外泌体是科学研究的热点,可怎么才能追踪到外泌体在体内的踪迹呢?很多研究者都被这一点给难住了。尽管市面上已经有了许多追踪染料,但这些染料要么就是荧光信号太弱,要么就是背景太高,都存在很多不足。维思克思曾经也深受其害,经过长时间的沉淀与积累,我们终于带来由发明专利“一种pH敏感型探针分子及其应用、一种探针分子的合成方法”转化而来的示踪试剂盒!外泌体标记步骤:1试剂准备。使用时将WisTracker提前从-20℃取出,避光解冻后备用。2标记外泌体。将解冻后的WisTracker添加到外泌体溶液中,室温避光反应30min。3游离探针的去除。推荐用维思克思的WSR0015一步普通离心去除游离探针,得到纯净的荧光标记外泌体。外泌体示踪步骤:1接种细胞。取合适密度的细胞,接种于共聚焦平皿中置于合适条件下培养。2孵育外泌体。细胞计数,当细胞生长到70%时,加入荧光标记的外泌体于细胞培养条件下避光孵育2-4h。3清洗与染色。取出平皿,用PBS清洗3次,加入DAPI溶液,室温避光孵育10min,孵育完成后再用PBS清洗3次。4荧光检测。在激光共聚焦显微镜下观察细胞和外泌体,并拍照记录。外泌体研究工具简化包装方案,按需定制规格,降低包装物料浪费。植物Extracellular Vesicles标志物

外泌体表征与定量难在什么地方?又该怎么做?我们拜访过很多外泌体研究工作者,其中谈到多的是外泌体难以分离,分离后的外泌体不好定量,定量的外泌体数据是否准确等问题。很多人认为外泌体的分离难点在于样本差异、杂质类型或外泌体来源于细胞等,但业内人事认为,外泌体的分离之难,在于没有很好的方法去判定外泌体的纯度和活性。本文从外泌体定量和表征的角度来分析,什么样的外泌体才是高质量的,以及如何对外泌体进行计数。单一定量和表征方法的局限性对外泌体的鉴定方法,目前行业内基本上是一致的:通过形态、粒径范围、标志蛋白等定性检测。1.单一定量方法的局限性对外泌体的定量,使用较多的还是颗粒数。众所周知,外泌体被定义为30-150nm的小细胞外囊泡,比较大和小的外泌体表面积相差25倍、体积相差125倍。而外泌体发挥功能主要依赖其所载货物,比较大和小外泌体对受体细胞的效应也会有较大差异。同时颗粒数的检测方法包括NTA或纳米流式等,并不能分辨外泌体和其他具有相识粒径的其他杂质,在计算颗粒数时,不同纯度外泌体数据的可参考性也并不相同。所以通过颗粒数来对外泌体定量,可能有其局限性。靶向胞外囊泡定制生产外泌体研究工具简易操作设计,无需复杂设备,降低实验室入门成本。

高纯度外泌体冻干粉维思克思提供多种外泌体冻干粉,包括不限于来源于人脐带间充质干细胞外泌体、HEK293外泌体、NK外泌体、牛奶外泌体、植物外泌体等。这些外泌体是通过切向流过滤、多种层析技术等纯化方式,经优化的冻干工艺制得高纯度、品质优良的外泌体。经严格质量控制,可用于外泌体常用研究,包括外泌体功能实验、示踪、载药等多种实验。产品优势:高纯度,纯度高达1E+11Particles/mg(可定制专属项目标准品)。高完整性,本品电镜视野下,外泌体形态完整。稳定性好,以冻干粉形式,4℃保存,有效期2年。质检严格,经多项的质检,保证产品质量。产品信息:具体外泌体标准品清单请联系客服获取。
氯仿买不到?维思克思包有的Trizol法提取RNA是生物实验中常用的RNA提取方法,然而使用该方法也伴随着不少困扰。比如,氯仿属于管制试剂,难以购买!比如,氯仿属于剧毒试剂,使用时气味十分难闻!如果你也遇到以上问题,为什么不选择一款更安全、更环保、使用效果和氯仿相同的氯仿替代物呢?产品特点:安全环保,购买方便;传统抽提试剂氯仿属于危险化学品,可引起急性中毒以及致。本产品与氯仿相比毒性更小,更安全、环保;分层效果明显,本产品有更强的疏水性,水相分层更为明显,易于吸取,手残党友好;RNA质量和得率无差别,提取出的RNA得率及质量与氯仿提取出的五明显差异,可完全替代氯仿;用量小,一瓶更耐用,相较于氯仿,本品抽提RNA时,操作步骤相同,但用量为氯仿的一半,更耐用;适用范围广,可适用于各种动植物细胞、组织以及微生物样本的RNA提取。产品信息:RNAExtractionAgent(WZ13)。外泌体研究工具低损耗设计,试剂利用率高,减少实验成本浪费。

大体积外泌体样本量处理方案大体积外泌体样本在浓缩后根据不同应用,衔接不同的外泌体分离纯化方法,见下文。01外泌体分离纯化对于外泌体的分离纯化,市面上已有许多方法。维思克思总结出常用、简便、效果比较好的三种方法。SEC重力柱基于分子排阻色谱原理,根据被分离组分分子大小差异进行外泌体的分离。具有操作简便、高纯度和高回收率等优点,特别适用于大体积样本中的外泌体分离。SEC离心柱是离心柱式的外泌体分离产品,离心柱中装填的介质能无差别的吸附杂质而不结合外泌体,实现超快速、高收率的外泌体分离。磁珠法外泌体分离试剂盒能特异性捕获外泌体而不吸附杂质,实现高纯度、高回收率外泌体分离。具有操作简便、高纯度和高回收率等优点,特别适用于血浆、血清等复杂样本中的外泌体分离。02外泌体RNA提取在外泌体RNA提取步骤中,常用的是磁珠法和沉淀法。磁珠法外泌体总RNA提取试剂盒能特异性捕获外泌体,实现高纯度、高回收率提取,特别适用于血浆、血清等复杂样本RNA提取。沉淀法外泌体总RNA提取试剂盒,于外泌体微量RNA的提取,具有提取效率高、提取的RNA种类多、回收的miRNA含量高等特点。外泌体研究工具原料利用率优化,降低单位实验成本,提升性价比。血浆EVs实力厂家
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外泌体研究常见问题解答35.CD9或CD81等是否对外泌体起源具有特异性?目前,对于一般的外泌体标记物还没有达成共识。研究界目前的建议是结合检测许多膜结合或膜相关蛋白,以验证膜的存在。靶点CD63和CD81存在于许多不同的外泌体制剂中,CD9也是如此。然而,检测到至少2种不同的细胞系释放CD9阴性的外泌体(Jurkat细胞和几种B细胞淋巴瘤细胞)。同样重要的是,通过对已知在ER、高尔基体或细胞核等隔室中表达的标记物进行染色,来证明不存在污染性囊泡。同样重要的是,用相同的标记物来表征宿主细胞。6.外泌体中是否包含DNA?一般认为外泌体中不包含DNA,或包含少量线粒体DNA。因为外泌体在胞质中形成与包裹货物,而在胞质中存在少量降解的线粒体DNA。目前有一些研究发现,在外泌体的表面,称之为“corona”,中文叫“冠“或”晕“,在外泌体分泌到细胞外后,会吸附微量的游离DNA。植物Extracellular Vesicles标志物
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