外泌体RNA研究的正确打开方式外泌体中有许多货物,包含蛋白质、脂质、糖、代谢物和核酸等,从论文发表数量统计来看,外泌体发挥功能的分子机制研究中RNA占比是比较高的。然而外泌体与组织或细胞RNA相比,在提取和质控上差异较大,不能延用目前主流的产品和技术;同时,外泌体RNA质量控制等也缺乏统一的标准化方案,这些因素将阻碍外泌体RNA的研究。外泌体与细胞RNA相比,有一些差异:1.有来自供体细胞或周围环境RNA的污染;2.外泌体RNA非常微量;3.外泌体RNA中小RNA含量比较高;4.常规的RNA质控方法不适用。综上,对外泌体RNA研究人员,需要选择种高特异、高回收的外泌体分离或RNA提取方法,配合严谨的外泌体RNA质控方法,才能呈现出良好的、准确的、严谨的研究数据和科学结论。针对以上问题,维思克思推荐使用外泌体RNA提取试剂盒(WSR0004-3)、氯仿替代物(WZ13)、外泌体RNA质控试剂盒(WSR0013-1)、外泌体RNA定量试剂盒(WSR0039)。外泌体研究工具高灵敏度检测试剂,微量样本即可分析,减少样本用量需求。脐带间充质sEVs脂质组

外泌体研究常见问题解答119.在分离过程中,外泌体含量会发生变化吗?准备的步骤越少,结果越好。很明显,即使你是一个非常熟练的操作员,将超离作为预富集步骤也会导致囊泡的损失。因此,即使囊泡的纯度很高,也无法控制哪些囊泡在处理过程中的丢失。10.为什么沉淀法或超速离心法提取的外泌体看不到沉淀?这种问题通常有三种可能性:1)使用的样本体积太小或外泌体含量太低。2)使用了不透明的超速离心管,一般来说外泌体产量都比较小,不透明管底很难见到明显沉淀的,可以当作有沉淀,继续往后操作即可。3)使用了粘附性低的耗材。部分角转管壁粘附性很低,沉淀很难富集或沉淀很容易滑落,请圆底离心管离心。11.外泌体和微囊泡可以分开提取吗?外泌体和微囊泡无法明确区分二者,所以无法完全分开。维思克思推荐使用下列简便方法:提取外泌体等粒子直径小的细胞外囊泡时,请选用10000g离心后的上清样品;提取含微囊泡在内的大粒子直径的细胞外囊泡时,首先要回收1200g离心的上清,然后将其10,000g离心分离获得的沉淀用PBS悬浮后作为样品使用。同时提取上述两种细胞外囊泡,请使用1200g离心分离的上清作为样品。干细胞sEVsmiRNA测序外泌体研究工具高纯度原料制备,减少实验干扰因素,提升结果可靠性。

间充质干细胞外泌体培养基维思克思推出的重磅产品是什么呢?一句话总结优点:无血清、无异源动物成分、化学成分限定、细胞倍增时间短以及外泌体产量高。本品为化学成分限定培养基,不含血清和血清替代物,无动物源组分,使用过程中也无需添加血清或血清替代物;本品主要含有氨基酸、维生素、无机盐、白蛋白、胰岛素和微量元素等。可用于多种来源的人间充质干细胞传代培养,如骨髓间充质干细胞(BM-hMSC)、脐带间充质干细胞(UCM-hMSC)。产品优势:质量稳定,无外泌体成分影响,细胞培养和外泌体生产的重复性强;外泌体产量高,外泌体产量高达1E+13Particles/L(3D培养);重复性好,培养基批次间一致性,成分明确,利于细胞培养过程外泌体研究;细胞倍增时间短,1:3传代,需2-3天即可进行下一次传代;研究范围广,用于多种干细胞外泌体规模生产,外泌体功能研究,外泌体改造等。产品信息:NovMSCsExosomeSFMediumV2(WSC0008-2)。
外泌体研究常见问题解答61.如何鉴定提取出来的外泌体?根据MISEV2023,鉴定外泌体首先需要通过WB来鉴定细胞外囊泡的标志蛋白是否存在于样品中,通过电子显微镜来观察样品中细胞外囊泡的形态特征,通过NTA等手段来分析样品中细胞外囊泡的群体特征(粒子浓度、直径分布等)。一般从外泌体形态、外泌体粒径和外泌体标志物来鉴定。(1)鉴定外泌体形态:通常使用透射电镜检测(TEM);(2)鉴定外泌体粒径(大小)和浓度:可以使用纳米颗粒跟踪分析(NTA)、纳米流式、纳米库尔特粒度仪检测;(3)鉴定动物细胞外泌体标志物:通常使用WB检测外泌体标志蛋白(CD63、CD9、CD81、TSG101、Alix等),按国际细胞外囊泡协会的建议为检测3个阳性(一般选择2个表面标志,1个内部标志)和1个阴性指标(Calnexin或GM130)。外泌体研究工具多场景应用设计,覆盖基础研究到临床前,提升实用性。

外泌体样本量太大怎么办?外泌体来源,几乎所有细胞都可以分泌外泌体。在科研中,如何处理大体积外泌体样本是众多研究者都觉得十分棘手的问题。目前,常用的分离手段包括超速离心法、尺寸排阻法、沉淀法以及免疫亲和法。然而这些分离方法要么只适用于小体积微量样本,要么就是对仪器要求高、操作复杂。与各位研究者分享维思克思的大体积样本处理经验,愿能为各位研究者提供思路。1.外泌体浓缩试剂。外泌体浓缩试剂可用于大体积外泌体样本的处理,可以高通量、快速实现大体积外泌体样本(如细胞培养上清、尿液等)的浓缩,浓缩后的样本后处理后可进行外泌体的分离纯化、RNA提取、蛋白提取等后续实验。2.超滤管超滤。超滤浓缩是一种常用的分离技术,利用超滤膜对组分进行分离。溶液通过超滤膜,利用膜孔的大小选择性,将分子量较大的物质过滤出来,而将分子量较小的物质通过膜孔。以上大体积外泌体样本处理工具,维思克思均有提供。外泌体浓缩试剂以及超滤管在处理大体积样本上具有突出优势。尤其是外泌体浓缩试剂,操作简便,浓缩倍数高,实验体验有较好的评价,推荐指数较高。浓缩后的外泌体分离纯化,维思克思产品线也非常齐全,包括磁珠法、SEC法等。外泌体研究工具简化包装方案,按需定制规格,降低包装物料浪费。便捷外泌体靶向
外泌体研究工具多功能检测模块,一项试剂多指标分析,提升性价比。脐带间充质sEVs脂质组
SEC法外泌体分离试剂盒。或许你想做外泌体相关研究,却不知如何下手?或许你苦练提纯术却不知如何获得高纯度外泌体?现在可以用UniversalExosomeIsolationKit(SEC外泌体分离试剂盒)来解决以上问题了!本产品分离的外泌体纯度高、回收率高的特点,能够满足绝大多数科研需求。操作简便使用本品时无需复杂设备、从上样到外泌体收集只需半小时。适用范围广适用于各类样本,包括但不限于细胞上清、尿液、血清、血浆等。分离的外泌体结构均一完整、只回收固定范围的外泌体囊泡。使用方法:样品与纯化柱预处理后,按纯化柱规格上样(10mL纯化柱上样1mL;30mL纯化柱上样3mL)。样本滴完后每次加入0.5mL/1mLPBS缓冲液,每0.5mL/1mLPBS收集一个馏分。收集完馏分则按照相关维护方法维护柱子即可。脐带间充质sEVs脂质组
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