早期评价，早期淘汰”。将斑马鱼模型鱼体外实验和哺乳动物实验相结合，可以从整体上缩短药物临床前早期研发的实验周期，降低实验成本，提高实验预测的准确性，进而提高药物研发效率，降低药物研发风险。斑马鱼用来做什么试验...

随着成效护肤和健康年代的到来产品的成效和安全益发受到重视美白、辅助***…当各种新成分层出不穷，怎样证明其成效？正式投放市场前，怎样保证产品安全性？斑马鱼是目前较为成熟的高通量挑选形式生物，拥有与人相似的安排组织和系统，基因和信号通路与人类高度保守。同时，斑马鱼被誉为“水中小白鼠”，具有多种研究优势特点：1、个别小2、发育周期短(24小时可形成身体组织结构)3、试验周期短(1周内可得挑选成果)4、幼鱼身体通明(便于调查)5、单次产卵数较高(约150~200枚)6、试验用药量小斑马鱼可以在体外试验和哺乳动物试验之间起到了很好的效果。广州环特科技斑马鱼是种模式生物，用来做研究的由于斑马鱼基因与人类...

斑马鱼转基因品系制备服务简介1.转基因斑马鱼转基因技术包括显微注射、电穿孔技术（电脉冲介导）、精子载体法、GAL4/UAS转录系统、Tol2转座子介导、拟型反转录病毒介导、重组杆状病毒介导等方法。2.转基因技术目的2.1通过定点敲除技术进行基因鉴定和功能研究；2.2利用报告基因对受体等蛋白质进行功能研究；2.3构建各种斑马鱼突变体，通过斑马鱼疾病模型进行人类疾病研究和药物筛选；2.4构建含有特异性启动子的生物感应器，用于环境监测。3.Tol2转座子介导的转基因技术优点3.1Tol2转座子可携带大片段DNA；3.2Tol2转座子没有位置偏好性，几乎能整合到染色体的任意位置；3.3Tol2转座子的...

传统药物临床前研究模式主要包括两个环节：体外实验和体内实验。体外实验（包括细胞实验、生化实验、微生物实验等）具有快速高效的优点，但是体外实验的结果与人体实验结果的可比性差。常规的哺乳类动物实验——包括老鼠、兔、犬、猪及猴子等——可提供可比度较高的筛选评估结果，但实验周期较长、成本高、审批程序复杂，严重影响药物研发的进度。斑马鱼模型既具有体外实验快速、高效、费用低等优势，又具有哺乳类动物实验预测性强、可比度高等优点，可以有效弥补体外实验和哺乳类动物实验之间的巨大生物学断层，完善现有药物研发体系。物质对淡水鱼 (斑马鱼) 急性毒性测定方法。研究斑马鱼的实验技术斑马鱼不仅小，算是一种寿数很短的鱼种，...

斑马鱼作为模式生物的优势斑马鱼已广泛应用于生命科学领域的基础研究，也早已应用于化学品安全和环境毒理学监测领域。二十世纪末以来，斑马鱼开始进入疾病研究和新药研发领域，并收到日益广泛的关注。2003年，美国国立卫生研究院（NIH）将斑马鱼列为继小鼠和大鼠后第3大脊椎模式生物；2009年，FDA和EMEA接受用斑马鱼进行的完全学药理学评价数据申报临床实验，标志着斑马鱼药物毒理学与安全性评价模型得到了欧美**的正式认可；到了2015年，中国实验用鱼（斑马鱼）质量控制标准起草启动标志着斑马鱼模型在国内的兴起。斑马鱼实验找杭州环特生物。斑马鱼评价化妆品功效空间学习与回忆空间学习回忆是外显回忆的一种长时间存...